国家自然科学基金(81100100) 作品数:8 被引量:18 H指数:3 相关作者: 朱敦皖 刘兰霞 王海 董霞 冷希岗 更多>> 相关机构: 中国医学科学院北京协和医学院 清华大学 滨州市人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市自然科学基金 协和青年科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 生物学 更多>>
人脐带内皮祖细胞的分离、鉴定及转染EGFP质粒的实验研究 2012年 目的从脐带中分离内皮祖细胞(EPCs),考察其体外增殖、基因转染绿色荧光蛋白质粒的行为。方法以酶消化法从脐带中分离出内皮祖细胞,并通过流式细胞仪和共聚焦显微镜对内皮祖细胞进行鉴定,以Lipofectamine2000为转染试剂考察了内皮祖细胞转染绿色荧光蛋白质粒的行为。结果从脐带中分离培养的内皮祖细胞在第9天形成了典型的内皮细胞集落,流式细胞仪分析结果显示CD133和激酶插入区受体(KDR)的含量均有所提高,并具有内皮祖细胞结合异硫氰酸荧光素(FITC)标记的荆豆凝聚素1(FITC—UEA-1)和吞噬DiI标记的低密度脂蛋白(DiI—ac—LDL)的功能,能较好地表达绿色荧光蛋白。结论从脐带中分离的内皮祖细胞体外在适当的培养条件下,可增殖、诱导分化为内皮细胞,并能较好地表达外源基因,是基因与细胞治疗理想的载体。 朱敦皖 宋丽萍 刘兰霞 董霞 张海玲 王海 冷希岗关键词:内皮祖细胞 脐带 基因转染 载紫杉醇星型M-PLA-TPGS纳米颗粒的合成及其用于前列腺癌治疗药物载体的研究 被引量:8 2014年 合成了一种甘露醇引发的星型共聚物甘露醇-聚乳酸-聚乙三醇1000维生素E琥珀酸酯(M-PLATPGS).利用纳米沉淀法制备载紫杉醇M-PLA-TPGS纳米颗粒.纳米颗粒近似球形,粒径分布较窄.对载药纳米颗粒进行粒径、表面电荷、载药量、包封率和体外药物释放的表征,结果表明,体外药物释放呈双相释放模型,M-PLA-TPGS纳米颗粒在前列腺癌PC-3细胞中的摄取水平要高于PLGA和PLA-TPGS纳米颗粒.载紫杉醇M-PLA-TPGS纳米颗粒对于前列腺癌细胞的的毒性显著高于载紫杉醇PLA-TPGS纳米颗粒和商业制剂Taxol,证明星型M-PLA-TPGS聚合物作为纳米药物载体优于线性PLGA和PLA-TPGS聚合物. 王海 张超 张琳华 刘兰霞 郑义 朱敦皖关键词:紫杉醇 药物递送 前列腺癌 RGD多肽化学修饰聚苯乙烯培养板的细胞相容性研究 2012年 目的考察RGD多肽化学修饰聚苯乙烯培养板细胞相容性研究。方法采用高锰酸钾硫酸溶液对聚苯乙烯表面进行氧化反应,生成羧基位点;水溶性碳二亚胺活化羧基,接枝明胶、胶原和RGD多肽。用红外光谱、X-射线光电子能谱(XPS)、动态接触角等研究了RGD化学修饰聚苯乙烯的变化,并考察了RGD化学修饰聚苯乙烯后细胞相容性的变化。结果XPS结果证实了聚苯乙烯表面N原子的引入,RGD是共价键合在聚苯乙烯表面的。动态接触角下降显著,证明修饰表面的亲水性能提高。在修饰后的聚苯乙烯培养板种植人表皮细胞,结果显示提高了细胞的黏附和增殖能力。结论聚苯乙烯表面进行RGD化学修饰,有利于提高细胞在其表面的黏附和增殖能力,有望为免疫磁珠分离得到的高纯度内皮祖细胞提供良好的培养介质。 王海 梁士民 刘兰霞 庞丽云 张超 葛泉波 朱敦皖关键词:RGD多肽 聚苯乙烯 细胞相容性 内皮祖细胞 低分子质量壳聚糖修饰多壁碳纳米管的制备及细胞毒性研究 被引量:5 2015年 目的 利用低分子质量壳聚糖(CS)制备可在水溶液中稳定分散的壳聚糖/多壁碳纳米管(CS/MWCNTs)材料,并观察其与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的相互作用.方法 以物理吸附法对MWCNTs进行CS修饰,利用透射电镜、纳米粒度及Zeta电位分析仪对其进行表征.将CS/MWCNT进行荧光标记,以不同浓度与细胞作用24 h,通过激光共聚焦显微镜观察细胞摄入情况,并检测细胞毒性及细胞内活性氧自由基含量.结果 当低分子质量CS与MWCNTs的质量比大于10∶1时,可很好地将MWCNTs进行分散,CS/MWCNTs可在水相中稳定存在.细胞摄入实验显示,进入细胞内的碳纳米管主要位于胞浆内.毒性检测结果显示,在较高质量浓度(10、20 μg/ml)时,CS分散后的MWCNTs毒性较小.而与2种碳纳米管(MWCNTs与CS/MWCNTs)作用的细胞内的活性氧含量均随着浓度升高而显著提高,差别无统计学意义(P>0.05).结论 水溶性的CS/MWCNTs材料拥有极好的分散性,性状稳定,细胞毒性低,这对后期将其应用于以MWCNTs为载体的治疗研究具有重要意义. 董霞 刘兰霞 朱敦皖 张海玲 冷希岗关键词:壳聚糖 多壁碳纳米管 细胞毒性 N-亚甲基磷酸化壳聚糖基因纳米粒子的体外细胞毒性及基因转染实验研究 被引量:1 2012年 目的 考察N-亚甲基磷酸化壳聚糖( NMPCS)基因纳米粒子的体外细胞毒性及基因转染效率.