山西省青年科技研究基金(20051045)
- 作品数：15 被引量：49H指数：4
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- 相关机构：山西医科大学山西农业大学潍坊医学院更多>>
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- RH株弓形虫速殖子体外入侵大鼠肠上皮细胞与增殖的动态观察被引量：2
- 2009年
- 目的动态观察弓形虫RH株速殖子(简称速殖子)体外入侵大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)及其增殖过程。方法取24孔培养板,设实验组及对照组各3孔,每孔放置经预处理的盖玻片。将常规传代培养的IEC-6细胞接种于各培养孔,于37℃5%CO2培养箱培养24h,吸弃培养液,实验组每孔加入1ml速殖子悬液(含1×106个速殖子),对照组每孔加入1ml无抗生素培养液,共培养。用倒置显微镜连续观察速殖子粘附、入侵IEC-6细胞及其增殖过程,并分别于共培养5～30min、1～48h后取出盖玻片,经吉氏-瑞氏染色后光镜观察其入侵和增殖情况,计算入侵率。结果共培养5min,速殖子即可入侵IEC-6细胞,随着共培养时间的延长入侵的速殖子逐渐增多,1h为1～5个,入侵率为(55.0±6.6)%。2h入侵率高达(81.8±10.2)%,有假包囊形成,速殖子可入侵细胞核并在核内增殖。4h入侵率降为(80.8±9.2)%,假包囊破裂释出成簇排列的速殖子。6h入侵率为(75.1±8.2)%,成簇排列的速殖子显著增多。12h成簇排列的速殖子减少,多数速殖子游离细胞外,完整的IEC-6细胞明显减少。24h只见部分IEC-6细胞和假包囊存在,有大量游离的速殖子。48h见大量游离速殖子,未见贴壁细胞。结论体外培养的弓形虫速殖子可迅速入侵IEC-6细胞,并可在细胞质及细胞核内增殖。增殖周期为6～12h。
- 孟晓丽殷国荣刘红丽王海龙
- 关键词：刚地弓形虫大鼠肠上皮细胞入侵增殖
- 弓形虫速殖子体外对IEC-6细胞侵入与增殖的动态观察
- 目的动态观察RH株弓形虫速殖子体外侵入IEC-6细胞及细胞内增殖过程。方法弓形虫速殖子与IEC-6细胞于24孔培养板内盖玻片上共培养,倒置显微镜动态观察速殖子对IEC-6细胞的粘附、侵入和增殖过程,并分别于共培养5min...
- 孟晓丽殷国荣刘红丽王海龙赵晓琴
- 关键词：刚地弓形虫IEC-6细胞增殖
- 文献传递
- 弓形虫STAg联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫小鼠诱导不同黏膜部位抗体水平动态观察
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和IFN-γ佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后不同黏膜部位抗体水平及其持续时间,为黏膜疫苗研制提供实验依据。方法 BALB/c小...
- 刘红丽孟晓丽弓鸿飞殷国荣
- 关键词：弓形虫STAG滴鼻免疫黏膜抗体
- 文献传递
- 弓形虫可溶性速殖子抗原联合IFN-γ佐剂滴鼻免疫小鼠诱导免疫应答动态观察
- 目的动态观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和IFN-γ佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠诱导的免疫效应及其持续时间,为研制弓形虫黏膜疫苗提供实验基础。方法 BALB/c...
