“十五”国家科技攻关计划(2001BA70BB)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：马立新陆云华张新严红陈俊更多>>
- 相关机构：湖北大学宜春学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 番茄叶片再生系统建立的研究被引量：8
- 2005年
- 比较了不同基本培养基、不同激素及其不同浓度组合对4个番茄栽培品种叶片诱导愈伤组织、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+6-BA 3.0mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30 mg/L(pH=5.8)对愈伤组织诱导及诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA 0.1mg/L+蔗糖20mg/L培养基对生根最好。
- 陆云华张新马立新
- 关键词：番茄幼叶培养基优化
- 水稻质体多顺反子表达载体的构建及其对烟草质体的转化被引量：5
- 2006年
- 目的尝试水稻质体多顺反子定点整合表达载体转化到烟草质体中表达。方法根据已发表的相关序列,分别设计引物,通过PCR技术克隆了一系列构建水稻质体多顺反子定点整合表达载体所需的元件:质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体psbA基因3′端终止子(psbA3′)、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因(aadA)、水稻质体基因组高频同源重组片段(psbC/trnG,大小3362bp),命名为crDNA、甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)。构建了水稻质体多顺反子定点整合表达载体pLM21(-psbC-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′-trnG-)。将该载体用基因枪轰击烟草叶片5枪,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选。结果获得质体转基因烟草4株。用PCR、激光扫描和Westernblot等方法检测都证实man、gfp、aadA三个基因且均得到表达,用RFLP证实表达盒整合到烟草质体基因组中。结论水稻质体多顺反子定点整合表达载体已整合到烟草质体基因组中,并得到表达。
- 陆云华马立新严红
- 关键词：水稻多顺反子基因枪转化
- 烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建和转化被引量：3
- 2005年
- 构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM4(-psaA-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3'-psbC-)。用基因枪将该载体轰击烟草叶片5次,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草6株。用PCR、激光扫描、Westernblot和RFLP等方法检测都证实多顺反子表达盒中的3个基因甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)、氨基糖苷3'-腺苷酰基转移酶基因(aadA)已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。
- 陆云华马立新陈俊蒋思婧
- 关键词：多顺反子烟草叶绿体基因枪法
- 水稻多顺反子质体表达载体的构建被引量：1
- 2005年
- 根据发表的水稻叶绿体基因组序列,对比烟草高频同源重组目标区(NCBI编号:X1 5 90 1 )设计引物,用PCR的方法克隆到一段3 . 939kb叶绿体DNA片段,命名为crDNA 以其作为外源基因定点整合的同源重组片段,以来自烟草叶绿体的强启动子Prrn、甘露聚糖酶man、绿荧光蛋白gfp、氨基糖苷3’-腺苷酰基转移酶基因aadA和终止子psbA3’,构建水稻质体多顺反子表达载体pLM3(-psbC$CPrrn -SD -man -SD -gfp -SD -aadA -psbA3’-trnm - ) 并在大肠杆菌中通过平板定性对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定,结果表明:在大肠杆菌中,多顺反子盒式表达结构中的三个基因(man ,gfp ,aadA)
- 陆云华马立新
- 关键词：多顺反子水稻
- 安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建
- 2005年
- 根据已发表的序列,通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件:质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体psbA基因3’端(psbA3’)、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、烟草叶绿体高频同源重组片段(psaA/psbC,大小3463bp)、甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)。构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM7(-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-psbA3’-psbC-)。并在大肠杆菌中通过平板定性分析等方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定。
- 陆云华张新马立新
- 关键词：多顺反子叶绿体
