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国家自然科学基金(30270959): 作品数：38 被引量：141H指数：10; 相关作者：杨利国茆达干曹少先舒邓群吴志敏更多>>; 相关机构：南京农业大学华中农业大学江西农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

抑制素与乙肝表面抗原融合基因免疫对大鼠生殖能力的影响被引量：11: 2006年; 90只大鼠随机分为5组(n=18),分别肌肉注射10、50、100μg抑制素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒(pCIS)、50μg空载体(pcDNA3.1)和100μL生理盐水。20 d后加强免疫1次,对每组中的12只大鼠进行2次加强免疫。结果发现抑制素抗体P/N值随着免疫次数的增加而提高。100μg剂量组2次和3次免疫的成熟卵泡发育数分别比对照组多6.9和7.5个(P<0.05)。3次免疫后大鼠成熟卵泡发育数比2次免疫后显著提高(35.2±2.73 vs 31.0±0.92,P<0.05)。抑制素基因免疫组的胎盘数和窝产仔数高于对照组(P>0.05),抗体阳性鼠高于阴性鼠(P<0.05)。pCIS 3次免疫后抗体阳性鼠的抗体水平与成熟卵泡发育数的相关系数为0.45(P>0.05),与胎盘数的相关系数为0.77(P<0.05)。pCIS免疫大鼠动情期和产后血浆FSH水平高于对照组,抗体阳性鼠的血浆FSH水平高于阴性鼠,其中2次免疫后阳性组动情期FSH浓度极显著高于阴性组(P<0.01)。这些结果表明,抑制素基因免疫大鼠可促进大鼠的卵泡发育,提高血浆FSH水平,为抑制素基因免疫大动物提供了试验依据。; 茆达干杨利国何晓红张志杰张红琳; 关键词：抑制素基因免疫生殖

生长抑素主动和被动免疫及基因免疫研究进展被引量：3: 2006年; 生长抑素(somatostatin,SS)是下丘脑释放的14肽激素,在动物体内具有广泛的抑制作用,特别是对生长及免疫反应具有明显的影响,通过耗竭或免疫中和体内的SS水平相应提高生长激素(GH)等水平促进动物生长。文中简要介绍了生长抑素主动和被动免疫的研究进展及基因免疫的作用机理、特点及增强基因免疫的途径;阐述了生长抑素基因疫苗的研究和应用发展前景。; 薛春林茆达干曹少先孙大明杨利国; 关键词：生长抑素基因疫苗免疫

生长抑素基因疫苗pcS/SS构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：21: 2004年; 将 PCR扩增得到的 pc MV- S中的乙肝表面抗原 (HBs Ag) S基因亚克隆到 p UC18中 ,构建成 p U S质粒 ,再将化学合成的生长抑素 (somatostatin,SS)基因单链复性 ,融合到 S基因编码区的第 2 2 5个氨基酸位点之后 ,构建成 p US/SS质粒 ,然后将 S/ SS融合基因亚克隆到 pc DNA3.1(- )中 ,构建成 S/ SS融合表达质粒 pc S/ SS。采用脂质体包裹法将 pc S/ SS质粒转染 He L a细胞 ,用 SDS- PAGE和 EL ISA分析表明 ,S/ SS融合基因在转染后 72 h和 G4 18选择 2周后的细胞中均获得表达 ,融合蛋白具有 SS的反应原性。; 曹少先杨利国茆达干张文伟管峰; 关键词：乙肝表面抗原 DNA疫苗 HELA细胞

小鼠对pGM-CSF/SS生长抑素基因疫苗的免疫应答被引量：1: 2006年; 通过研究细胞因子GM-CSF与生长抑素pcS／2SS融合表达质粒pGM-CSF／SS诱导小鼠免疫应答的影响，探求生长抑索基因免疫新策略。将60只20日龄雄性昆明小白鼠均分为6组，分别用PBS（C0）、pGM-CSF质粒（C1）、pGM-CSF／SS质粒（T1、T2、T3）、pcS／2SS（T4）质粒口服免疫，T1～T4组的免疫剂量分别为2×10^6 cfu／mL、2×10^8cfu／mL、2×10^10cfu／mL、2×10^8cfu／mL，以上质粒均以减毒沙门氏菌为传导载体。结果显示：pGM-CSF／SS组的抗生长抑素抗体A，／AN值显著高于pcS／2S8组，阳性鼠体增重亦高于pcs／2S8组，抗体阳性率分别是71．4％和40．0％。另外，高剂量组的AP／AN值极显著高于低剂量组，显著高于中剂量组；中剂量组的AP／AN值显著高于低剂量组，高剂量组的抗体阳性率也明显高于中剂量组和低剂量组，分别为100％、71．4％和20．0％。可见，pGM-CSF／SS疫苗的免疫效果优于pcS／2SS疫苗，且pGM-CSF／SS疫苗呈剂量依赖关系。这些结果显示出细胞因子GM—CSF可以增强生长抑素DNA疫苗的免疫效果。; 梁爱心姚艳丰金定恩武睿韩丽付平刘耘杨利国; 关键词：GM-CSF 生长抑素减毒沙门氏菌基因疫苗小鼠