- 弓鸿飞刘红丽孟晓丽刘转转殷国荣
- 关键词：弓形虫STAG滴鼻免疫
- 文献传递
- 不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果。方法将5～6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20μg可溶性速殖子抗原(STAg)、20μgSTAg+40μg蜂胶、20μgSTAg+1000UIFN-γ或20μgSTAg+40μg蜂胶+1000UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔14d。末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子。结果STAg+IFN-γ组、STAg+蜂胶+IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组(P<0.05);组织内速殖子虫荷显著降低(P<0.01),STAg+IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57.00%和79.06%;STAg+蜂胶+IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68.30%和79.06%。STAg+蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义。结论在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少。
- 刘成芳殷国荣赵云鹤张卫国刘红丽
- 关键词：刚地弓形虫可溶性速殖子抗原鼻内免疫
- 弓形虫可溶性速殖子抗原联合IFNγ滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答被引量：3
- 2009年
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)联合IFNγ滴鼻免疫BALB/c小鼠诱导的免疫应答,为研制弓形虫黏膜疫苗提供实验依据。方法将BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以STAg(20μg/只)+IFNγ(1 000 U/只)滴鼻,对照组以PBS滴鼻。免疫2次,间隔2周。分别于初次免疫后0、2、4、6、8、10、12周处死小鼠,分离脾淋巴细胞、肠上皮内淋巴细胞(IELs)并计数;分离血清,用ELISA法测定IgA和IgG含量。结果免疫后实验组小鼠IELs和脾淋巴细胞均有增生,IELs和脾淋巴细胞数量均于初次免疫后4周达峰值,IEL数量4、6周显著高于对照组;脾淋巴细胞数量2、4周显著高于对照组。实验组小鼠血清IgG和IgA水平均于初次免疫后4周达峰值,IgG水平2、4周显著高于对照组,至12周时仍高于对照组;IgA水平4、6周显著高于对照组。结论STAg联合IFNγ滴鼻免疫BALB/c小鼠,可有效诱导黏膜及系统免疫应答,且可持续较长时间。
- 弓鸿飞刘红丽孟晓丽刘转转殷国荣
- 关键词：弓形虫可溶性速殖子抗原干扰素Γ滴鼻免疫
- 弓形虫排泄-分泌抗原和可溶性速殖子抗原免疫原性的观察被引量：2
- 2009年
- 目的观察弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为4组,分别用PBS 20μl/只、体外排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigenin vitro,ESAv)、腹腔排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen in mice,ESAm)和STAg各20μg/只鼻内免疫2次,间隔14 d。分别于末次免疫后14 d和44 d每组处死8只小鼠,计数肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,iIEL)和脾淋巴细胞,ELISA法检测血清IgG和小肠冲洗液sIgA抗体水平。结果实验期间,ESAm组小鼠于二次免疫后状态欠佳,其他各组小鼠健康状况良好。末次免疫后14 d,各抗原组脾淋巴细胞及iIEL均增殖活跃,细胞数与PBS组比较,差异具统计学意义(P<0.05或P<0.01);至免疫后44 d,两种ESA组脾淋巴细胞及iIEL数与PBS组比较差异具统计学意义(P<0.05)。各抗原组血清IgG水平在免疫后14 d和44 d均明显增高,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫后14 d肠液sIgA水平ESAv、ES-Am和STAg组与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),ESAm和STAg组与ESAv组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),两种ESA组在免疫后44 d与PBS组比较差异仍具统计学意义(P<0.05)。结论ESAv、ESAm和STAg鼻内免疫均可诱导粘膜及系统的细胞和体液免疫应答,有较强的免疫原性。但ESAm可能对机体有毒副作用,不适宜直接鼻内免疫。
