温州市科技计划项目(Y20120191)
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 相关作者：俞富祥张启瑜朱千东吴志伟宋才鑫更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 辣椒素抑制大鼠肝纤维化的实验研究被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨辣椒素(capsaicin)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活性的影响及其对实验性肝纤维化的治疗作用。方法:DCFH-DA法检测辣椒素对HSCs中活性氧的影响;CCK-8法检测辣椒素对HSCs增殖的影响;Western blotting检测HSCsα-平滑肌肌动蛋白的表达;RT-PCR检测辣椒素对HSCs纤维化相关基因表达的影响;流式细胞术检测辣椒素对HSCs凋亡的影响;通过腹腔注射四氯化碳建立鼠肝纤维化模型,经腹腔输注辣椒素,检测肝组织病理切片,观察肝纤维化指标的变化。结果:与对照组比较,辣椒素抑制了HSCs中活性氧的产生,明显抑制了HSCs的活化与增殖(P<0.05),促进了HSCs的凋亡(P<0.05),降低了金属蛋白酶组织抑制物1及转化生长因子β1的表达(P<0.05),降低了肝羟脯氨酸含量及血清Ⅲ型胶原和透明质酸水平(P<0.05)。结论:辣椒素抑制HSCs增殖、活化并诱导其凋亡。辣椒素对实验性肝纤维化具有一定的抑制作用。
- 俞富祥朱千东余正平张启瑜
- 关键词：辣椒素肝星状细胞肝纤维化
- 白藜芦醇调节肝星状细胞活性的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对活化态肝星状细胞(HSCs)增殖、活化的影响及其机制。方法从肝脏分离纯化培养HSCs,DCFH-DA法检测不同浓度Res对HSCs中活性氧的影响,CCK-8比色法检测Res对HSCs增殖的影响,Western blotting检测HSCsα-肌动蛋白(α-SMA)的表达,PCR检测Res对HSCs活性相关基因表达的影响。结果 Res抑制HSCs中活性氧的产生,明显抑制HSCs的活化与增殖(P<0.05),改变了HSCs活性相关基因(大鼠生肌调节因子MyoD、胶原蛋白Ⅲ及胶原蛋白I)的表达(P<0.05)。结论 Res能够抑制HSCs的活化增殖,Res对HSCs的作用可能与抗氧化及抑制MyoD的表达有关。
- 李扬扬张启瑜朱千东俞富祥
- 关键词：白藜芦醇肝星状细胞增殖活化肝纤维化
- 脂肪特异性蛋白27对肝星状细胞增殖与胶原合成的影响
- 2013年
- 本研究旨在观察FSP27基因对肝星状细胞（HSCs）增殖与胶原合成的影响,现报道如下.一、材料和方法1.材料：鼠抗平滑肌肌动蛋白（α-SMA）抗体购自Southem-Biotech公司;RNA Trizol试剂盒购自Invitrogen公司.2.带Fsp27基因的慢病毒载体构建及细胞感染：构建的重组体慢病毒包含鼠Fsp27基因及绿色荧光蛋白（GFP）基因,对HSCs进行慢病毒感染.根据慢病毒中GFP的表达,测算感染效率.3.Fsp27对细胞表型及细胞增殖的影响：实验分为空白对照组（无病毒转染）、阴性对照组（空载病毒转染）及实验组（Fsp27慢病毒转染）,慢病毒转染HSCs后观察细胞表型的变化,细胞计数试剂盒（CCK-8）测算细胞增殖抑制率.
- 李艳艳朱千东张启瑜俞富祥
- 关键词：肝星状细胞增殖胶原合成慢病毒感染平滑肌肌动蛋白P27基因P27基因
- 脂肪特异性蛋白27（Fsp27）基因延缓四氯化碳所致实验大鼠肝纤维化被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨脂肪特异性蛋白27（Fsp27）基因对活体肝纤维化进程的调节作用.方法 分离原代肝星状细胞（HSCs）,采用PCR技术检测在原代HSCs及活化HSCs中的Fsp27基因表达；构建携带Fsp27目的基因的慢病毒；建立肝纤维化模型；慢病毒转染模型鼠肝脏,对实验大鼠行肝脏病理切片检查,采用ELISA法和放射免疫法分别检测肝脏及血浆纤维蛋白含量.结果 Fsp27基因在原代HSCs及活化HSCs中表达差异有统计学意义（P＜0.01）；成功构建了Fsp27基因的慢病毒载体；成功建立了肝纤维化活体模型；Fsp27基因慢病毒成功转染大鼠肝脏,Fsp27基因减轻了肝脏的纤维化程度.结论 Fsp27基因具有延缓活体肝纤维化进程的作用.
