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辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2008161)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
段梦夕
袁宏
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相关机构:
大连医科大学附属第一医院
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发文基金:
辽宁省教育厅高等学校科学研究项目
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相关领域:
生物学
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段梦夕
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年份
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2010
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RNA干扰沉寂Bcl—xL基因对肝癌细胞HepG-2生物学行为的影响
被引量:1
2010年
目的利用短发夹RNA(shRNA)在肝癌HepG-2细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制Bcl—xL基因表达,探讨对肝癌细胞HepG-2生长和凋亡的影响。方法构建Bcl—xL靶向的shRNA,用脂质体Lipofectamine^TM2000转染入肝癌细胞HepG-2。经RT—PCR和流式细胞术分别检测shRNA对Bcl—xL mRNA和蛋白水平的抑制效应,采用MTT,TUNEL等技术检测shRNA处理前后细胞生物学行为的变化。结果与未转染组相比,shRNA能够有效的抑制Bcl—xL基因表达,mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为86.6%和70.2%;肝癌细胞生长明显减慢,转染对照组(HepG-2hk)和未转染组(HepG-2-w)细胞的生长曲线较为接近,说明转染非特异性shRNA后的细胞增殖特性未受到影响(P〉0.05);而转染组的细胞(HepG-2-si)增殖曲线位于前两者的下方,细胞增殖特性发生明显改变,差异有统计学意艾(P〈0.05);凋亡明显增加,HepG-2-si组细胞每视野凋亡数为15.0±1.1,HepG-2-w,HepG-2hk组细胞凋亡数分别为1.7±1.0和3.2±1.2。HepG-2-si与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异具有统计学显著性意义(P〈0.01),而HepG-2hk组与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异无统计学显著性意义(P〉0.05)。结论RNAi在体外明显抑制了肝癌细胞中Bcl—xL基因的表达和肿瘤细胞增殖,这种抑制作用是通过细胞凋亡增加实现的,为开辟Bcl—xL靶向的RNA干扰治疗肝癌提供实验基础。
段梦夕
袁宏
关键词:
RNA干扰
肝癌
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