国家自然科学基金(30873447)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
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- 角膜上皮细胞培养模型及其在眼部药物研究中的应用进展被引量：5
- 2010年
- 眼部药物吸收主要是通过角膜途径进行,而且角膜上皮为眼部用药的主要吸收屏障。由于动物实验存在较多缺陷,且随着细胞培养技术的不断发展,可以采用细胞培养技术建立角膜上皮细胞培养模型,模拟眼部屏障功能。本文综述了已建立的角膜上皮细胞培养模型,主要包括原代角膜上皮细胞培养模型和永生化角膜上皮细胞培养模型,并对角膜上皮细胞培养模型在眼用药物研究方面的进展进行介绍,包括角膜毒性研究、药物角膜渗透性研究及眼用药物吸收机制研究等。
- 姚晨孙考祥梁娜
- 关键词：角膜上皮细胞原代培养
- 微渗析技术研究葛根素滴眼液麻醉家兔眼内药动学被引量：11
- 2011年
- 目的:建立微渗析实验模型,并对葛根素在麻醉家兔眼内的药物动力学进行研究。方法:通过手术将微渗析探针植入麻醉家兔的眼前房室内,待灌流平衡之后眼部给予1%葛根素滴眼液100μL,于不同时间收集渗析液,HPLC测定;流动相为甲醇-0.1%柠檬酸水溶液(30∶70),流速1.0 mL.min-1,检测波长249 nm。结果:给予自制葛根素滴眼液后,其能够迅速吸收进入眼前房室中,在1 h达到峰浓度,Cmax为(2.52±0.31)mg.L-1,然后渐渐降低,但在消除阶段3.5 h左右出现另外1个较低的峰浓度。可能是由于葛根素抑制了房水的生成,导致药物浓度的升高。药-时曲线下面积(AUC0～t)为(5.04±0.21)mg.h.L-1,半衰期(t1/2)为(0.38±0.13)h。结论:采用微渗析技术,能够用于测定葛根素眼部的药物动力学,并且为葛根素滴眼液的临床应用提供有参考价值的药动学参数。
- 姚晨周绣棣曲涛位冬昱慕宏杰梁荣才王爱萍孙考祥
- 关键词：葛根素药动学滴眼液
- 聚乙二醇修饰聚酰胺-胺的合成、表征及其人角膜上皮细胞毒性被引量：1
- 2012年
- 目的:研究不同相对分子质量聚乙二醇(PEG)修饰不同代数树枝状大分子聚酰胺-胺(PAM-AM)得到的产物,测定其对人体角膜上皮细胞(HCECs)的毒性。方法:采用硝基苯氯甲酸酯(p-NPC)将单甲氧基聚乙二醇(mPEG,相对分子质量为750,2 000,5 000)活化成PEG碳酸酯,对第4,5代PAMAM大分子进行修饰;目标产物用FT-IR、1H-NMR进行结构表征;采用WST-8法考察PEG修饰对PAMAM的人角膜上皮细胞(HCECs)毒性的影响。结果:PAMAM经较低浓度PEG修饰后,对HCECs的毒性减弱不明显,经较高浓度PEG修饰后,对HCECs减毒明显减弱,不同相对分子质量的PEG修饰对PAMAM的减毒作用无明显差异。结论:经PEG修饰后,可以降低PAMAM对HCECs的毒性,作为新型眼部给药载体具有良好的前景。
- 周绣棣曲涛慕宏杰魏俊花陈大全梁荣才王爱萍孙考祥
- 关键词：聚乙二醇聚酰胺-胺角膜上皮细胞毒性
- 树枝状聚合物PAMAM葛根素复合物的制备及肠吸收研究被引量：1
- 2011年
- 制备树枝状聚合物G3,G4,G5 PAMAM葛根素复合物,研究其在大鼠不同肠段的吸收情况.采用大鼠离体外翻肠囊法、高效液相色谱法测定葛根素大鼠小肠吸收参数,以未加PAMAM组作为空白对照组,计算累积透过量及表观通透系数(Papp).葛根素在空肠及回肠段吸收明显,表观通透系数分别为(2.98±0.22)×10-6(、3.94±0.30)×10-6 cm.s-1,PAMAM与葛根素形成复合物能增加葛根素大鼠小肠累积透过量及表观通透系数.其中G5 PAMAM对葛根素促进作用最为显著,葛根素空肠、回肠段表观通透系数分别增加了2.78、2.22倍(P<0.05).PAMAM能有效促进葛根素大鼠小肠吸收.
