吉林省科技发展计划基金(20080566)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：金海国罗晓彤王晓阳刘铮刘晓辉更多>>
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- 培养液对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎早期体外发育的影响被引量：7
- 2011年
- [目的]提高卵母细胞体外成熟质量,优化猪早期胚胎体外培养体系。[方法]以改良TCM199,NCSU-23培养液为基础液,分别添加10%的猪卵泡液(PFF)和10%的优质胎牛血清(FBS)进行卵母细胞体外成熟培养,以成熟率、孤雌胚胎体外发育率等为指标,研究不同培养液对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响。[结果]猪卵母细胞在TCM199,TCM199+FBS和TCM199+PFF组成熟42 h的成熟率分别为(54.2±3.5)%、(68.5±3.2)%和(69.3±3.7)%,在NCSU-23,NCSU-23+FBS和NCSU-23+PFF组成熟42 h的成熟率分别为(51.6±3.3)%、(63.2±3.1)%和(65.5±3.5)%,添加10%的FBS和PFF在0.05水平上显著提高了卵母细胞成熟率;6组不同成熟培养液得到的成熟卵母细胞在孤雌激活后囊胚发育率差异不显著,但TCM199+PFF组的囊胚细胞数(36.5±4.8)在0.05水平上显著高于TCM199和NCSU-23组的囊胚细胞数(18.7±3.2和15.5±2.4)。[结论]改良TCM199,NCSV-23培养液中添加10%PFF和10%FBS可显著促进猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎早期体外发育。
- 刘晓辉曹阳郎洪彦金海国罗晓彤刘铮王晓阳
- 关键词：卵母细胞体外成熟体外发育
- 猪胎儿成纤维细胞的分离与基因转染被引量：1
- 2014年
- 为利用核移植法获取转基因克隆猪提供供体细胞,体外分离培养猪胎儿成纤维细胞并进行了绿色荧光蛋白基因转染。首先采用组织块贴壁法分离培养猪胎儿成纤维细胞,绿色荧光蛋白表达载体以脂质法介导转染猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,利用荧光显微镜检测荧光蛋白的表达。结果表明,组织块贴壁后9 d可获取原代成纤维细胞,基因转染后利用G418筛选9 d即可获得转基因细胞,对转基因细胞进行传代,PCR检测显示荧光蛋白基因整合到细胞基因组中,荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达,为下一步通过核移植方法获得转基因猪提供了基础。
- 于永生曹阳罗晓彤张立春金海国王晓阳
- 关键词：绿色荧光蛋白基因转染脂质体
- 猪卵母细胞体外成熟的研究进展被引量：2
- 2011年
- 综述了猪卵母细胞体外成熟的分子机理和影响因素,以期为后续工作奠定基础。
- 刘晓辉郎洪彦金海国罗晓彤刘铮王晓阳
- 关键词：卵母细胞体外成熟
