国家高技术研究发展计划(2013AA102504) 作品数:18 被引量:51 H指数:4 相关作者: 石德顺 刘庆友 李艳华 刘林 乔绿 更多>> 相关机构: 广西大学 北京奶牛中心 中国农业大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 北京市科技计划项目 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
全国农垦规模化奶牛场标准体系建立与实施效果分析 2017年 我国奶牛养殖业正处于转型升级期,规模化牛场硬件得到明显改善,但软实力还有待进一步提高。通过标准体系建立实施与配套新技术应用,建成一批全国农垦现代化养殖示范场,达到设备设施和生产工艺先进、产品优质安全、标准体系完善、员工素质显著提高,实现设施现代化、畜禽良种化、生产标准化、管理信息化、防疫制度化、粪污无害化以及员工专业化,农牧资源的合理有效利用,经济和社会效益显著,使之真正成为全国现代养殖业生产的示范带动基地,推动全国农垦奶牛业健康可持续发展。 韩广文 李艳华 李艳华 孙东晓 刘胜军关键词:奶牛场 中国荷斯坦牛乳脂肪酸性状影响因素分析 被引量:9 2013年 旨在研究牛场、胎次、公牛家系和泌乳阶段等4个固定效应对中国荷斯坦牛乳脂肪酸组分含量的影响。该研究以816头北京地区中国荷斯坦牛为试验对象,采用气相色谱法对个体牛奶中不同乳脂肪酸组分进行测定,共计包括豆蔻酸(C14:0)、棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)和亚油酸(C18:2)等27种性状,采用固定效应模型和SAS 9.1软件的GLM过程进行统计分析。结果表明,中国荷斯坦牛乳脂肪酸组分主要以C16:0、C18:1n9c、C18:0、C14:0和C18:2为主,C16:0含量为最高达32.65%;SFA∶UFA=1.70∶1;牛场和泌乳阶段效应对牛乳脂肪酸组分含量影响极显著(P<0.001),公牛家系效应对主要脂肪酸组分影响显著(P<0.05),胎次效应对脂肪酸组分影响较小。研究结果显示,中国荷斯坦牛乳中不同脂肪酸组分含量性状主要受到牛场、公牛和泌乳阶段3种效应影响,为进行牛乳脂肪酸含量性状的全基因组关联分析及基因定位研究提供了理论基础,为牛乳营养品质改善提供了指导意义。 李聪 张胜利 刘林 李艳华 乔绿 孙东晓关键词:中国荷斯坦牛 乳脂肪酸 机器人挤奶对荷斯坦牛产奶量及乳成分的影响 2017年 本试验旨在研究和传统奶厅挤奶相比,机器人挤奶系统对奶牛产奶量及乳成分的影响。选取64头体重相近、处于泌乳盛期、日均产奶量相近的健康荷斯坦牛分为2组,即传统奶厅挤奶组(CMS)和机器人挤奶组(AMS),每组32头(初产牛和经产牛各16头)。预试期10d,正试期60d。结果表明:机器人挤奶对奶牛的产奶量有显著的影响(P<0.05),总体产奶量提高了2.08%;AMS组经产牛产奶量显著高于CMS组经产牛(37.4±8.3kg/d vs.35.4±4.5 kg/d,P<0.05),初产牛间差异不显著(P>0.05)。机器人挤奶系统对乳脂率、乳蛋白率、非脂乳固形物和体细胞数均无显著影响(P>0.05);AMS组经产牛的乳脂率(4.54±0.64%vs.4.05±0.71%)和乳蛋白率(3.42±0.19%vs.3.21±0.23%)显著高于CMS组经产牛,初产牛间差异不显著(P>0.05)。由此可见,本试验条件下,采用机器人挤奶可以提高经产牛日均产奶量、乳脂率和乳蛋白率,改善乳品质,但对初产牛无显著影响。 刘辉 丛慧敏 乔绿 吕中旺 麻柱 沙里金关键词:产奶量 乳成分 铁蛋白Ferritin原核表达和纯化及纳米颗粒胞外自组装 被引量:3 2018年 旨在使用原核表达系统表达幽门螺杆菌铁蛋白Ferritin,获得具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,从而通过表面修饰等方法应用于疾病治疗和抗原呈递等研究。将铁蛋白氨基酸序列按照大肠杆菌常用密码子进行优化,合成重组铁蛋白基因并克隆至原核表达载体。使用镍柱进行亲和层析纯化重组蛋白,并在透析复性后利用透射电子显微镜对体外自组装纳米颗粒进行鉴定。