- 姚文军孙考祥慕宏杰徐君玲董洪晓
- 关键词：葛根素复合物小肠吸收
- 基于药物转运研究的角膜上皮细胞培养模型的建立及评价
- 2009年
- 目的建立用于药物转运研究的角膜上皮细胞系培养模型并评价该细胞模型的致密性及细胞间紧密连接。方法采用人永生化角膜上皮细胞系进行培养,培养液为DMEM/F-12,培养板为孔径0.4μm的Transwell-clear。隔日测定细胞的跨膜电阻值评价细胞的完整性。测定亲水性标记物6-羧基荧光素和亲脂性标记物罗丹明B的渗透性评价上皮细胞间的紧密连接和角膜上皮细胞的致密性。结果跨膜电阻值随培养时间的延长而增加,15d达到最大值,约为180Ω.cm2,此时角膜上皮细胞长成致密的复层结构。渗透性实验表明,亲水性6-羧基荧光素和亲脂性罗丹明B在人永生化角膜上皮细胞系培养模型的细胞渗透系数分别为(1.12±0.40)×10-6cm·s-1和(18.30±3.05)×10-6cm·s-1,渗透性比值为16;在离体兔角膜模型测得的表观渗透系数分别为(1.07±0.50)×10-6cm·s-1和(25.40±7.03)×10-6cm·s-1,渗透性比值为24。结论人永生化角膜上皮细胞系培养模型具备角膜细胞的完整性、致密性以及细胞间紧密连接。可用于药物角膜转运特性的评价。
- 梁娜孙考祥刘昆姚晨刘毅姚文军
- 关键词：角膜上皮细胞细胞培养药物转运
- 聚酰胺-胺结构修饰及在药物传递研究中的应用进展
- 2012年
- 目的综述聚酰胺-胺[poly(amidoamine),PAMAM]修饰方法及其在药物研究中的应用进展。方法根据近年来国内外文献资料,对不同官能团结构修饰PAMAM结构的研究进行归纳、分析和总结,并对其修饰后在药物、基因传递研究中的应用进行探讨。结果与结论采用不同官能团或功能材料对PAMAM的结构进行修饰后,可一定程度的改善PAMAM的生物膜转运特性、降低其毒性、增加其靶向性等,经过不同结构修饰后的PAMAM,作为药物或基因传递系统载体具有很好的应用前景。
- 姚晨周绣棣孙考祥
- 关键词：聚酰胺-胺结构修饰
- PAMAM包覆脂质体的制备、表征及作为眼部递药载体的评价被引量：8
- 2010年
- 制备了树枝状聚合物聚酰胺-胺2代和3代(PAMAM G2,PAMAM G3)包覆的葛根素(Puerarin,PUE)脂质体,考察了脂质体包覆前后的粒径、Zeta电位的变化及包覆率和体外释放特性.用异硫氰酸荧光素(FITC)标记PAMAM,采用透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜分别观察了PAMAM包覆脂质体和FITC-PAM-AM包覆脂质体的形态.采用改进的Valia-Chien扩散池及兔离体角膜评价了脂质体包覆前后角膜的药物渗透特性,分别考察了脂质体包覆前后的角膜前滞留时间、角膜残留药量和角膜水化值.研究结果表明,包覆后的脂质体粒径略有增加,但没有显著差异,Zeta电位由负变正,并且随PAMAM比例的增加而增加.透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,PAMAM能较好地包覆于脂质体表面.PAMAM G2的包覆率明显比PAMAM G3高.包覆前后的脂质体释药特性相似,均具有明显的缓释作用.PAMAM包覆PUE脂质体后,与PUE水溶液和未包覆PUE脂质体相比,其PUE离体兔角膜表观渗透系数、角膜前滞留时间及角膜残留药量均明显增加,并具有显著差异,其中PAMAM G3包覆脂质体优于PAMAM G2包覆脂质体.水化值检测结果表明,PAMAM包覆PUE脂质体对角膜的刺激性不明显.