方法 采用均相反应法制备了NMPCS,用复凝聚法制备了NMPCS/DNA纳米粒子;通过MTT实验考察了NMPCS及其与DNA复合物对HeLa细胞的细胞毒性,以荧光索酶质粒为报告基因考察了NMPCS及NMPCS-CaZ+载体介导的体外基因转染效率.结果 NMPCS及其与DNA的复合物在体外表现出很小的细胞毒性,远远低于同等浓度时聚乙烯亚胺(PEI)的毒性.通过对壳聚糖进行亚甲基磷酸化修饰后,可大幅提高载体的基因转染效率.结论 N-亚甲基磷酸化壳聚糖有望成为一种新型、安全、高效的非病毒基因载体. 宋丽萍 朱敦皖 刘兰霞 董霞 王海 柏金根 冷希岗关键词:非病毒载体 基因转染 右美托咪定在支气管肺泡灌洗过程中作用的研究 2014年 目的 考察右美托咪定在未建立人工气道的颅脑疾病患者支气管肺泡灌洗过程中的作用.方法 对46例颅脑疾病后无人工气道的肺部感染患者行支气管肺泡灌洗治疗,年龄17~82岁,平均年龄(56.6±9.2)岁,其中男性26例,女性20例.随机分为2组,其中对照组23例,支气管肺泡灌洗过程中接受咪达唑仑镇静;实验组23例,支气管肺泡灌洗过程中接受右美托咪定镇静.观察2组患者在支气管肺泡灌洗前和灌洗过程中的心率、平均动脉压及指脉氧等指标的变化.结果 支气管肺泡灌洗过程中最低指脉氧实验组高于对照组,最快心率实验组低于对照组,最低平均动脉压实验组高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05).支气管肺泡灌洗过程中与灌洗前比较,2组心率均有增快,平均动脉压下降,指脉氧下降,但实验组各指标的幅度变化较小(P<0.05).结论 右美托咪定对患者呼吸和血压抑制较小,用于无人工气道的颅脑疾病患者的支气管肺泡灌洗过程相对安全有效. 尹睿 左怀云 刘新平 郑文涛 欧阳修河 朱敦皖 刘兰霞关键词:支气管肺泡灌洗 颅脑疾病 人工气道 牛血红蛋白分子印迹聚硅氧烷的吸附和释放性能 2015年 目的制备对牛血红蛋白(HB)具有选择性吸附及缓释能力的生物材料。方法以HB作为模版分子,以硅烷为功能单体,海藻酸钙水凝胶膜为载体合成HB分子印迹聚硅氧烷(MIP),同时不加模板HB制备非印迹聚硅氧烷(NIP),并研究其对HB的吸附和释放性能。结果MIP对HB的重吸附能力明显强于NIP,并能选择性识别混合蛋白质中的模版蛋白质分子,同时在磷酸盐缓冲液(PBS)和Tris—HCl缓冲液中MIP对HB均具有很好的缓释能力。结论通过分子印迹技术可制备对目标蛋白质具有选择性吸附及缓释能力的生物材料。 朱敦皖 陈卓 赵孔银 王晓辉 张琳华 刘兰霞 董霞 王海 冷希岗关键词:蛋白质吸附 分子印迹 聚硅氧烷 血红蛋白 Polypropylene non-woven supported fibronectin molecular imprinted calcium alginate/polyacrylamide hydrogel film for cell adhesion 被引量:4 2015年 Fibronectin (FN) imprinted polypropylene (PP) non-woven supported calcium alginate/polyacrylamide hydrogel film (PP-s-CA/PAM MIP) was prepared using non-woven PP fiber as matrix, FN as template molecule, sodium alginate (SA) and acrylamide (AM) as functional monomers, via UV radiation-reduced polymerization. The PP-s-CA[PAM MIP exhibited an obvious improvement in terms of adsorption capacity for FN compared with non-imprinted polymer (NIP). The PP-s-CA/PAM MIP was successfully used for the culture of mouse fibroblast cells (L929) and the results showed that PP-s-CA]PAM MIP exhibited better cell adherence performance than the NIP did. Dun-Wan Zhu Zhuo Chen Kong-Yin Zhao Bo-Hong Kan Lan-Xia Liu Xia Dong Hai Wang Chao Zhang Xi-Gang Leng Lin-Hua Zhang