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国家杰出青年科学基金(39525002)
作品数:
1
被引量:4
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相关作者:
谷成
李兵
赵进东
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相关机构:
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赵进东
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谷成
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1998
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Pfu酶基因的克隆、表达、纯化及长距离PCR的研究
被引量:4
1998年
用PCR方法从Pyrococcusfuriosus的总DNA扩增出了含有PfuDNApolA基因的 2 .3kb片段 ,并将该基因克隆入pGEM T载体 .用NcoⅠ和XhoⅠ对重组质粒 pT pfu进行酶切 ,并将 pfupolA基因插入表达载体pET 3d X .在大肠杆菌BL2 1(DE3)中将pfupolA基因进行表达 ,然后用热变性、聚乙二胺 (PEI)沉淀和Bio rex 70离子交换法对其基因产物 (Pfu酶 )进行纯化 .用蛋白质N 末端测序法证实了确为重组Pfu酶 .利用重组Pfu酶 ,成功地用长距离PCR法扩增出大于 10kb的λDNA片段 .
李兵
谷成
赵进东
关键词:
DNA
PCR
无性系
基因表达
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