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与生长抑素融合表达质粒对断奶仔猪生长及相关激素的影响被引量：10: 2007年; 选择40头断奶的长大二元杂交仔猪,随机分为4组,每组10头,公母各半,其中Ⅰ组为对照组,Ⅱ-Ⅳ组分别口服以减毒沙门氏菌为载体的DNA疫苗pcS/2SS、pGM-CSF/SS和pGM-CSF＋pcS/2SS,分析这些DNA疫苗对断奶仔猪的生产性能和相关激素分泌的影响。结果显示,与Ⅱ组和Ⅳ组相比,Ⅲ组平均日增重分别提高了8.37%（P〉0.05）和17.2%（P〈0.05）,饲料利用率分别提高了14.8%和6.7%。Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组血浆中GH的含量有升高的趋势。Ⅱ组IGF-Ⅰ的含量一直处于较高的水平,Ⅲ和Ⅳ组在第2周后处于较低的分泌水平,Ⅲ组IGF-Ⅰ的峰值高于其他组。Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ组T3的含量呈下降的趋势,而Ⅲ组呈上升趋势,免疫后第8周,Ⅲ组的T3分泌水平显著高于Ⅱ和Ⅳ组（P〈0.05）,而与对照组差异不显著。Ⅰ组T4的含量不断降低,而Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组有不断升高的趋势,Ⅱ组和Ⅲ组T4的分泌一直保持在较高的水平。上述结果表明,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）对SS DNA疫苗有一定的免疫增强作用,pGM-CSF/SS的免疫效果要优于pGM-CSF＋pcS/2SS共免疫。; 舒邓群茆达干陈荣达吴志敏杨利国; 关键词：仔猪

抑制素基因免疫诱导单胎绵羊孪生的研究被引量：33: 2004年; 应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P <0 0 5 ) ,免疫羊的抗体阳性率可达 4 6 7%。免疫组与对照组促卵泡素 (folliclestimutatinghormone ,FSH)的含量在加强免疫第 4 5天时差异显著 (P <0 0 5 )。在首次免疫第 2 0天与加强免疫第 4 5天 ,抗体阳性羊的促卵泡素含量显著高于抗体阴性羊 (P <0 0 5 )。免疫羊的双羔率达 39 2 % ,显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,比对照组提高 2 9 2 %。; 张德坤杨利国张红琳王文乌娜尔汗纪平古武昌; 关键词：抑制素基因免疫双羔率

抑制素pCISI基因免疫对黄牛卵泡的影响被引量：2: 2006年; 为提高动物繁殖力,分别用不同纯度的抑制素真核融合表达质粒pCISI, 配以不同免疫佐剂后导入72头母黄牛体内。结果表明:①两次免疫后,产生抗抑制素抗体的黄牛占59．72％(43／72);②pCISI能促进双大卵泡发育(68．75％,44／64), 诱发排双卵(50.00％,32／64);③加入佐剂的疫苗较未加佐剂的疫苗免疫效果明显, 普鲁卡因佐剂显著优于脂质体(P<0．05);④纯度疫苗对牛的免疫效果略高于低纯度疫苗,但差异不明显(P>0．05)。; 崔先利杨利国; 关键词：基因免疫抗体佐剂

影响基因疫苗免疫效果的因素被引量：15: 2004年; 茆达干杨利国曹少先; 关键词：影响因素基因疫苗免疫效果抗体抗原

以减毒沙门氏菌为载体的GM-CSF与生长抑素DNA疫苗的安全性和稳定性被引量：2: 2007年; 将含GM-CSF基因与生长抑素（SS）的融合真核表达质粒pGM—CSF／SS转入减毒沙门氏菌株CS022。选择40只22～24g的雌性小鼠，随机分成4组，其中1组为对照组，口服生理盐水；2～4组为试验组，分别用上述重组减毒沙门氏菌株CS022以10^8、10^9、10^10CFU的剂量口服免疫小鼠，2周后以相同的剂量加强免疫，研究pGM-CSF／SS真核表达质粒在体内的稳定性和减毒沙门氏菌对小鼠的安全性。同时通过体外传代，研究该真核表达质粒在体外的稳定性。结果表明：10^8、10^9CFU剂量口服小鼠，成活率达100％，而10^10CFU剂量口服小鼠成活率降低至90％，腹泻率达50％。体外传10代和口服免疫4周后从小鼠肝脏和脾脏分离的减毒菌用琼脂糖凝胶电泳和酶切鉴定法证实，减毒菌中的重组质粒在体外和侵入小鼠体内过程中具有较好的稳定性。质粒DNA在传10代以后，虽然每代的质粒DNA含量有些变化，但总体趋势基本是恒定的，第10代时，质粒DNA的含量与第1代的含量差异不显著。上述结果提示，利用该减毒沙门菌作为载体传递pGM—CSF／SSDNA疫苗免疫小鼠具有相对安全性和稳定性，为进一步有效激发机体的免疫应答提供了前提。; 舒邓群陈荣达茆达干吴志敏杨利国; 关键词：减毒沙门氏菌 CSF 安全性稳定性

质粒pEGS/2SS转染对猪和牛卵巢颗粒细胞增殖和激素分泌的影响: 目的:以生长抑素真核表达质粒pEGS／2SS转染猪、黄牛不同类型卵巢颗粒细胞, 旨在探讨生长抑素融合表达产物对细胞增殖和激素分泌的作用。方法:采用脂质体转染方法, 以猪小卵巢颗粒细胞(SGCs)为代表摸索质粒pEGs/2...; 何晓红杨利国曹少先; 关键词：卵巢颗粒细胞; 文献传递

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