国家自然科学基金(39980017)
- 作品数：3 被引量：31H指数：3
- 相关作者：王春凤刘尚高孙哲秦泽荣何昭阳更多>>
- 相关机构：中国农业大学吉林农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 干酪乳杆菌胸苷酸合成酶基因的分子克隆与序列测定被引量：4
- 2000年
- 本研究的目的是以干酪乳杆菌 Ｌ． ｃａｓｅｉ ３４１０３染色体 ＤＮＡ为模板，利用 ＰＣＲ技术扩增出胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ， ｔｈｙＡ）基因，利用玻璃奶回收纯化试剂盒回收纯化ｔｈｙＡ基因，并将其克隆入以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ，再转化Ｘ５１感受态细胞，筛选阳性克隆，提取质粒，进行酶切鉴定、ＰＣＲ扩增鉴定，并对ｔｈｙＡ基因片段进行测序，与已知序列进行同源性比较，结果表明成功克隆了 ｔｈｙＡ基因，全长约 １．１ｋｂ，与国外报道的 ｔｈｙＡ基因同源性达９９％。这为构建以ｔｈｙＡ基因为选择压力的非抗生素抗性穿梭表达载体奠定了基础。
- 王春凤秦泽荣孙哲崔尚金何昭阳刘尚高何昭阳
- 关键词：分子克隆
- 饲喂转球虫基因功能乳酸杆菌后对雏鸡体重的影响被引量：15
- 2002年
- 为了验证转鸡柔嫩艾美耳球虫保护性抗原SO7基因的功能乳酸菌对人工球虫攻击的保护性 ,将这种转球虫SO7基因的功能乳酸杆菌给刚出壳的雏鸡饲喂 ,一周后攻球虫卵囊 5× 1 0 4 个 /只 ,通过对试验雏鸡的体重变化来检测转球虫SO7基因工程乳酸菌的有效性 ,设红、白对照组 ,转基因乳酸菌组和乳酸菌对照组。结果表明 :饲喂转基因乳酸菌组雏鸡 ,在攻击球虫后体重增重未受影响。
- 王春凤秦泽荣徐镔蕊孙哲何昭阳刘尚高
- 关键词：球虫乳酸杆菌雏鸡体重
- 以thyA基因为选择压力非抗性质粒载体的构建被引量：19
- 2001年
- 以干酷乳杆菌Ｌ．ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术扩增胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙ－ｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｔｈｙＡ）基因，回收纯化。选择以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ为基本质粒，以ｔｈｙＡ基因取代红霉素基因，获得重组载体并鉴定。此重组载体可以对ｔｈｙＡ基因缺陷的大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ５１和嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａＳ １０７进行功能弥补。进而构建了以ｔｈｙＡ基因为选择压力的非抗生素抗性穿梭表达载体，其大小为３７１６ｂｐ，并命名为ｐＷ４２５ｔ。
- 王春凤秦泽荣孙哲黄瑜何召庆张莉刘尚高
- 关键词：穿梭载体质粒
- 转球虫SO7基因功能乳酸菌饲喂雏鸡后抵抗球虫的免疫保护效果
- 以刚出壳的健康雏鸡为试验对象,将转球虫SO7基因的功能乳酸菌给雏鸡饮服两周后.进行球虫人工感染实验(5×104个卵囊/只),一周后宰杀。通过对实验鸡雏体重、粪便中卵囊数、盲肠病变等指标的检测表明:此转球虫功能乳酸杆菌的抗...
- 王春凤孙哲丛彦龙何昭阳秦泽荣刘尚高
- 关键词：雏鸡抗球虫效果
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫SO7基因在以thyA基因为选择压力的非抗性载体中的表达
- 以纯化的柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊为模板,根据已知的序列设计一对引物,用RT—PCR方法扩增出球虫的SO7基因,回收纯化,将其克隆入以thyA基因为选择压力的非抗生素抗性穿梭表达载体pW425t中,再电击转化thyA基因...
- 王春凤孙哲秦泽荣刘尚高
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫穿梭载体