结果显示,本研究成功构建了pET-32a-Ferritin原核表达载体,并使用IPTG进行诱导表达获得His-Ferritin重组铁蛋白,且主要以包涵体形式存在。通过镍柱进行亲和层析纯化获得纯度为96%的重组蛋白,使用脱盐柱将重组蛋白梯度透析至2mol·L-1尿素缓冲液中进行复性后,使用电子显微镜观察胞外自组装重组蛋白为粒径在12~20nm的均一的纳米结构,与天然铁蛋白纳米粒子类似。本研究成功建立了Ferritin蛋白原核表达体系,通过诱导表达、亲和层析纯化及复性获得了具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,为其在生物医药领域的应用奠定基础。 李志鹏 刘福航 崔奎青 石德顺 刘庆友关键词:铁蛋白 原核表达 北京地区荷斯坦牛短脊椎综合征的分子筛查 被引量:3 2016年 牛短脊椎综合征(Brachyspina syndrome,BS)是在荷斯坦牛群中发现的一种隐性遗传缺陷疾病,是由牛21号染色体上FANCI基因3 329bp碱基缺失突变引起的,隐性基因纯合时引起胚胎早期流产或畸形,给奶牛养殖者造成很大的经济损失。本研究利用长片段PCR方法对北京地区636头母牛样品进行了检测分析,研究结果表明,在所检测的奶牛群体中,BS有害遗传缺陷基因的携带率为6.8%,有害等位基因频率为3.4%,并通过系谱追踪发现,BS遗传缺陷可追溯到美国一头非常优秀的公牛Sweet Haven Tradition(USAM1682485,BY),其后代在我国有一定的影响。通过剔除BS携带者公牛可以有效控制BS遗传缺陷的传播,但是,我国部分BS携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以,有效监控BS携带者在奶牛群中的状况对BS剔除计划是有益的。 李艳华 杨超 朱玉林 吕小青 刘林 麻柱 张胜利 孙东晓 乔绿关键词:荷斯坦牛 BS 基因频率 重组水蛭素的原核表达及分离纯化 被引量:3 2018年 为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求,试验通过对水蛭素基因进行密码子优化,构建了重组水蛭素原核表达系统,并对D600nm值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索,同时通过引入试验设计(design of experiment,DOE)方案将4种因素对诱导效率的影响进行进一步系统的优化,使用His-Trap亲和层析对重组蛋白进行纯化,并通过凝血酶滴定法对重组水蛭素的活性进行测定。结果显示,试验成功构建重组水蛭素原核表达载体,水蛭素蛋白为可溶性表达。单因素变量优化后的诱导条件为:在菌体密度D600nm值为0.4时,加入1mmol/L IPTG,37℃下诱导7h,重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白66.5%;而DOE试验优化结果为:在菌体密度D600nm值为0.6时,加入0.82mmol/L IPTG,31.9℃下诱导7.6h,预测重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白72.7%,显著高于单因子变量法优化结果(P<0.05)。进一步分析发现,各影响因素之间存在明显的交互效应,影响了单因素试验结果的准确性。通过亲和层析纯化后的重组水蛭素纯度可达99%,抗凝活性为114ATU/mg。研究成功构建了重组水蛭素原核表达载体,对其表达条件进行了优化,并获得了重组水蛭素蛋白,为水蛭素应用于生物医药奠定了基础。 黄孔威 李志鹏 崔奎青 石德顺 刘庆友关键词:水蛭素 原核表达 DOE 北京地区荷斯坦牛生乳中脂肪酸含量的分析 被引量:5 2016年 本试验采用乙酰氯-甲醇甲酯化法对生乳进行前处理,经气相色谱法分析了北京地区荷斯坦牛生乳中的脂肪酸含量。试验结果显示:该方法具有良好的重复性。经检测,北京地区荷斯坦牛生乳中脂肪酸含量较高的脂肪酸组分共22种,以C16:0、C18:1cis、C18:0、C14:0及C18:2cis为主,这5种脂肪酸的含量之和超过了80%,其中含量最高的脂肪酸为C16:0,约占总脂肪酸含量的34%。 