- 刘毅孙考祥姚文军梁娜慕宏杰梁荣才姚晨
- 关键词：树枝状聚合物聚酰胺-胺葛根素
- 聚酰胺-胺对永生化的人角膜上皮细胞的毒性被引量：1
- 2011年
- 目的考察一种新型药物载体——聚酰胺-胺[poly(amidoamine),PAMAM]对体外培养的角膜上皮细胞的毒性作用,为其在眼部药物载体的应用提供理论依据。方法建立应用于PAMAM毒性研究的角膜上皮细胞模型,通过细胞毒性分析测定不同浓度(10g·L-1、1g·L-1、0.1g·L-1、0.01g·L-1、0.001g·L-1)、不同代数(G3.0、G3.5、G4.0、G4.5、G5.0)的PAM-AM在共同孵育5min、15min、60min对角膜上皮细胞存活率的影响并计算其IC50值。结果整代PAMAM(G3.0、G4.0、G5.0)和半代PAMAM(G3.5、G4.5)均随着代数的增大,细胞毒性增加,且在一定浓度范围内细胞毒性随着药物浓度增大、药物接触的时间延长而增加。半代PAMAM细胞毒性均低于整代。G3.0、G3.5、G4.5PAMAM在1g·L-1及以下浓度毒性反应均为合格,G4PAMAM在0.1g·L-1浓度及以下毒性评级大部分为合格,而G5PAMAM只在0.01g·L-1和0.001g·L-1下部分毒性评级合格。结论低代或半代PAMAM可能更适合作为眼部药物给药的载体,也可考虑通过结构修饰等手段降低高代PAMAM毒性。
- 曲涛梁娜周绣棣慕宏杰魏俊花孙考祥
- 关键词：角膜上皮细胞聚酰胺-胺细胞毒性PAMAM
- 树枝状聚合物聚酰胺-胺对葛根素在角膜上皮细胞摄取及渗透的影响
- 目的考察树枝状聚合物聚酰胺-胺（PAMAM）对葛根素在角膜上皮（HCE）细胞毒性、摄取及渗透的影响,并对G4PAMAM的摄取机制进行研究。方法采用WST-8法,考察了PAMAM短期细胞毒性、延迟细胞毒性以及与葛根素混合物...
- 曲涛周绣棣慕宏杰魏俊花孙考祥
- 关键词：聚酰胺-胺角膜上皮细胞葛根素
- 文献传递
- 树枝状聚合物PAMAM包覆葛根素脂质体角膜渗透性研究被引量：4
- 2010年
- 目的:研究树枝状聚合物PAMAM包覆葛根素(puerarin,PUE)脂质体的角膜渗透特性。方法:制备PAMAM G2和PAMAM G3包覆的葛根素脂质体,以葛根素水溶液和未包覆葛根素脂质体为对照,进行兔离体角膜渗透试验,同时考察包覆脂质体中,不同的摩尔投料比(PAMAM磷/脂=0.1%,0.5%,1.0%,2.0%),PAMAM对角膜渗透性的影响,计算渗透参数。结果:PAMAM磷/脂摩尔比为1.0%(PAMAM G2)和0.5%(PAMAM G3)的包覆脂质体的Papp(表观渗透系数),Jss(稳态流量)均明显高于葛根素水溶液和未包覆脂质体(P<0.01),且PAMAM磷/脂摩尔比为1.0%(PAMAM G2)和0.5%(PAMAMG3)包覆脂质体的促角膜渗透性高于其他比例包覆的脂质体(P<0.01)。结论:PAMAM包覆葛根素脂质体可以显著改善葛根素在兔眼部的角膜渗透性,作为眼用载体有希望增加药物的眼部吸收和生物利用度。
- 刘毅孙考祥姚文军梁娜慕宏杰梁荣才姚晨
- 关键词：PAMAM树枝状聚合物葛根素
