安徽省科技攻关计划(12010402135)
- 作品数：6 被引量：44H指数：5
- 相关作者：刘荣玉方磊吴惠梅沈启英何芳更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省科技攻关计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Toll样受体2介导的高迁移率族蛋白1信号分子在小鼠支气管哮喘中的作用机制被引量：7
- 2014年
- 目的 探讨Toll样受体2（TLR2）介导的高迁移率族蛋白1（HMGB1）信号分子在小鼠支气管哮喘（简称哮喘）中的作用机制.方法 非特定病原体（SPF）级雌性C57及TLR2-/-小鼠各14只按随机数字表法分别随机分为2组共4组,即：C57对照组、C57哮喘组、TLR2基因缺失（TLR2-/-）对照组、TLR2-/-哮喘组,每组7只.哮喘组采用卵清蛋白致敏和雾化激发模式建立哮喘小鼠模型,对照组以等量的生理盐水代替.酶联免疫吸附（ELISA）法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）上清中HMGB1含量.免疫组化及Western印迹法检测肺组织HMGB1的表达.结果 成功建立了小鼠哮喘模型.C57哮喘组BALF中HMGB1含量显著高于C57对照组、TLR2-/-哮喘组、TLR2-/-对照组[（59.0±13.9）比（42.3±1.6）、（47.5±2.3）、（42.4±1.4） ng/L,P=0.001、0.037、0.001].免疫组化检测HMGB1在C57对照组及TLR2-/-对照组肺组织中少量表达,而在C57哮喘组及TLR2-/-哮喘组中表达明显,并定位于气道上皮中.Western印迹法检测C57哮喘组肺组织中HMGB1相对表达量显著高于C57对照组、TLR2-/-哮喘组、TLR2-/-对照组（0.92±0.29比0.18±0.09、0.31±0.16、0.21±0.14,P=0.007、0.022、0.009）.结论 TLR2介导的HMGB1信号分子促进了气道的炎症反应,可能参与了哮喘的发病.
- 何芳沈启英方磊蒋旭琴吴惠梅刘荣玉
- 关键词：哮喘高迁移率族蛋白质类TOLL样受体2小鼠
- 自噬对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的影响
- 2014年
- 目的探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。方法以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)为干预药物,空白处理作为对照组,金葡菌感染作为实验组,3-MA干预作为抑制组。金葡菌感染细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。结果金葡菌感染RAW264.7 1 h后,实验组LC3Ⅱ和PI3K蛋白表达最强(P<0.05),抑制组Beclin1和LC3Ⅱ表达显著降低(P<0.05),自噬颗粒聚集显著减少(P<0.05),Rac1表达显著降低(P<0.05),同时,RAW264.7吞噬金葡菌数目显著减少(P<0.05)。结论金葡菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力,自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金葡菌的能力。
- 吕允相吴惠梅方磊刘荣玉
- 关键词：自噬巨噬细胞磷脂酰肌醇3激酶金黄色葡萄球菌
- 金黄色葡菌球菌刺激巨噬细胞对JNK活化和Th1/Th2型细胞因子分泌的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7对c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路活化及其对Th1/Th2型细胞因子表达的影响。方法体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞,以金葡菌的感染复数(MOI)值为10(金葡菌∶细胞=10∶1)刺激RAW264.7细胞,设置时间点为0.5、1.0、1.5、2.0 h。Western blot检测金葡菌刺激后RAW264.7细胞JNK磷酸化水平,ELISA法检测各时间点RAW264.7细胞上清液中白介素-5(IL-5)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平。结果金葡菌刺激RAW264.7细胞后JNK磷酸化水平显著升高,在0.5 h最明显(P<0.01);细胞上清液中IFN-γ水平在金葡菌刺激后0.5、1.0 h显著升高(P<0.01),而在1.5、2.0 h逐渐恢复到正常水平(P>0.05);IL-5水平在金葡菌刺激后1.0 h时开始升高(P<0.05),并在1.5、2.0 h显著升高(P<0.01);另外IL-5/IFN-γ在1.0、1.5、2.0 h时差异均有统计学意义(P<0.01)。结论金葡菌刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞能够活化JNK通路,并影响Th1/Th2型细胞因子的表达。
