国家自然科学基金(30572153)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：黄学锋朱洪波何超毛伟芳朱玉萍更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院南京军区杭州疗养院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Bcl-XL小分子干扰RNA逆转人结肠癌获得性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的耐药被引量：7
- 2008年
- 目的探讨Bcl-XL小分子干扰RNA（siRNA）在逆转人结肠癌细胞获得性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）耐药中的作用。方法以Bcl-XL siRNA转染获得性TRAIL耐药的人结肠癌DLD1-TRAIL／R细胞24h，并用TRAIL蛋白处理，通过细胞计数和流式细胞仪检测细胞的存活率，并通过Western blot法检测各种凋亡相关蛋白的活化情况。结果Bcl-XL siRNA能有效下调DLD1-TRAIL／R细胞中Bcl-XL蛋白的表达水平，并且能够有效地逆转其对TRAIL蛋白的耐药。DLDl-TRAIL／R细胞经过Bcl-XLsiRNA和TRAIL蛋白共同处理2h后，其细胞凋亡率〉50％；共同处理4h后，其细胞存活率〈40％；而对照组和TRAIL蛋白处理组的细胞凋亡率和生存率无明显变化（P〈0．05）。Western blot法检测结果表明，经Bcl-XL siRNA与TRAIL蛋白联合处理后，DLDl-TRAIL／R细胞中caspase-8、caspase-9、Bid、caspase-3以及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（PARP）均明显活化，细胞色素C的释放显著增加。结论Bcl-XL siRNA能够有效逆转结肠癌细胞获得性TRAIL耐药，这将为治疗肿瘤耐药提供一种新的思路。
- 朱洪波黄学锋胡静姿周玮陈薇陈琳琳何超
- 关键词：BCL-XL小分子干扰RNA耐药
- Bcl-XL siRNA在TRAIL杀伤卵巢癌细胞中的增敏作用被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨Bcl-XL siRNA在肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)杀伤卵巢癌细胞中的增敏作用。方法:用Bcl-XL siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,然后联合应用TRAIL蛋白处理该细胞;通过流式细胞术检测细胞的凋亡率,通过锥虫蓝染色细胞计数检测细胞存活情况,通过Western blotting检测细胞中各种凋亡相关蛋白的活化情况。结果:与对照组相比,经Bcl-XL siRNA处理后,SKOV3细胞中Bcl-XL蛋白的表达显著降低;该细胞的增殖受到明显抑制,在处理96 h后最为明显,仅为对照组的43.9%(P<0.05)。当Bcl-XL siRNA和TRAIL蛋白联合处理后,SKOV3细胞的凋亡率明显增加,达到32%以上(P<0.05),而细胞计数结果显示联合处理后SKOV3细胞的存活率显著下降,仅为对照组的37.8%(P<0.05)。Western blotting结果显示,Bcl-XL siRNA和TRAIL蛋白联合处理后凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9、Bid、Caspase-3和PARP明显活化,细胞色素C的释放也显著增加。结论:Bcl-XL siRNA能显著加强TRAIL蛋白对卵巢癌细胞的杀伤作用,其作用机制可能与激活多种凋亡信号蛋白有关。Bcl-XL siRNA可能成为逆转卵巢癌TRAIL耐药的治疗措施。
- 胡静姿朱洪波黄学锋何超
- 关键词：BCL-XLSIRNA卵巢癌细胞凋亡
- Bcl-XL小分子干扰RNA在结肠癌氟尿嘧啶耐药细胞中的治疗作用被引量：7
- 2006年
- 近年来以5-氟尿嘧啶（5-FU）为基础的辅助化疗有效地改善了结肠癌患者的预后,但是不断出现的耐药问题严重影响了其应有的疗效,研究显示5-FU耐药的肿瘤细胞中存在Bcl-2家族蛋白,特别是抗凋亡蛋白Bcl-XL表达的增加,这提示Bcl-XL对于耐药肿瘤细胞的存活起着关键的作用,可能是一个潜在的抗肿瘤靶点.因此我们利用靶向Bcl-XL的小分子干扰RNA（siRNA）特异性下调Bcl-XL蛋白,观察其对细胞生长的影响,并探讨Bcl-XL siRNA治疗结肠癌5-FU耐药细胞的作用.
- 朱洪波朱玉萍黄学锋何超毛伟芳
- 关键词：BCL-XL表达耐药细胞结肠癌小分子BCL-XL蛋白耐药肿瘤细胞
- 结肠癌TRAIL耐药细胞株的建立及其耐药机制的初步研究被引量：1
- 2006年
- 背景与目的以人结肠癌DLD1细胞株为载体,探讨恶性肿瘤获得性TRAIL基因耐药的可能机制。材料与方法用重组腺病毒介导的TRAIL基因(Ad/gTRAIL)反复处理人结肠癌DLD1细胞,得到耐药细胞群DLD1-TRAIL/R。通过MTT比色法和蛋白电泳,检测耐药细胞对Ad/gTRAIL杀伤作用的敏感性及其凋亡通路中信号分子的表达情况,分析其获得性耐药的可能机制。结果DLD1-TRAIL/R细胞对Ad/gTRAIL和重组TRAIL蛋白处理耐药,但对腺病毒介导的Bax基因处理仍然敏感。耐药细胞内Bcl-XL的表达明显升高,caspase-8的表达显著下降,未见明显的caspase-8活性裂解形式。结论人结肠癌DLD1细胞株经Ad/gTRAIL反复处理后产生特异性针对TRAIL基因的耐药,其发生机制可能与Bcl-XL表达上调和caspase-8表达下调有关。
- 陈琳琳朱玉萍宋章法黄学锋毛伟芳
- 关键词：TRAIL基因治疗耐药
