国家高技术研究发展计划(2007AA02Z407)
- 作品数：10 被引量：44H指数：3
- 相关作者：居丽雯蒋露芳姜庆五杨吉星张维谊更多>>
- 相关机构：复旦大学上海市动物疫病预防控制中心上海市闵行区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科技兴农重点攻关项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 犬肾细胞系、人喉表皮癌细胞、非洲绿猴肾细胞混合培养检测常见呼吸道病毒和肠道病毒被引量：5
- 2011年
- 目的建立犬肾细胞系（MDCK）、人喉表皮癌细胞（Hep-2）、非洲绿猴肾细胞（Vero）混合培养以分离常见呼吸道病毒和肠道病毒，为临床检测主要呼吸道、肠道病毒提供新方法。方法采用MDCK、Hep-2和Vero制备混合瓶，接种甲型流行性感冒（流感）病毒、乙型流感病毒、腺病毒和肠道病毒71型流行株污染的咽拭子，观察细胞病变效应，以及采用单克隆荧光抗体、RT—PCR和PCR鉴定。结果对应不同病毒，敏感细胞系出现明显的细胞病变效应，荧光抗体检测可见特异的绿色荧光颗粒，PCR产物电泳结果可见不同的目的片段。结论混合细胞瓶一次可以分离培养多种常见呼吸道病毒和肠道病毒，通过后续的特异性检测手段即可检测，比直接检测标本抗原、核酸的检出率高。该方法有利于推动临床病毒性疾病的诊断。
- 高颖阳姜晨彦蒋露芳汪千力居丽雯
- 关键词：肠道病毒属细胞系
- 上海地区活禽批发市场H9亚型禽流感病毒调查被引量：26
- 2010年
- 为弄清上海地区活禽批发市场中H9禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）的流行情况及鸡群的免疫情况,2009年对上海三大活禽批发市场进行了采样监测。采用HI试验检测H9 AIV抗体、荧光RT-PCR试验和鸡胚接种分离鉴定病毒。共采集110批次1 646份血样和喉头泄殖腔棉拭样品,平均抗体合格率为60.27%,分离到H9病毒134株,其中4-6月和9-11月为全年中病毒分离的2个高峰期（样品带毒率均超过了10.00%）,明显比其它月份要高（其他月份均低于5.00%）,样品带毒率平均为8.14%。不同市场、不同地区采集的样品其抗体合格率和样品的带毒率也存在一定的差异。在30批分离到病毒的样品中,13批次已免疫H9N2油乳剂灭活苗且抗体合格率均大于70.00%的样品中分离到45株病毒（45/195）,其中6批次抗体合格率达到100%的样品中也分离到了病毒（8/90）,但带毒率明显比未经疫苗免疫的样品（79/255）低。调查结果表明养殖户对肉鸡群H9N2油乳剂灭活苗免疫重视程度不够,鸡群中带毒现象较普遍。疫苗免疫后能产生较高的免疫抗体,且抗体能减轻临床症状,降低带毒率,但不能完全阻止病毒复制,存在高抗体下带毒现象。
- 周锦萍刘健李凯航鞠厚斌邓波张维谊鞠龚讷薛霞唐文红陈琦夏炉明刘佩红
- 关键词：活禽市场带毒率
- 新甲型H1N1流感与中国甲型H1流感HA基因进化比较研究被引量：3
- 2010年
- 目的比较新甲型H1N1流感与中国甲型H1亚型流感病毒HA基因的进化。方法用非度量多维尺度法分析下载自GenBank的中国人和猪甲型H1亚型流感HA序列及WHO北半球流感疫苗推荐株HA序列和新甲型H1N1流感HA序列,构建HA基因进化图谱。结果新甲型H1N1流感病毒HA基因与猪甲型H1亚型流感病毒的亲缘关系较近,而和中国人甲型H1亚型流感病毒及WHO近年推荐的疫苗株亲缘关系很远,并且新甲型H1N1流感病毒HA序列在进化上与中国猪甲型H1亚型流感病毒仍然存在一定距离。结论从基因层面上提示我国人群既往免疫和疫苗对新甲型H1N1流感可能不能提供有效保护,病毒有可能会在人群中流行。同时分析结果提示了尚无证据表明这次始于北美的新甲型H1N1流感来自中国。
- 任晓卫赵耐青居丽雯姜庆五蒋露芳
- 上海市人群H1、H3、H5、H9亚型流感病毒抗体血清学监测被引量：1
- 2009年
- 为了解上海市人群既往感染流感病毒A／H3N2、A／H1N1的免疫保护以及接触禽类人群中禽流感病毒H5、H9亚型既往感染状况，进行了H1、H3、H5、H9亚型流感病毒抗体的血清学监测。
- 吕锡宏姜晨彦周艳冰朱渭萍杨吉星蒋露芳居丽雯
- 关键词：微量血凝抑制试验
- 甲型流感病毒血凝素基因变异与抗原变异关系研究
- 2009年
- 目的了解甲型流感病毒流行株的血凝索基因变异和抗原变异及两者间的关系，结合流行病学资料分析基因变异和抗原变异的吻合情况。方法从2005—2007年上海市季节性流感样病例分离到的甲型流感病毒株中，选取H1N1、H3N2两个亚型中部分有代表性的病毒株，并同WHO北半球流感疫苗推荐株一起，进行血凝素全基因序列测定后做基因进化树分析。同时用灭活的全病毒抗原免疫金黄地鼠，通过血凝抑制试验测定病毒的血凝效价，对血凝抑制结果进行聚类分析，绘制病毒的抗原变异图。结果H3N2分离株与WHO北半球疫苗推荐株A／Sydney／5／97、AVFujiart／411／2002处于不同的基因进化分枝上，时间间隔越久，进化距离越远，同样的结果也出现在抗原变异分析中。而H1N1分离株的基因变异情况和抗原变异情况则不一致，在基因变异中，与疫苗推荐株A／New Caledonia／20／1999的距离远近受到分离时间的影响，抗原变异还与病毒是否从散发病例或聚集性病例分离有关。结论流感病毒血凝素的基因变异和抗原变异的结果基本吻合，采用流行株免疫血清的血凝抑制试验能更好地反映病毒的变异和进化情况。
- 施强陈蓓居丽雯杨忠东杨吉星蒋露芳吕锡宏姜庆五
- 关键词：流感病毒A型基因变异抗原变异聚类分析
- 上海地区2009年人群甲型流感病毒抗体水平监测
- 目的了解上海地区人群血清中季节性H1、H3亚型流感病毒抗体水平及职业人群中H5、H9亚型禽流感抗体的检出情况。方法应用血凝抑制试验(hemagglutinin inhibit test,HI-test)对上海地区2009...