- 吕天旻朱千东张启瑜俞富祥
- 关键词：四氯化碳疾病模型胞间信号肽类和蛋白质类
- 辣椒素调节肝星状细胞活性延缓肝纤维化的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨辣椒素对大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）活性的影响及其对活体肝纤维化的治疗作用.方法 DCFH-DA法检测辣椒素对HSCs中活性氧的影响；用酶标法检测辣椒素对HSCs增殖的影响；Western blot检测HSCs α-肌动蛋白（α-SMA）的表达；RT-PCR检测辣椒素对HSCs纤维化相关基因表达的影响；流式细胞仪检测辣椒素对HSCs凋亡的影响；Western blot法检测bcl-2、bax、细胞色素酶c（cytochrome,cyt-c）等蛋白的表达；建立鼠肝纤维化模型,经腹腔输注辣椒素,检测肝组织病理切片,肝纤维化指标.结果 辣椒素抑制HSCs中活性氧的产生,抑制HSCs的活化（F=57.392,P＜0.05）与增殖（F=13.267,P＜0.05）,促进HSCs的凋亡（F=235.571,P＜0.05）,促进凋亡相关蛋白Bax、cyt-c、caspase-3的表达（分别F=29.334,38.274,138.329,均P＜0.05）.改变HSCs纤维化相关基因TGF-β1、TIMP-1的表达（分别F=376.534,253.751,均P＜0.05）,活体实验显示辣椒素可降低肝羟脯氨酸含量及血清Ⅲ型胶原和透明质酸水平（分别F=153.397,27.149,38.392,均P＜0.05）.结论 辣椒素抑制HSCs增殖活化并诱导其凋亡.辣椒素对肝纤维化具有一定的抑制作用.
- 俞富祥吴志伟朱千东符竣惠张启瑜
- 关键词：肝硬化辣椒辣素肝星状细胞
- 脂肪特异性蛋白27对大鼠肝星状细胞活化的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨脂肪特异性蛋白27(Fsp27)对肝星状细胞(HSCs)增殖和活化的影响及其对纤维化相关蛋白的调节作用。方法:从SD大鼠肝脏提取HSCs并培养,采用实时荧光定量PCR、免疫荧光染色和Western blotting检测原代HSCs和活化HSCs中Fsp27 mRNA和蛋白的表达。构建携带Fsp27基因的慢病毒,转染活化的HSCs并继续培养72 h,通过CCK-8比色法检测Fsp27对HSCs增殖的影响;Western blotting检测HSCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,了解HSCs的活化状态;实时荧光定量PCR检测Fsp27对HSCs中纤维化相关蛋白[包括基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)]mRNA表达的影响。结果:成功分离大鼠原代HSCs。Fsp27在原代HSCs和活化HSCs中的表达差异显著(P<0.01);活化HSCs成功转染携带Fsp27基因的慢病毒后继续培养72 h,与对照组比较,HSCs的活化与增殖被明显抑制(P<0.05);Fsp27促进MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),降低TIMP-1和TGF-β1mRNA的表达(P<0.05)。结论:Fsp27可抑制HSCs的增殖和活化,并调节纤维化相关蛋白的表达。Fsp27的作用可能与其维持HSCs静息状态细胞表型有关。
- 俞富祥宋才鑫吴志伟张启瑜
- 关键词：肝星状细胞
- 脂肪特异性蛋白27基因抑制大鼠肝星状细胞增殖活化被引量：2
- 2013年
- 目的探讨脂肪特异性蛋白27（Fsp27）基因对活化态肝星状细胞（HSCs）增殖、活化的影响及其对纤维化相关基因的调节作用。方法提取HSCs并培养。用实时定量PCR技术检测原代HSCs及活化HSCs中的Fsp27基因表达。构建携带Fsp27目的基因的慢病毒，转染活化的HSCs并继续培养72h。通过CCK-8比色法检测Fsp27基因对HSCs增殖的影响。Western blot检测HSCs α-肌动蛋白（α—SMA）的表达，了解HSCs的活化状态。实时定量PCR技术研究Fsp27基因对HSCs纤维化相关基因表达的影响。结果成功分离原代HSCs，Fsp27基因在原代HSCs及活化HSCs中表达差异显著（P〈0．01）。活化HSCs成功转染携带Fsp27目的基因的慢病毒后继续培养72h，与对照组比较，HSCs的活化与增殖受到明显抑制（P〈0．05）；Fsp27基因促进MMP-2的表达（P〈0．05），降低了TIMP-1及TGF-β1的表达（P〈0．05）。结论Fsp27基因具有抑制HSCs活化增殖的潜能，Fsp27基因可调节纤维化相关基因的表达。Fsp27基因的作用可能与维持HSCs静息状态细胞表型有关。
- 俞富祥宋才鑫吴志伟朱千东张启瑜
- 关键词：基因肝星状细胞增殖活化
