国家自然科学基金(39670781)
- 作品数：17 被引量：114H指数：8
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- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院黄石市第一人民医院更多>>
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- 老年大鼠耳蜗螺旋神经节及耳蜗核线粒体DNA缺失的研究被引量：6
- 2005年
- 目的 探讨耳蜗螺旋神经节及耳蜗核线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)缺失在老年聋发病中的可能作用。方法 分别测试老年组及青年组大鼠听性脑干反应 (ABR)阈值 ,应用聚合酶链反应 (polymerasechainre action,PCR)技术对老年及青年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核mtDNA 4 834bp缺失片段进行检测。结果老年组及青年组大鼠ABR阈值分别为 71.0 0± 6 .75、39.83± 4 .4 5dBpeSPL。老年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核mtDNA483 4 缺失出现率分别为 6 6 .7%、10 0 % ;青年鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核均无此片段缺失。 结论 老年大鼠耳蜗螺旋神经节及脑组织中耳蜗核存在mtDNA片段缺失 ,并可能在老年聋发病中起重要作用。
- 刘俊孔维佳刘维荣
- 关键词：老年聋
- 豚鼠畸变产物耳声发射的检测被引量：9
- 2001年
- 目的 :建立稳定可靠的检测动物畸变产物耳声发射的方法。方法 :采用预先手术切除耳屏软骨 ,加用自制探头套管 ,选择复合麻醉等改良方法 ,测量健康杂色豚鼠 7只 ( 13耳 ) 2、4、6k Hz畸变产物耳声发射( DPOAE)输入输出 ( I/ O )曲线、潜伏期等指标。结果 :各频率 DPOAE引出率均为 10 0 % ,I/ O曲线最大幅值分别为 ( 2 7.2 4± 4 .15 ) d B SPL ,( 2 7.98± 4 .0 5 ) d B SPL和 ( 4 1.4 5± 1.2 0 ) d B SPL ;潜伏期为 ( 2 .0 6± 0 .2 1) m s,( 1.5 2±0 .16) ms和 ( 1.3 7± 0 .0 8) m s。结论 :改良法豚鼠 DPOAE检出率高 ,振幅大 ,各指标结果重复性好 ,适用于动物DPOAE的研究。
- 杨盈孔维佳章巍华
- 关键词：畸变产物耳声发射
- 听神经-听觉通路完整性综合评估法被引量：12
- 2003年
- 目的 :探讨评估人工耳蜗植入候选者听神经 听觉通路完整性的方法及其临床应用价值。方法 :应用本小组建立的听神经 听觉通路完整性综合评估法 ,对 2 4例双侧耳极重度感音神经性聋的人工耳蜗植入候选者进行了检查和评估。听神经 听觉通路完整性综合评估法由①临床听力学 ;②放射影像学 ;③外耳道电刺激测听法 ;④日常环境声反应评估法 ;以及⑤言语发育反馈听力评估法等 5个方面的检查构成。结果 :2 4例人工耳蜗植入候选者中 ,有 2 3例符合听神经 听觉通路完整性的标准而施行了人工耳蜗植入术 ,开机调试后全部人工耳蜗植入的患儿听阈皆降低 (≥ 5 0dB) ;另 1例患儿听神经 听觉通路完整性的综合评估结果提示其双侧听神经缺如 ,避免了无意义的人工耳蜗植入。结论 :本小组建立的听神经 听觉通路完整性综合评估法简便可行 ,结论可靠。听神经 听觉通路的完整性应列为人工耳蜗植入候选者适应证的一项必备条件。
- 孔维佳乐建新熊新高朱立新孔祥泉韩萍马辉段家德戴陈凯程华茂
- 关键词：人工耳蜗植入综合评估法
- 维生素E和辅酶Q10对大鼠内耳组织线粒体DNA 4834 bp缺失突变的预防作用被引量：24
- 2004年
