国家自然科学基金(30270865) 作品数:9 被引量:76 H指数:5 相关作者: 王源超 郑小波 张正光 刘西莉 刘鹏飞 更多>> 相关机构: 南京农业大学 中国农业大学 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
6种染色方法对黄瓜霜霉病菌不同发育阶段的染色效果比较 被引量:20 2006年 比较了Calcofluor、苯胺蓝、荧光素钠3种荧光染色方法和曲利苯兰酒精-乳酚酸、考马斯亮兰和苯胺蓝组织透明染色法对黄瓜霜霉病菌不同生长发育阶段的染色效果。结果表明,在一定的染液浓度和pH值条件下,3种荧光染色方法均可进行孢子囊、休止孢、芽管、附着胞、孢囊梗等寄主组织外部菌体的原位染色,其中Calcofluor染色方法更稳定、简捷和易于观察。曲利苯兰组织透明染色法能观察黄瓜霜霉病菌的整个生长发育阶段,但该法更适宜胞间菌丝及吸器的染色。 朱书生 刘西莉 刘鹏飞 范洁茹 袁善奎关键词:荧光染色 组织学观察 疫霉蛋白激发子PB90对病原菌生长与致病力的影响 被引量:2 2005年 激发子PB90是由棉疫病菌分泌的可诱发非寄主植物系统获得抗病性的一类新型蛋白激发子。本文就该激发子在棉疫病菌生长发育及致病过程中的作用进行了研究。采用胶体金标记发现该激发子主要分布在棉疫病菌的细胞壁上,该激发子可以分泌到细胞外;在离体条件下,PB90的多克隆抗体并不抑制棉疫病菌游动孢子的萌发和孢子萌发后形成菌落的能力,而且抗体包埋的游动孢子仍能激发非寄主植物烟草的过敏性坏死反应;但是,抗体的包埋处理可以使棉疫病菌的游动孢子丧失对棉花的致病力。结果表明,特异性存在于细胞壁上的疫霉蛋白激发子PB90是棉疫病菌的一种重要的毒性因子,在病菌对棉花的致病过程中具有重要作用;此外本研究结果还提示PB90并不是惟一能诱导非寄主烟草过敏性反应的棉疫病菌激发子,除了PB90之外,棉疫病菌还能产生其它的激发子诱导烟草的过敏性坏死反应。 张正光 王源超 郑小波关键词:棉疫病菌 棉花 H_2O_2 参与棉疫病菌90kD蛋白激发子诱导的烟草过敏反应和系统获得抗性 被引量:17 2003年 野生型烟草Bel W3叶片经棉疫病菌 90kD蛋白激发子处理后 ,处理叶及其上位叶在 2 4h内均发生 2次氧化迸发产生H2 O2 ,且第二次H2 O2 迸发高峰期同时出现 ,均出现在第 12小时 ,处理部位细胞死亡高峰期比第二次H2 O2 迸发高峰期滞后 8h。引起过敏反应剂量的激发子诱发反义抑制抗坏血酸过氧化物酶anti APX烟草的过敏性坏死枯斑比野生型的大而且出现得早 ;不能诱发野生型烟草HR的剂量可以诱导anti APX烟草发生HR。经激发子处理后anti APX烟草对烟草疫霉 (Phytophthoranicotianae)和TMV产生的诱导抗性比其野生型高。上述结果表明 ,H2 O2 可能是一种重要的信号分子 ,在棉疫病菌 90kD蛋白激发子诱发烟草的HR和SAR中具有重要作用 ,但可能不是一种可以系统移动的信号分子。 王源超 张正光 李俊 安成才 陈章良 郑小波关键词:激发子 过敏反应 过氧化氢 系统获得抗性 烟草 植物对卵菌的非寄主抗病性 被引量:1 2003年 张正光 王源超 郑小波关键词:植物 卵菌 寄主 疫霉 非寄主抗性 系统进化 不同寄主来源寄生疫霉菌株的遗传变异分析 被引量:11 2003年 从 30 0条RAPD随机引物中筛选出扩增多态性丰富的 13条引物 ,对寄主来源不同的 2 9个寄生疫霉 (Phy tophthoraparasitica)菌株进行基因组DNA遗传变异分析。用筛选出的 13条引物对供试菌株进行RAPD PCR扩增 ,共产生 139条RAPD条带 ,其中 133条为多态性条带 ,多态检测率为 95 .7%。利用PopGeneVersion 1.31软件对供试菌株间的遗传距离进行聚类分析并构建系统树状图 ,供试 2 9个菌株被划分为 5个遗传聚类组 ,不同菌株间具有丰富的遗传变异。其中寄主为烟草 (Nicotianaspp .)、腊梅 (Chimonanthuspraecox)、凤尾兰 (Yuccagloriosa)和西番莲 (Passifloraedulis)的菌株的遗传结构与其寄主来源具有明显的相关性 ,而寄主为刺槐 (Sophorachinensis)和番茄 (Lycopersicumesculentum)的菌株与其寄主来源的相关性较小 ,来源于不同寄主植物的菌株之间遗传距离较远。结果提示在寄生疫霉与其不同寄主植物的长期协同进化过程中 。 申贵 王源超 郑小波关键词:寄主 寄生疫霉 协同进化 植物病原菌 疫霉菌激发子PB90诱导烟草悬浮细胞的凋亡 被引量:6 2005年 激发子 PB90 是疫霉菌(Phytophthora boehmeriae)分泌的一种分子量为90 kD 的胞外蛋白激发子,该激发子可以诱导非寄主植物烟草的过敏反应和系统获得抗性. BY-2烟草悬浮细胞经该激发子PB90处理后, Trypan blue 染色观察到细胞死亡, 这种死亡可被蛋白质合成抑制剂 Cycloheximide 抑制, 表明这种细胞死亡是主动死亡过程. 