重庆市自然科学基金(8564)
- 作品数:5 被引量:30H指数:4
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- 海藻糖及真菌海藻糖酶的研究现状与展望被引量:5
- 2009年
- 海藻糖是一种非还原性二糖,广泛存在于各种生物体内的抗逆境剂,具有增强生物体对高温、脱水、干旱、冷冻、高渗透性、重金属及有毒试剂等逆境的抵抗能力。海藻糖酶是海藻糖水解酶,它将海藻糖水解成2分子葡萄糖。对海藻糖的生物学特性、功能、作用机制以及海藻糖对生物分子的保护作用和海藻糖在食品工业及农作物育种上的应用进行了概述,介绍了真菌中的海藻糖酶的研究现状。
- 冷亚君
- 关键词:海藻糖抗逆性代谢途径
- 绿僵菌NTL基因上游调控序列的克隆及分析被引量:3
- 2006年
- 实验室已经克隆了金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因(NTL)的编码序列(GenBank登录号:AY557612),为了解该基因的上游调控信息,采用Panhandle Polymerase Chain Reaction Amplification方法获得了长为982bp的中性海藻糖酶基因上游序列。序列分析表明,该序列含有5个CAAT启动子元件和一个压力反应元件(CCCCT).经PCR和Southern杂交验证表明,利用panhandle PCR法成功地获得了金龟子绿僵菌CQMa102中性海藻糖酶基因上游序列,并且该基因在金龟子绿僵菌基因组中以单拷贝形式存在.
- 胡宗利陈国平王中康彭国雄殷幼平蔡绍皙夏玉先
- 关键词:PANHANDLEPCR金龟子绿僵菌
- 丝状真菌基因功能研究的方法被引量:11
- 2007年
- 近年来不少丝状真菌全基因组测序已完成或正在进行,基因功能研究成为真菌研究的一个热点.多种基因功能研究方法都已应用到丝状真菌领域,为丝状真菌的基因功能研究提供了许多不同的技术策略.本文总结了目前丝状真菌基因功能研究中常用的方法,如转座子标签法、基因敲除技术、RNA干扰、超表达及酵母杂交系统等,并对各方法在丝状真菌研究中的优缺点进行了阐述.
- 曹月青何正波王中康殷幼平彭国雄夏玉先
- 关键词:丝状真菌基因功能RNA干扰同源重组基因沉默
- 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因的克隆及其表达特性分析被引量:4
- 2005年
- 根据中性海藻糖酶NTL基因的同源序列设计引物,PCR扩增出杀蝗专一菌株———金龟子绿僵菌CQMa102NTL基因片段,利用5′_RACE和3′_RACE扩增出NTLcDNA的5′和3′端序列,经拼接得到CQMa102NTL基因cDNA全长。根据其全长cDNA序列,设计引物PCR扩增出CQMa102NTL的完整基因。为了解该基因的上游调控信息,采用PanhandlePolymeraseChainReactionAmplification方法扩增其上游序列。序列分析表明,CQMa102NTL全长DNA3484bp,cDNA全长2385bp,编码737个氨基酸的蛋白,推测蛋白分子量为83.1kD;含有3个内含子,包含一个依赖于cAMP的磷酸化作用位点(RRGS)和一个钙附着位点(DTDGNMQITIED);上游序列含有一个压力反应元件(CCCCT);与金龟子绿僵菌广谱性菌株ME1NTL的核苷酸序列和氨基酸序列分别具有93%和99%同源性,由此确定该序列为金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因序列。Southern杂交表明,NTL基因在CQMa102基因组中为单拷贝。Northern杂交表明,NTL基因转录出约2.5kb的mRNA单带,在液体培养条件下,对数生长前期表达水平最高,对数生长后期降到最低,进入稳定生长期后表达水平又有所提高。金龟子绿僵菌CQMa102中性海藻糖酶基因DNA全长和cDNA全长登录GenBank,登录号分别为:AY557613,AY557612。
- 胡宗利王中康彭国雄殷幼平夏玉先蔡绍皙
- 关键词:金龟子绿僵菌蝗虫昆虫病原真菌