- 目的 研究维生素E、辅酶Q10对大鼠线粒体DNA 4 834缺失突变的预防作用。方法Wistar大鼠 4 6只 ,采用抽笼法随机分为 3组 ,实验组 (A组 ,18只 )阿霉素 1mg/kg腹腔注射 ,每周 2次 ,共 3个月 ,同时给予维生素E 5 0mg/kg和辅酶Q10 10mg/kg灌胃 ,每天 1次 ;生理盐水对照组 (B组 ,18只 )在给予阿霉素的同时予以生理盐水灌胃 ;空白对照组 (C组 ,10只 )仅给予生理盐水灌胃。提取内耳组织总DNA ,利用巢氏聚合酶链反应技术检测内耳组织线粒体DNA 4 834bp缺失突变的发生情况 ,并检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化。结果 A组大鼠线粒体DNA 4 834bp缺失突变发生率为 2 3 0 8% (3/ 13) ,B组为 6 8 75 % (11/ 16 ) ,C组为 0 (0 / 8) ,经Fisher′s精确概率检验 ,单侧检验 ,A组和B组之间差异有显著性 (P =0 0 18) ,A组和C组之间差异无显著性 (P =0 2 15 )。A组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性较B组高 ,差异有显著性 (校正t′检验 ,单侧检验 ,t′=6 4 74 ,P <0 0 1) ;A组和C组之间差异无显著性 (校正t′检验 ,双侧检验 ,t′ =1 92 0 ,P >0 0 5 )。结论 维生素E和辅酶Q10具有增加机体对自由基的清除能力 ,保护内耳组织线粒体DNA ,降低 4 834bp缺失突变发生率的作用。
- 孔维佳韩月臣王莹胡钰娟刘俊王琼
- 关键词：维生素E辅酶Q10
- 硝普钠对豚鼠耳蜗外毛细胞全细胞钙电流作用的实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨一氧化氮供体———硝普钠 (sodiumnitroprusside ,SNP)对豚鼠单离耳蜗外毛细胞钙电流的影响及作用机制。方法 利用急性分离的豚鼠耳蜗外毛细胞 ,在全细胞膜片钳电压钳记录技术下 ,通过分离离子电流成分的方法 ,记录豚鼠耳蜗外毛细胞全细胞钙电流。结果 SNP对内向钙电流有抑制作用 ,在钳制电位为 -60mV ,刺激电压为 + 10mV的条件下 ,10mmol/L的SNP能抑制 (61 12± 1 99) %的内向钙电流 ( x±s ,n =5)。从 5～ 8个细胞得到的量效关系曲线中 ,其半数作用浓度为 1 9mmol/L ,最大抑制浓度为 10 0mmol/L ,斜率为 0 98。作用的机制为SNP可选择性地阻断外毛细胞膜上的L 型钙通道 (n =6)。结论 SNP作为一氧化氮的一种供体 ,能影响豚鼠耳蜗外毛细胞的生理功能 ,是通过阻断外毛细胞L
- 周建波孔维佳
- 关键词：硝普钠耳蜗毛细胞钙离子通道膜片钳术
- 多柔比星耳毒性的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨多柔比星的耳毒性及维生素E(VitE)和泛癸利酮(CoQ10)的保护作用。方法Wistar大鼠46只,随机分为3组,其中A组大鼠18只,腹腔注射多柔比星(doxorubicin,DOX)1mg·kg-1(体重),每周2次,同时给予生理盐水灌胃,共3个月;B组大鼠18只,腹腔注射多柔比星1mg·kg-1(体重),每周2次,共3个月,同时给予CoQ1010mg·kg-1·d-1和VitE50mg·kg-1·d-1灌胃;C组大鼠10只,全程以等量生理盐水替代进行腹腔注射及灌胃。用药前后分别进行听性脑干反应(ABR)检测。提取耳蜗组织总DNA,利用巢式聚合酶链式反应(nestedPCR)检测线粒体DNA4834bp缺失突变的发生情况,PCR产物直接测序。同时测定血清谷光苷肽过氧化物酶活性。结果B组用药后听阈增高(923±1901)dB较A组(2094±1624)dB低,差异有极显著性意义(P<001);B组和C组相比听阈增高,差异无显著性意义;B组内耳组织线粒体DNA4834缺失突变发生率(2308%)较A组(6875%)明显降低,差异有显著性意义(P<005);B组血清谷光苷肽过氧化物酶活性(14094±4258)U比A组(5995±1865)U高,差异有极显著性意义(P<001)。结论长期应用多柔比星可引起大鼠听阈的轻度增高,诱发内耳组织线粒体DNA4834bp缺失突变。CoQ10和VitE可以降低多柔比星对内耳组织的损伤作用。
- 韩月臣孔维佳胡钰娟王莹刘俊王琼
- 关键词：多柔比星线粒体DNA突变耳毒性