- 刘娟娟吴静殷国荣孟晓丽刘红丽刘转转
- 关键词：刚地弓形虫排泄-分泌抗原可溶性速殖子抗原鼻内免疫免疫原性
- 弓形虫STAg不同接种途径免疫小鼠诱导的免疫应答被引量：13
- 2008年
- 目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原（STAg）经滴鼻、灌胃和皮下注射3种途径免疫小鼠诱导的免疫应答。方法5-6周龄BALB／c小鼠32只，随机分为4组，分别以20μgSTAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次，间隔2周，对照组不作处理。末次免疫后14d脱颈椎处死小鼠，分离脾淋巴细胞和肠上皮内淋巴细胞（IELs）并计数，ELISA法测定血清、肠冲洗液中的弓形虫特异性抗体。结果滴鼻组和皮下注射组的脾淋巴细胞数量高于灌胃组和对照组，灌胃组与对照组相近。滴鼻组的IELs数量高于皮下注射组、灌胃组和对照组，皮下注射组和灌胃组与对照组一致。皮下注射组的血清IgG水平高于滴鼻组、灌胃组和对照组，滴鼻组略高于灌胃组和对照组，但差异无显著意义。滴鼻组的小肠冲洗液sIgA水平高于皮下注射组、灌胃组和对照组，皮下注射注射组和灌胃组略高于对照组，差异无显著意义。结论20腭STAg滴鼻免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答优于灌胃和皮下注射；皮下注射免疫小鼠诱导的血清IgG抗体水平高于滴鼻和灌胃，但其未能诱导黏膜免疫应答。
- 刘延庆刘晋平殷国荣马晓明孟晓丽刘红丽
- 关键词：可溶性速殖子抗原刚地弓形虫免疫应答免疫途径
- 经口感染弓形虫在小鼠组织内的动态分布被引量：3
- 2008年
- 目的观察经口感染弓形虫速殖子在小鼠小肠组织、实质器官内的动态分布。方法BALB/c小鼠96只,随机分为8组,0 d组用0.5 ml PBS/只灌胃,其余组用RH株弓形虫速殖子1×104个灌胃感染,感染后2、4、6、8、10、12、14 d处死小鼠,每次处死12只,取十二指肠、空肠、回肠、肝脏、脾、肾、肺、心和脑做组织印片,吉-瑞氏染色,镜检。结果感染后2 d在十二指肠、空肠、回肠、肺和心,4 d在脾,6 d在肾和肝脏发现虫体,脑内未发现虫体。十二指肠、空肠、回肠组织内虫体数量呈上升趋势,第6天达高峰后稍有下降。肝内虫体数量呈上升趋势,第6天最多;脾内虫体数量在6 d达峰值后保持较高水平;实验期间肾、肺和心内虫体数量保持较低水平。结论弓形虫经口感染小鼠后2 d,小肠组织出现大量速殖子;同时肺和心内有少量速殖子;4 d在脾、6 d在肾和肝脏发现虫体;速殖子在上述组织内增殖,并形成假包囊,脑内未发现虫体。
- 申金雁杨莎莎殷国荣马广源孟晓丽刘红丽
- 关键词：弓形虫经口感染
- ESA与STAg联合滴鼻免疫小鼠诱导的特异性免疫应答被引量：3
- 2007年
- 目的观察弓形虫排泄分泌抗原(ESA)与可溶性速殖子抗原(STAg)联合或单独滴鼻免疫小鼠的免疫应答效果,筛选弓形虫黏膜疫苗候选抗原。方法将40只BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只。实验组分别用20μgSTAg、30μgESA及二抗原联合(15μgESA与10μgSTAg)滴鼻免疫2次,间隔14d,对照组用PBS以20μl/只滴鼻。于末次免疫后第14天,取血清,收集小肠冲洗液,检测特异性抗体,分离肠上皮内淋巴细胞(iIEL)和脾淋巴细胞并计数。结果整个实验期间,各组小鼠健康状况良好,体重逐渐增加。STAg组、ESA组及联合抗原组小鼠黏膜、血清中特异性抗体水平依次升高,脾淋巴细胞和iIEL增殖反应逐渐增强。联合抗原组和ESA组血清IgG抗体和小肠冲洗液sIgA升高尤为显著。同时,联合抗原组、ESA组脾淋巴细胞和iIEL增生显著高于对照组。结论ESA单独或联合STAg滴鼻免疫小鼠均能激发弓形虫特异性黏膜及系统免疫应答。两种抗原联合免疫的研究,将有助于制定更加完善的弓形虫疫苗研究策略。
- 刘红丽管志玉殷国荣马晓明韩惠瑛
- 关键词：排泄分泌抗原可溶性速殖子抗原鼻内免疫
