“十五”国家科技攻关计划(2003BA712A03-08)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 相关作者：杨玉萍李红张丽芳刘星更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗猪鼻支原体单克隆抗体的研制及双抗体夹心ELISA检测法的建立被引量：11
- 2008年
- 目的制备多种抗猪鼻支原体的单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA方法用于该病原体的检测。方法用猪鼻支原体CVCC361免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术和酶联免疫吸附实验筛选出抗该病原体的单克隆抗体;运用免疫双向扩散试验、Western blotting确定IgG亚类及针对抗原的相对分子质量;筛选出配对抗体,建立双抗体夹心ELISA的检测方法,并评价其灵敏度和特异性。结果共筛选出17株单克隆抗体,抗体亚类分别为IgG1、IgG2aI、gG2bI、gG3,免疫印迹结果表明单抗ZB1、ZB2及ZB16与相对分子质量为35×103的抗原有特异性结合,而ZB3和ZB10与相对分子质量为70×103的抗原有特异性结合。确定了2个配对抗体(ZB1-ZB1-HRP和ZB1-ZB2-HRP),可检出最小抗原量为30 ng/mL,检出猪鼻支原体活菌8.34×102CFU/mL,与人呼吸道常见的致病菌及支原体均无非特异性反应。结论筛选的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性,应用双抗体夹心ELISA方法可用于猪鼻支原体的检测。
- 刘星张丽芳杨玉萍李红
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 猪鼻支原体感染免疫胶体金快速检测卡的研制被引量：8
- 2007年
- 目的研制一种特异、敏感、快速的人猪鼻支原体(M.hyorhinis)感染的胶体金免疫层析法检测卡(GICAs)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗猪鼻支原体单克隆抗体(McAb),选择并优化层析条件,研制双抗体夹心模式的免疫胶体金检测卡,评价其灵敏度、特异性和稳定性。结果其灵敏度检测限可达到1.72×103CFU/mL,50ng/100μL支原体全菌蛋白,与其他细菌和支原体无非特异性反应,检测用时约10min,4℃可保存6个月以上。结论本文研制的GICAs检测猪鼻支原体特异性强、灵敏度高,无需特殊仪器设备,可用于感染的流行病学调查和临床诊断。
- 杨玉萍刘星张丽芳李红
- 关键词：单克隆抗体胶体金胶体金免疫层析法
