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上海市科委科技攻关项目(05DZ19317)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
潘卫
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蒋少华
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2007
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进化免疫球蛋白结合分子LD5的原核表达、纯化及结合活性
被引量:1
2007年
目的对新型进化免疫球蛋白(Ig)结合分子LD5进行原核表达和纯化,并鉴定其结合活性。方法将LD5基因片段克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌后,IPTG诱导表达。以8mol/L尿素裂解菌体后,上清经Ni2+-NTA柱纯化,并对纯化蛋白进行SDS-PAGE及Western blot分析。以ELISA和Dot blot对LD5蛋白结合IgG、IgM活性进行鉴定。结果LD5分子在大肠杆菌中获得成功表达,表达的融合蛋白相对分子质量为59000。Western blot表明纯化的LD5蛋白能特异结合IgG。ELISA结果显示,LD5在结合IgM上较SpA具有明显的优势。结论LD5分子在大肠杆菌中已成功表达,纯化的LD5蛋白保留了天然Ig结合分子的结合活性。
蒋少华
徐容
何俊
陈璐
卢海妹
贾建安
陈秋莉
潘卫
关键词:
原核表达
结合活性
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