- 肖文艳方磊吴惠梅丁佩山刘荣玉
- 关键词：巨噬细胞JNKIL-5
- Toll样受体2在七氟醚抑制哮喘小鼠气道炎症中的作用被引量：5
- 2016年
- 目的探讨Toll样受体2（TLR2）在七氟醚抑制哮喘小鼠气道炎症中的作用。方法C57 BL／6小鼠肺组织标本为前期研究所获取，分为C57对照组、C57哮喘组、C57七氟醚干预组各8份。24只SPF级雌性TLR2基因缺失（TLR2^-/-）小鼠按随机数字表法分为TLR2^-/-对照组、TLR2^-/-哮喘组、TLR2^-/-七氟醚干预组各8只。卵清蛋白致敏和激发建立哮喘模型，七氟醚干预组采用3％七氟醚反复吸入干预。免疫印迹检测C57各组小鼠肺组织TLR2表达情况；TLR2^-/-小鼠：分类计数肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞，酶联免疫吸附（ELISA）法测定BALF中肿瘤坏死因子α（TNF-α）与白细胞介素10（IL-10）的表达；HE染色观察肺组织炎症情况。结果C57哮喘组肺组织TLR2相对表达量（0．547±0．042）显著高于C57对照组（0．312±0．023）（P=0．023）和C57七氟醚干预组（0．287±0．033）（P=0．020）；TLR2^-/-七氟醚干预组炎症细胞总数[（83．13±19．43）×10^3个／ml]、各种炎症细胞分类计数、TNF—α表达[（546±16）pg／m1]均显著低于TLR2^-/-哮喘组[（206．43±41．82）×10^3个／ml、（732±41）pg／m1]，但仍显著高于TLR2^-/-对照组[（44．64±7．17）×10^3个／ml、（380±24）pg／ml]（均P〈0．05）；TLR2^-/-七氟醚干预组肺组织炎症细胞浸润显著少于TLR2^-/-哮喘组。结论TLR2参与介导了七氟醚对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。
- 沈启英方磊吴惠梅武玲何芳刘荣玉
- 关键词：哮喘TOLL样受体2七氟醚炎症小鼠
- Toll样受体2介导的JNK信号分子在小鼠支气管哮喘发病中的作用机制被引量：6
- 2015年
- 目的探讨Toll样受体2(TLR2)介导的c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号分子参与小鼠支气管哮喘发病的作用机制。方法健康SPF级C57(TLR2野生型)鼠和TLR2基因缺失(TLR2-/-)鼠各14只,按随机数字表法分为4组:C57对照组、C57哮喘组、TLR2-/-对照组、TLR2-/-哮喘组,每组7只,哮喘组以卵清蛋白(OVA)腹腔注射联合雾化吸入致敏和激发建立哮喘模型,对照组以生理盐水代替OVA致敏和激发。利用免疫组织化学染色技术(ABC法)检测TLR2蛋白在C57对照组、C57哮喘组肺内的表达差异,JNK及磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表达在各组肺内的表达差异。结果 HE染色提示较其余3组,C57哮喘组有较明显的炎症细胞浸润及呼吸道平滑肌增生。以平均吸光度(m A)衡量各组织蛋白相对表达量,免疫组化结果提示TLR2蛋白在C57哮喘组表达显著高于C57对照组(P<0.01),JNK蛋白在各组的表达差异无统计学意义,P-JNK蛋白在C57哮喘组肺组织的表达量显著高于C57对照组、TLR2-/-哮喘组、TLR2-/-对照组(F=43.261,P<0.01)。结论 TLR2介导的JNK信号分子通路可能参与了支气管哮喘的发病过程。
- 沈佩婷方磊吴惠梅沈启英何芳刘荣玉
- 关键词：哮喘JNK免疫组化
- 降钙素原与C-反应蛋白对尘肺患者合并肺部感染的诊断价值被引量：22
- 2019年
- 目的探讨降钙素原(PCT)与C-反应蛋白(CRP)对尘肺患者合并肺部感染的诊断价值。方法回顾性分析2015年10月-2017年10月于医院进行治疗的尘肺患者50例及同期于医院进行体检的健康者30名的资料,根据疾病情况与痰细菌培养结果分为健康者为A组30名,尘肺患者未合并肺部感染的B组27例,尘肺患者合并肺部感染的C组共23例,对患者的血清PCT,血清CRP浓度,第一秒用力呼气容积(FEV1)与第一秒用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)进行分析。结果三组研究对象的血清PCT与CRP浓度,肺功能指标数据差异均有统计学意义(P<0.05),三组患者的血清PCT与CRP浓度与肺功能指标进行Fisher判别函数计算,交叉验证判别正确率为100.00%,利用血清PCT与CRP浓度对于B组与C组患者的诊断价值进行计算,结果显示,PCT的诊断灵敏度为82.96%,特异度为91.48%,曲线下面积为0.932,CRP的诊断灵敏度为91.30%,特异度为85.19%,曲线下面积为0.921。结论部分尘肺患者合并肺部感染炎症反应程度加大,肺功能指标降低,利用PCT与CRP对尘肺患者是否合并肺部感染具有较高的诊断价值,但需进行更加深入地探讨。
- 夏志庭刘荣玉朱文成吴世明杨兴权
- 关键词：降钙素原C-反应蛋白尘肺肺部感染
