河南省基础与前沿技术研究计划项目(092300410183)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王珏刘宏建王义生黄宗强梁维更多>>
- 相关机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Sox9基因对兔腰椎间盘退变的作用被引量：4
- 2010年
- 目的 观察腺病毒介导的Sox9基因（AdSox9）对兔腰椎间盘退变模型的疗效.方法 25只新西兰大白兔用针刺法制作腰椎间盘退变模型,24周后,将AdSox9注射到退变椎间盘组织中,6周后用MRI观察椎间盘变化,免疫组织化学法观察椎间盘组织Ⅱ型胶原（Col2al）的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察Col2al mRNA的变化.结果 MRI示：治疗后L2～3、L3～4、L4～5的椎间盘信号值分别为：580.43±76.43、612.74±56.73、605.87±76.53,模型对照组为：238.43±43.65、217.65±38.95、236.98±76.53 Col2al表达的标记指数：治疗后L2～3、L3～4、L4～5的椎间盘分别为：42.48±5.53、45.34±15.43、42.47±25.45,模型对照组为：11.68±10.08、12.68±13.75、13.38±26.53 Col2al mRNA的表达：治疗后L2～3、L3～4、L4～5的椎间盘分别为6570.43±174.53、7653.75±158.93、6905.83±119.23,模型对照组为：1256.76±89.76、1217.65±18.65、1132.97±47.65.3种方法均示,治疗组与模型对照组之间比较差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 AdSox9对退变椎间盘动物模型有治疗作用.
- 王珏黄宗强王义生刘宏建
- 关键词：椎间盘SOX9基因基因治疗
- 性别决定区Y框蛋白9基因的AdMax系统重组腺病毒载体的构建及其表达
- 2014年
- 目的 利用AdMax包装系统构建性别决定区Y框蛋白9（SOX9）基因重组腺病毒载体并对其进行鉴定。方法 应用聚合酶链反应（PCR）对SOX9基因进行扩增,重组入线性化的pAV-MCMV-绿色荧光蛋白（GFP）-3FLAG,后转化入DH5a感受态细胞,得到的转化子用菌落PCR进行鉴定,鉴定无误后,通过AdMax腺病毒包装系统转染HEK293细胞,并在其中包装成熟、扩增。用Western blot法对SOX9基因重组腺病毒进行检测,并把获得的病毒DNA进行PCR鉴定和滴度测定。结果获得的病毒DNA进行PCR鉴定,得到1 565 bp的片段,大小与SOX9基因相一致,证实SOX9基因片段已经重组进入腺病毒。Western blot检测中,在72×10395×103间可见大小与SOX9-GFP-Flag的融合蛋白（86×103）相吻合的阳性条带,病毒滴度为2.3×1011PFU/ml,表明SOX9蛋白成功表达。结论 成功建立安全、稳定、有效的SOX9基因重组腺病毒载体。
- 王珏邱如标刘宏建王义生
- 关键词：椎间盘退变腺病毒
- 腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2对兔退变椎间盘组织Sox9基因的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2（AdvBMP-2）转染到兔椎间盘髓核细胞后，对椎间盘细胞中Sox9基因的影响。方法纯种成年新西兰大白兔35只，采用纤维环损伤法制作腰椎间盘退变模型，24周后行2次手术，其中25只对腰椎问盘髓核组织注射AdvBMP-2，每只注射2个椎间盘作为实验组，注射量为每个腰椎间盘20μl（100×10^5pfu）；同时每只取2个未做注射的腰椎间盘作为自身空白对照组。其余10只兔每只注射2个腰椎间盘各20μl磷酸盐缓冲液（PBS）作为实验对照组，全组共120个椎间盘。2次术后1～12周的不同时间段分别取出各组椎间盘组织，采用精确定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定椎间盘组织中Sox9mRNA的含量。结果2次术后1周，实验组与自身空白对照组Sox9mRNA含量值经配对t检验，差异有统计学意义（t=3．828，P〈0．05）。2次术后2周，3组结果经方差分析，差异有统计学意义（F=16．971，P〈0．01）；各组间再行两两q检验，实验组与自身空白对照组问，差异有统计学意义（q=6．985，P〈0．01）；实验组与实验对照组间，差异有统计学意义（q=7．094，P〈0．01）；实验对照组与自身空白对照组间，差异无统计学意义（q=0．647，P〉0．05）。实验组与自身空白对照组间配对t检验，差异有统计学意义（t=4．976，P〈0．01）。2次术后4周，实验组与自身空白对照组经配对t检验，差异有统计学意义（t=7．952，P〈0．01）。2次术后8周，实验组与自身空白对照组经配对t检验，差异有统计学意义（t=6．986，P〈0．01）。2次术后12周，3组结果经方差分析，差异有统计学意义（F=9．97，P〈0．05）。各组问行两两q检验，实验组与自身空白对照组间，差异有统计学意义（q=6．010，P〈0．01）；实验组与实验对照组间，差异有统计学意义（q=6．214，P〈0．01）；自身空�
- 王珏王义生刘宏建梁维
- 关键词：骨形态发生蛋白SOX9基因腺病毒椎间盘退变
