甘肃省自然科学基金(096RJZA053)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 5-氟尿嘧啶筛选残存结肠癌细胞的生物学特点及其与CD133表达的关系被引量：1
- 2011年
- 目的研究5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)筛选残存结肠癌细胞(drug surviving cells,DSCs)是否具有癌症干细胞(cancer stem cells,CSCs)属性及其增殖过程中免疫表型的改变。方法应用5-FU对体外培养的结肠癌细胞株SW480进行处理,收集残存DSCs,检测其细胞周期、克隆形成率、CD133阳性率及在SCID小鼠体内的致瘤率;在无血清培养基(serum-free medium,SFM)中培养DSCs,观察干细胞球的形成及CD133表达改变;机械分离干细胞球所得第2代DSCs在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养,利用免疫荧光及AB/PAS特染技术检测癌细胞CD133、Oct4、VEGF、CD34、CK8/18的表达改变及黏液分泌情况。结果 5-FU作用72 h后继续SSM中培养1周,SW480细胞大量死亡,少量残存的DSCs以G0～G1期细胞为主,克隆形成率及SCID小鼠体内致瘤率明显高于未经处理的SW480细胞(P<0.05);DSCs中CD133+细胞数明显高于未经处理组(P<0.05),VEGF+细胞数明显减少(P<0.05);DSCs在SFM中经过3周连续培养能够形成干细胞球,细胞球内高表达CD133,VEGF表达也轻度增高(P<0.05)。第2代DSCs在SSM内生长时CD133、Oct4表达逐渐降低,而VEGF、CD34、CK8/18表达逐渐增高,并开始分泌黏液。结论 5-FU处理能富集CD133+结肠癌细胞,富集的残存癌细胞具有癌症干细胞属性,其在SSM内增殖过程中逐渐出现了免疫表型改变。
- 张军荣穆继英杨爱军尚立娜牛茜
- 关键词：5-氟尿嘧啶结肠癌CD133癌症干细胞
- 内皮细胞对结肠癌细胞系SW480中CD133^+细胞表达VEGF的影响
- 2010年
- 目的从结肠癌细胞系SW480中分离结肠癌干细胞,并检测内皮细胞对这些细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法分别利用免疫磁珠分选技术和无血清培养法富集CD133+细胞,利用MTT法和平板克隆形成实验检测其生物学特性;采用细胞免疫荧光法检测SW480细胞和CD133+细胞中CD133及VEGF的表达;将SW480细胞或磁珠分选CD133+细胞分别在6种培养条件下进行培养:SW480细胞在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养、SW480细胞在无血清培养基(serum-freemedium,SFM)中培养、磁珠分选CD133+细胞在SFM中培养、SW480细胞与内皮细胞在SSM中共培养、SW480细胞与内皮细胞在SFM共培养、磁珠分选CD133+细胞与内皮细胞在SFM共培养,利用免疫组织化学法检测不同培养条件下结肠癌细胞中CD133及VEGF的表达情况。结果 SW480细胞系中存在少量的CD133+细胞,这些细胞能够连续传代并且表现出更强的增殖潜力以及克隆形成能力。经细胞免疫荧光法检测发现SW480细胞高表达VEGF,低表达CD133,而免疫磁珠分选的CD133+细胞所形成的细胞球低表达VEGF,高表达CD133。无血清培养条件下的SW480细胞随着时间的延长CD133表达率逐渐增加,添加内皮细胞诱导后无血清培养的SW480细胞与前者相比CD133阳性率显著增加(P<0.05)。经过1周的连续培养后,CD133+细胞表达VEGF的比例没有变化,添加内皮细胞诱导1周后,CD133+细胞表达VEGF的比例显著增加(P<0.01)。在无血清培养条件下,SW480细胞表达VEGF的比例随着时间的延长有所降低,但是添加内皮细胞诱导后无血清培养1周的细胞与无内皮诱导培养条件下的细胞相比VEGF表达增加(P<0.01)。结论内皮细胞能够促进CD133+细胞的自我更新维持其未分化状态,并且内皮细胞能够通过诱导CD133+细胞表达VEGF来促进血管的生成。
- 尚立娜杨爱军王晨昱刘伟牛云霞李敏
- 关键词：CD133血管内皮生长因子类内皮细胞