- 吕锡宏杨忠东陈浩蒋懿居丽雯朱渭萍申惠国周艳冰蒋露芳施强姜庆五
- 关键词：甲型流感病毒季节性流感血凝抑制试验
- 上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后抗体水平监测分析
- 目的了解上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后的抗体水平;观察甲型H1N1流感疫苗对该人群的免疫保护作用。方法应用常规微量血凝抑制试验(micro-hemagglutinininhibit test,HI-tes...
- 高颖阳申惠国陈蓓杨忠东陈浩吕锡宏居丽雯
- 关键词：甲型H1N1流感疫苗抗体检测微量血凝抑制试验
- 文献传递
- 上海地区H9亚型禽流感病毒HA基因序列分析被引量：2
- 2009年
- 目的对分离自上海活禽批发市场的7株H9AIV(2002年1株、2006-2008年每年各2株)进行了HA序列的测定,以阐明这7株毒株HA基因的遗传变异及分子特征。方法采集鸡气管和泄殖腔样品,将H9亚型荧光RT-PCR试剂盒检测的阳性样品处理后,经鸡胚尿囊腔接种分离病毒,HI进一步确定HA亚型,通过RT-PCR方法分别扩增了这7个毒株的HA基因,并将其克隆到pMD18-T载体后进行序列测定与同源性分析。结果HI试验表明这7株毒株均属于H9亚型禽流感病毒。核苷酸和其推导的氨基酸序列同源性比较结果表明,这7株毒株HA基因的核苷酸序列同源性为88.6%～99.6%,氨基酸序列同源性为89.1%～99.1%;7株分离株HA基因的裂解位点氨基酸顺序则均为RSSR↓GLF,为低致病性毒株;所有毒株的潜在糖基化位点均有7个;2002年的分离株与2006年早期的分离株在aa226和aa228位分别为Q和G,其余5株分离株在这两个位点分别为L和G。遗传发生关系分析,这7株分离株均属于Ck/Bei/1/94系。结论上海地区7株H9亚型分离株具有相同的起源,且分子特性相似,受疫苗免疫选择压力的影响不大。
- 葛菲菲刘健鞠厚斌张维谊王建沈莉萍徐锋周锦萍刘佩红
- 关键词：H9亚型禽流感同源性
- 流感监测中流感病毒优势株在犬肾细胞系(MDCK细胞模型中竞争性复制的意义被引量：1
- 2013年
- 目的通过流感病毒优势株在犬肾细胞系(Madin-Daby canine kidney cells,MDCK)细胞中竞争性复制,探讨季节性流感流行株感染、复制能力强弱对主导流行株的贡献。方法在对2011年至2012年上海市闵行区季节性流感监测中,监测到流感样病例775例,确诊流感病例119例。选取2012年1月至2月流感病例中分离的3株B型和3株A/H3N2亚型流感流行株,两两交叉配对成9组,共同感染MDCK,细胞培养上清液抽提核酸,mRT-PCR扩增特异性产物。结果有7组共感染组合中A/H3N2(210bp)电泳条带逐渐变强、B型条带(390bp)逐渐变弱至第3代完全消失,2组中A/H3N2与B的条带至第3代均明亮。结论流感病毒共感染竞争性复制结果与当时人群流感监测中优势株转换相符。该方法为探讨可能引起主导流行株在人群中变迁的原因提供了研究思路。
- 汪千力居丽雯蒋露芳申惠国熊海燕朱雯蔡韵姜庆五
- 关键词：流感监测B型流感病毒共感染
- 孔雀新城疫病毒F基因的克隆及其变异分析被引量：1
- 2010年
- 为了对上海珍禽场送检的2只疑似新城疫病毒(NDV)感染的孔雀进行确诊,本研究对其进行了细菌分离和NDV荧光RT-PCR检测以及NDVF基因的序列分析,结果发现内脏病料样品的NDV荧光RT-PCR检测为阳性;通过DNAStar序列分析,F基因与其它参考株核苷酸同源性为81.1%～96.8%,与EF592508黑龙江毒株的同源性高达96.8%,基因系统进化树分析表明,该病毒株与黑龙江毒株的关系较近,均为强毒株。
- 鞠厚斌曹火仁张维谊刘健周锦萍
- 关键词：孔雀新城疫F基因
