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内耳病的基因治疗: 2005年; 介绍基因治疗应用于耳蜗的历史,就基因转导载体、耳蜗基因治疗效果和载体导入路径等方面研究成果进行综述和评价,并探讨今后耳蜗基因治疗的发展方向。; 徐延军翟所强; 关键词：基因治疗耳蜗耳病内耳基因转导

碱性成纤维细胞生长因子治疗爆震性聋机制的探讨被引量：6: 2003年; 探讨成纤维细胞生长因子治疗爆震性聋的机制 ,为临床合理用药提供理论依据。爆震豚鼠后 ,一组在耳蜗底回钻孔 ,耳蜗内灌注碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) ,另一组动物肌肉注射bFGF ,观察对听神经复合动作电位 (CAP)及听性脑干诱发电位 (ABR)阈值的影响 ;行耳蜗琥珀酸脱氢酶组织化学染色和耳蜗铺片 ,验证bFGF对爆震性聋的疗效。同时观察12 5I标记的bFGF能否透过血迷路屏障。结果发现 ,震后耳蜗内灌注bFGF、肌肉注射bFGF对听阈恢复均有促进作用。但肌肉注射bFGF很难透过血迷路屏障进入内耳 ,推测其作用是间接的 ,可能是通过体内的神经免疫网络对耳蜗起作用。; 翟所强杨伟炎; 关键词：爆震伤放射免疫测定

经完整圆窗膜途径EGFP基因在大鼠耳蜗中的表达被引量：2: 2004年; 目的　研究经完整圆窗膜途径进行耳蜗基因转导的可行性及安全性 ,为内耳基因治疗提供实验基础和理论依据。方法　 2 4只SD大鼠术前及术后分别行听性脑干反应 (ABR)检查。实验组 ( 18只 )用阳离子脂质体携带的增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)基因 ,对照组 ( 6只 )用生理盐水 ,注入置于圆窗龛处的明胶海绵内。分别于术后 3、7、14天取双侧耳蜗标本做基底膜铺片观察。结果　于圆窗龛处放置明胶海绵的转导方法对听力无明显影响。转染耳蜗呈明显的绿色荧光。 3天组表达产物最高 ,7天组逐渐降低 ,14天组更弱。对侧及对照组耳蜗均未见荧光表达。结论　于圆窗龛处放置明胶海绵进行基因转导的方法对听力没有影响 ,且能够成功转染耳蜗组织。; 程小华胡吟燕李建雄郭维翟所强; 关键词：基因转导阳离子脂质体耳蜗基因表达 EGFP基因

bFGF/Math1基因表达载体的构建及在大鼠耳蜗中的表达被引量：11: 2005年; 目的　构建含有碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)和Math1基因的真核共表达载体 ,并用阳离子脂质体包裹将其导入大鼠耳蜗 ,观察其表达情况。方法　应用基因重组技术和限制性内切酶酶切 ,构建并鉴定PRK5 -bFGF -Math1真核共表达载体。经脂质体介导转染大鼠耳蜗后 ,用逆转录 -聚合酶链反应 (reversetranscription -polymerasechainreaction ,RT -PCR)法检测其表达情况。结果　阳性重组子经酶切鉴定含有bFGF和Math1基因 ,RT -PCR结果表明bFGF和Math1在耳蜗中均有表达。结论　本文成功地构建了含有bFGF和Math1基因的真核共表达载体 ,且在哺乳动物耳蜗中均有表达。; 郭维杨仕明翟所强; 关键词：基因表达脂质体碱性成纤维细胞生长因子

TUNEL与碘化丙啶双染检测耳蜗毛细胞的损伤被引量：1: 2006年; 目的应用TUNEL与PI(碘化丙啶)双染法检测耳蜗毛细胞损伤。方法听力正常豚鼠经庆大霉素致聋后,做耳蜗基底膜铺片,用TUNEL与PI双染检测耳蜗毛细胞损伤的情况。结果在核固缩、核碎裂及部分核肿胀的细胞中TUNEL染色为阳性,细胞核正常及部分核肿胀的细胞中TUNEL染色为阴性。所有有核细胞均能被PI染色。结论通过TUNEL与PI双染可以确定TUNEL染色为阳性的细胞为凋亡的细胞,而核肿胀的细胞中TUNEL染色为阴性者可能为胀亡细胞。; 林春招江远仕周序玲翟所强郭维; 关键词：凋亡胀亡耳蜗 TUNEL 碘化丙啶

碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及其在内耳基因治疗中的实验研究被引量：7: 2003年; 目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)双顺反子真核表达载体在豚鼠耳蜗中的表达 ,及噪声损伤后对毛细胞的保护作用。方法　利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES) ,构建人bFGF与增强型绿色荧光蛋白 (enhancegreenfluorescenceprotein ,EGFP)基因真核表达载体pIRES bFGF EGFP。采用硬脂胺 (stearylamine ,SA)脂质体介导bFGF基因转染豚鼠内耳 ,噪声暴露即刻通过圆窗向豚鼠耳蜗注入含有bFGF基因作为治疗基因的真核表达载体 ;或在噪声暴露前 7d ,作为保护因子转导转染豚鼠耳蜗。结果　构建的pIRES bFGF EGFP在转染 2 4h后开始表达 ,48h达到最高 ,表达时间可持续 1个月。治疗组在噪声后听性脑干反应平均阈值均低于噪声组 ,在保护组 :pIRES bFGF EGFP对耳蜗毛细胞有明显的保护作用。结论本研究成功地构建了pIRES bFGF EGFP真核共表达载体 ,具有bFGF、EGFP的双重活性。; 时利董明敏时文杰胡吟燕郭维翟所强杨伟炎; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子真核表达基因治疗内耳疾病

p27^(Kip1)在不同时期大鼠耳蜗大上皮嵴的表达被引量：2: 2005年; 目的观察p27Kip1在不同时期大鼠耳蜗的大上皮嵴中的表达情况,探讨p27Kip1在毛细胞分化和再生过程中的作用。方法对胚胎期12天、13天、14天、16天、18天、20天和出生后当天、2天、5天、7天、10天、14天等12个年龄段的大鼠耳蜗进行冰冻切片,然后以1:100抗p27Kip1小鼠单克隆抗体为一抗,1:200异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG为二抗,进行免疫荧光组织化学检查。结果①胚胎期14天时,p27Kip1开始在蜗管表达,其表达限于原始柯蒂氏器。原始柯蒂氏器中全部细胞均着色。②胚胎期20天左右时,p27Kip1开始在大上皮嵴细胞表达,而在毛细胞中停止表达,但在支持细胞中仍有表达。③出生后7天时,p27Kip1在大上皮嵴的表达达到最强,之后其表达减弱,直至出生后2周时大上皮嵴结构消失。④p27Kip1在耳蜗发育成熟后仍在支持细胞中表达。结论p27Kip1可以作为听感觉上皮的一个标记物。p27Kip1在大上皮嵴细胞中表达,对正常数目毛细胞的产生和耳蜗嵌合体的形成有重要作用。p27Kip1在支持细胞中长期表达是哺乳类毛细胞不能再生的原因之一。; 汪学勇胡吟燕翟所强; 关键词：P27^KIP1 上皮耳蜗胚胎期支持细胞

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