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排序方式：

人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建被引量：2: 2012年; 目的构建人前脑啡肽基因（hPPE）修饰的人胚胎肾细胞（HEK293细胞）。方法重组质粒peDNA3．1（＋）／hPPE经限制性内切酶HindHI和NotI进行双酶切获得hPPE基因，运用基因重组技术将hPPE基因与表达载体同源重组，转染293T细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化，测定病毒滴度，再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞。用Westernblot法检测hPPE基因在HEK293细胞中的表达。结果重组慢病毒载体阳性克隆测序结果和基因库的hPPE基因序列完全一致。含有hPPE基因的慢病毒载体，滴度为2．07×10^8TU／ml。转染慢病毒载体后的HEK293细胞，在荧光显微镜下未见到GFP荧光。转染Ubc—GFP—L．V．空病毒载体的HEK293细胞，可见到较强的荧光。Westernblot法检测到经慢病毒载体转染后的HEK293细胞中hPPE基因表达呈阳性。结论成功构建了hPPE基因修饰的HEK293细胞，使hPPE基因可在HEK293细胞中稳定表达。; 白凤杨保仲薛朝霞潘喻飞黄平; 关键词：脑啡肽类细胞系基因修饰基因疗法

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山西省科技攻关计划项目(200903110582)