吕小青 水明 李聪 李艳华 赵凤 刘林 乔绿关键词:脂肪酸 气相色谱 水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织miRNAs表达谱鉴定及差异表达分析 被引量:2 2017年 旨在鉴定分析水牛乳腺泌乳期和非泌乳期miRNA的表达谱和差异作用机制。采集水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织,利用Solexa测序技术构建2个时期miRNAs表达谱,鉴定前体miRNAs、成熟miRNAs和新miRNAs,分析miRNAs的第一偏好性核苷酸和染色体分布,发掘水牛泌乳期和非泌乳期高表达及差异表达miRNAs。结果显示,本研究构建了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织2个miRNA表达谱,分别获得12 768 110和12 569 467条18~31nt的高质量序列。测序确认了归属259个miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个pre-miRNAs及5个水牛特有的miRNAs。U是19和25nt miRNAs的5′端最普遍的核苷酸。bbu-let-7b、bbu-let-7a、miR-26a和miR-21等miRNAs在2个时期均呈现高表达;bbu-miR-148a、143、200c、200a和bbu-let-7f等miRNAs在非泌乳期特异性高表达。bbu-miR-125b、29a和bbu-let-7c等miRNAs在泌乳期特异性高表达。bbu-miR-148a、143、200a、141和30a-5p等miRNAs在泌乳期的表达量下降为非泌乳期的1/2以下。而bbu-miR-26a、29a、125b、99a和bbulet-7c等miRNAs在泌乳期表达量大于或等于2倍非泌乳期丰度。本研究构建了水牛泌乳期以及非泌乳期乳腺组织2个miRNAs表达谱,测序确认了259个水牛miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个前体miRNAs,5个水牛特有miRNAs和10个高差异表达miRNAs,为进一步阐明奶水牛泌乳关键miRNAs作用机制奠定了基础。 蔡小艳 鲍正攀 古景开 邓凯 张晓溪 任艳萍 沈朋雷 石德顺 刘庆友关键词:水牛 乳腺组织 信号通路 意大利地中海奶水牛引种观察初报 被引量:1 2018年 为加快我国南方河流型水牛品种改良,提高我国河流型水牛的乳用和肉用性能,从意大利引进1~2岁高产意大利地中海奶水牛59头,其中公水牛10头,母水牛49头,进行近3年的适应性观察和生产性能测定。结果表明:引进地中海奶水牛成年公牛体重平均为814.1 kg,母水牛体重平均为601.8 kg。公牛采精平均精子密度为12.25亿/m L,平均精子活力为0.54;母牛人工授精平均情期受胎率35.16%,平均初产日龄为1 299.8 d,平均怀孕天数为310.44 d;泌乳期平均产奶量为2 011.3 kg,优秀个体第1胎泌乳300 d,产奶量达到2 818.3 kg。由此表明,引进的地中海水牛很好地适应了我国南方的亚热带气侯环境,各项生产性能和指标与引进地基本相同,应加快推广应用。 李辉 陈明棠 刘超 谭正准 黄健 李忠权 赵宏涛 石德顺 刘庆友脯氨酸对母猪繁殖性能影响的研究进展 被引量:10 2017年 脯氨酸为环状的α-亚氨基酸,同时也是哺乳动物的功能性氨基酸,在蛋白合成、机体新陈代谢、伤口愈合、抗氧化反应和免疫反应中发挥着重要作用。研究发现,添加适量的外源性脯氨酸,可以促进胎儿与仔猪的生长发育、预防胎儿宫内生长迟缓,同时对胚胎、乳腺及胎盘生长发育具有重要的意义。作者阐述了脯氨酸的结构特征、理化性质、合成和分解代谢,重点介绍了脯氨酸对母猪繁殖性能的影响及其潜在的机制,为进一步研究脯氨酸对母猪繁育的影响提供参考。 陈秋萍 徐生祥 刘庆友 石德顺关键词:脯氨酸 母猪 繁殖性能