四川省科技支撑计划(2011FZ060)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨艳李妙龄曾晓荣毛亮谭晓秋更多>>
- 相关机构：泸州医学院教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白激酶A在慢性心房颤动患者2型小电导钙激活钾通道调控中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨心房颤动(AF)时心房肌细胞2型小电导钙激活钾通道(SK2通道)功能的改变及蛋白激酶A(PKA)相关途径对SK2通道电流的调节。方法:从体外循环手术中获取右心耳组织,应用改良的急性酶分离法获得人心房单个心肌细胞,采用膜片钳全细胞记录模式进行SK2通道电流记录。对比窦性心律(SR)组和AF组SK2通道电流密度及其在混合电流中所占比例的变化。观察PKA特异性抑制剂H-89对SK2通道电流的作用。采用BCA法和ELISA法检测心房组织总蛋白和PKA的含量。结果:(1)SR组和AF组的SK2通道电流均呈现内向整流特性。AF组SK2通道电流密度明显增高,且在混合电流中所占比例增加。在-130 mV钳制电压下,SR组和AF组SK2通道电流密度分别为(-2.61±0.14)pA/pF和(-6.21±0.59)pA/pF,在混合电流中所占比例分别为(20.01±1.44)%和(42.87±1.79)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)H-89能够降低SR组和AF组SK2通道电流密度,且对AF组SK2通道电流密度的抑制更明显。在-130 mV钳制电压下,H-89对SR组和AF组SK2通道电流密度的抑制率分别为(39.27±4.08)%和(76.32±2.94)%;SK2通道电流在混合电流中比例亦下降,抑制率分别为(37.48±4.77)%和(56.40±3.66)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)AF使PKA含量下降。SR组和AF组PKA含量分别为(511.91±7.22)ng/L和(444.09±7.88)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AF患者心房肌细胞SK2通道电流密度及其在混合电流中比例升高,是AF发生和维持的基础之一,电流改变参与了心房电重构过程。PKA能够通过一定途径调节SK2通道功能,且对AF心房肌细胞SK2通道的调节更为显著。
- 张丽李涛李妙龄毛亮谭晓秋杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道蛋白激酶A
- 蛋白激酶C对心房颤动患者心房肌小电导钙激活钾通道的影响
- 2014年
- 目的:比较心房颤动(AF)时蛋白激酶C(PKC)对小电导钙激活钾通道(SK)电流的影响,探讨人AF时PKC途径对SK2通道的调节作用。方法:取行体外循环手术患者新鲜的右心耳组织,采用改良的酶分离法获得单个心房肌细胞,全细胞膜片钳模式且电极液中游离钙离子浓度为5×10-7 mol/L时记录SK2通道电流。比较正常的窦性心律组(SR组)和AF组患者心房肌细胞SK2通道电流密度,观察PKC特异性激活剂PMA对SK2通道电流的影响。结果:1AF组SK2通道电流密度明显大于SR组,且AF组SK2通道电流在混合内向电流中所占的比例明显增加;在-130mV膜电压下,SR组和AF组SK2通道电流密度分别(-5.10±0.32)pA/pF(nSR=5)和(-10.71±0.73)pA/pF(nAF=5),P<0.05;SR组和AF组SK2通道电流在混合内向电流中所占的比例分别为(23.20±1.09)%和(32.87±1.81)%(nSR=5,nAF=6),P<0.05。2PKC激活剂PMA降低SR组和AF组SK2通道电流密度及其在混合电流中所占的比例,AF组的抑制比大于SR组;在-130mV电压下,PMA对SK2通道电流的抑制比分别为(8.39±0.80)%和(20.9±0.70)%。结论:AF时SK2通道功能增强,激活PKC后可下调SK2通道电流,且对AF患者SK2的调节作用更显著,推测PKC相关途径对SK2通道的调控参与了心房电重构过程。
- 范学慧李妙龄李涛谭晓秋毛亮杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道蛋白激酶C
- 人心房肌蛋白激酶C表达下调参与心房颤动发病机制被引量：1
- 2014年
- 目的:研究心房颤动(atrial fibrillation,AF)时心房肌组织中PKCα、δ、ε、θ4种亚型mRNA和PKC总蛋白的表达变化,探讨PKC与AF发生发展的相关性。方法:泸州医学院附属医院行体外循环手术患者常规切除的右心耳组织作为研究对象。①实时定量PCR实验:提取人右心耳组织总RNA,β-actin为内参照基因,采用SYBR GreenⅠ法实时荧光定量PCR技术检测SR和AF患者PKCα、δ、ε、θ基因mRNA水平。②western blotting实验:有心耳组织提取总蛋白,测定蛋白浓度,GAPDH作为内参照,SDS-PAGE电泳检测SR和AF患者PKC的蛋白表达变化。结果:①AF患者心房肌细胞PKCα和PKCδ亚基mRNA水平下调;PKCε和PKCθ亚基mRNA水平明显上调。②SR组与AF组PKC总蛋白相对表达量分别为1.37±0.09(n=23)、1.00±0.10(n=18),(P<0.05)有统计学意义。结论:与SR患者相比,AF患者心肌细胞中PKCα、δ亚基mRNA明显下调,PKCε、θ亚基mRNA上调,PKC总蛋白表达降低。PKC亚型mRNA和总蛋白的表达变化可能是参与AF发生发展的分子基础之一。
- 范学慧李涛毛亮李妙龄谭晓秋杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动蛋白激酶C基因水平蛋白水平