提取 PB90 处理的悬浮细胞的 DNA 进行琼脂糖凝胶电泳观察到 DNALadder 现象, 表明核小体间的 DNA 发生了断裂; 对经 PB90 分别处理 4 和 12 h 的烟草悬浮细胞进行TUNEL 染色, 观察到较强的阳性信号, 进一步表明其细胞核内发生了 DNA 末端断裂; 同时结合 DAPI染色观察到经 PB90 处理后的细胞染色质凝集、细胞核解体形成凋亡小体等细胞凋亡的形态学特征. 上述结果表明激发子 PB90 可以诱导 BY-2 烟草悬浮细胞发生细胞凋亡, 提示该激发子诱导的过敏反应是一个细胞凋亡过程. 纪睿 张正光 王源超 郑小波关键词:细胞凋亡 TUNEL 新型杀菌剂氟吗啉对黄瓜疫霉病菌细胞壁主要组分合成及分布的影响 被引量:3 2007年 应用同位素示踪和组织特异性荧光染色等生物化学方法研究了新型杀菌剂氟吗啉对黄瓜疫霉病菌细胞壁主要组分合成及分布的影响.结果表明,氟吗啉对细胞壁的主要组成物质纤维素和非纤维素葡聚糖的合成没有抑制作用,但破坏细胞壁物质在菌丝正确位置的形成和分布,扰乱菌丝的极性生长. 朱书生 刘西莉 刘鹏飞 李健强 司乃国 王慧敏关键词:氟吗啉 细胞极性 同位素示踪 荧光增白剂 黄瓜霜霉病菌抗氟吗啉菌株的适合度研究 被引量:12 2005年 采用离体叶盘法和活体植株法,测定了从田间分离获得的对氟吗啉具有抗药性的黄瓜霜霉病菌菌株和通过室内紫 外线诱变获得的对氟吗啉及对照药剂烯酰吗啉和嘧菌酯产生抗药性的突变菌株的生存适合度。试验结果表明,室内诱导 获得的氟吗啉和烯酰吗啉抗药性突变菌株的适合度明显低于敏感菌株和嘧菌酯抗药性突变体及田产氟吗啉抗药性菌株, 主要表现在菌株的侵染率、产孢能力和致病力的减弱。室内获得的氟吗啉和烯酰吗啉抗药性突变体和敏感菌株混合接种、 继代培养后,其抗药菌株的检出率在混合群体中逐渐降低,其中抗性突变体FR4和敏感菌株以2:8的比例混合接种、培养 7代后,其无性后代中检测不到抗药性菌株的存在,表明室内氟吗啉抗药性突变体竞争力弱于敏感菌株;而田间氟吗啉抗药 性菌株和室内嘧菌酯抗药性突变体则表现出和敏感菌株相似或更强的竞争力,预示田间自然情况下抗药性菌株存在着可 能形成优势菌群而导致药剂防治失败的潜在风险。 朱书生 王岩 刘鹏飞 袁善奎 刘西莉 姜辉 刘亮关键词:黄瓜霜霉病菌 适合度 竞争力 Phytophthora elicitor PB90 induced apoptosis in suspension cultures of tobacco 被引量:5 2005年 The protein elicitor PB90 secreted by Phytophthora boehmeriae is an efficient elicitor inducing the hypersensitive response and systemic acquired resistance in tobacco plants. Here, we observed cell death in suspension-cultured cells of Nicotiana tabacum BY-2 with PB90 treatment using Trypan blue staining method. And this cell death could be suppressed by cycloheximide, an inhibitor of proteins synthesis, which implies that PB90-induced cell death was an active cell death process requiring new protein synthesis. DAPI staining revealed that PB90 induce rapid chromatin condensation, margination, apoptotic bodies' formation and DNA laddering, further TUNEL assay also observed the specific breakage of 3′-OH ends. All of the above common morphological characteristics indicated that PB90 induced apoptosis in suspension cultures of tobacco, suggesting that hypersensitive response induced by PB90 is an apoptotic process. JIRui ZHANGZhengguang WANGYuanchao ZHENGXiaobo关键词:植物 染色质 植物学 形态学