- 豚鼠耳蜗单离Deiters细胞分离方法及活性判定标准被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨分离单离Deiters细胞的方法及活性判定标准。方法 分别用胶原酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶消化基底膜后结合机械吹打分离出Deiters细胞 ,观察并计数。结果 单离的Deiters细胞呈豆点状 ,分胞体、柄、指突三部分 ,平均每双侧耳可分离到 2 0～ 32个单离的Deiters细胞。活性标准 :细胞膜光滑 ,双折射现象存在 ,细胞核位置正常 ,指突完整 ,无呈布朗运动的颗粒。结论 三种常用的酶孵育后结合吹打法均可以分离出相当数量且具有活性保存较好的单离Deiters细胞 ;
- 戴陈凯孔维佳
- 关键词：耳蜗胶原酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶
- 豚鼠畸变产物耳声发射潜伏期的对侧抑制效应现象被引量：3
- 2001年
- 目的 通过观察对侧抑制效应中畸变产物耳声发射 (distortionproductotoacousticemissions ,DPOAE)各指标的改变 ,探讨耳蜗生理机制及传出神经的调节机能。方法 12只健康杂色豚鼠分A、B 2组 ,在对侧耳无声刺激及给予 70dBSPL宽带噪声条件下 ,分别使用不同的原始纯音强度组合测定在f2 =2、4、6kHz时测试耳DPOAE之幅值及潜伏期。次日 ,A组动物取背侧径路开放右耳听泡 ,圆窗膜给予 6 0mmol/L卡因酸 1μL ,作用 3h后拭去。给药后 6h测试右耳无声刺激和给予 70dBSPL宽带噪声刺激下 ,左耳的DPOAE幅值、潜伏期等指标。结果 ①用药前 ,A组对侧耳给声时以等强度原始音诱发的测试耳DPOAE各频率幅值与给声前基本无变化 ,而潜伏期显著延长 ;②用药前 ,B组对侧耳给声时以差强度原始音 (L2 =L1- 10dB)诱发的测试耳DPOAE在 2、4kHz的幅值与给声前相比有显著减小 ,潜伏期也显著延长 ;③A组用药后 ,对侧耳给声对测试耳DPOAE幅值和潜伏期均无显著影响。结论 潜伏期亦是对侧抑制研究中的敏感指标。
- 孔维佳杨盈章巍
- 关键词：自发性耳声发射听力耳声发射DPOAE
- 人工耳蜗植入术后植入电极的影像学检查被引量：17
- 2004年
- 目的 探讨建立螺旋CT扫描及三维重建技术观察人工耳蜗植入电极方法 ,并比较X线摄片方法与螺旋CT扫描三维重建方法的耳蜗内电极的影像学特征及其临床应用价值。方法 18例人工耳蜗植入患者全部作术后X线摄片检查。其中 9例用经眼眶前后位摄片 ,9例采用侧斜位 6 0°摄片。 3例患者施行术后螺旋CT扫描及内耳三维重建方法。结果 2种投射头位的X线摄片均可显示电极形态及单个电极对 ,可间接判断电极在耳蜗内的植入深度。螺旋CT扫描三维重建图可直观地显示耳蜗形态、电极形态及其在耳蜗内植入的深度 ,可清晰识别单个电极对。结论 螺旋CT扫描三维重建方法可直观观察植入电极的形态及位置 ,可准确判断电极在耳蜗内植入的深度 。
- 孔维佳马辉韩萍乐建新熊新高朱立新戴陈凯
- 关键词：人工耳蜗植入术后电极植入影像学检查
- 线粒体DNA突变与非综合征感音神经性聋被引量：15
- 2002年
- 目的 分析非综合征感音神经性聋 (non syndromicsensorineuralhearingloss,NSSNHL)患者及听力正常者中 3种线粒体DNA(mitochondrialDNA ,mtDNA)突变的发生频率 ,探寻mtDNA突变在NSSNHL发病中的可能作用。方法 收集年龄从 3～ 84岁的 6 1例散发的NSSNHL病例 ,6～ 6 8岁的 19例听力正常人外周血 ,提取白细胞DNA ,结合应用中断法聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)及引物交换PCR方法检测mtDNA4 977缺失 ,应用PCR方法及限制性片段长度多态性分析检测mtDNA1555A→G和mtDNA3 2 4 3A→G点突变 ,PCR产物以全自动激光荧光测序仪做序列分析。结果 ①耳聋组及对照组的mtDNA4 977缺失检出率 (缺失例数 /总例数 )分别为 6 8 85 % (4 2 / 6 1)及 5 2 6 % (1/ 19) ;②所有样本均未检出mtDNA1555A→G及mtDNA3 2 4 3A→G点突变。结论 NSSNHL组mtDNA4 977缺失发生频率明显高于听力正常组 ,提示mtDNA4 977缺失可能是NSSNHL患者发病的一个重要的作用因素 ;mtDNA1555A→G点突变、mtDNA3 2 4
- 孔维佳王琼郑晓敏程华茂
- 关键词：感音神经性聋DNA突变分析点突变听觉丧失感音神经性
