四川省青年科技基金(2007Q14-034)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
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- 四川草科鸡IL-15 cDNA的克隆与序列分析被引量：2
- 2008年
- 根据GenBank上登录的鸡白介素15(IL-15)基因序列,设计合成一对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增,并克隆到pMD18-T载体测序。测序结果表明,四川草科鸡IL-15开放阅读框(ORF)由564个核苷酸组成,编码187个氨基酸,与GenBank中公布的鸡白介素15基因进行比较,核苷酸和氨基酸同源性为98.6%～99.5%。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白具有亲水性,有很强的抗原性,共有3个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。
- 刘蕊娜邹年莉王红宁柳萍黄勇
- 关键词：白细胞介素-15基因克隆
- 新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞中免疫相关细胞因子表达的检测被引量：4
- 2009年
- 分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株LaSota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量。实验结果表明,在鸡胚成纤维细胞中,无论是否感染新城疫病毒,IL-2、IL-3、IL-4、IL-21不能检测到其相应条带。通过统计学分析,IFN-β、IFN-γ、IL-9、IL-12-P35、IL-12-P40在病毒感染组与对照组间呈现出显著的差异,而强毒感染组与弱毒感染组的比较中,仅IFNγ、IL-9表现出显著差异。
- 刘温泉王远萍邹年莉柳萍黄勇
- 关键词：鸡胚成纤维细胞LA
- 鸡IL-6真核表达载体的构建及其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用研究被引量：9
- 2009年
- 利用RT-PCR方法从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞RNA中扩增出IL-6基因,与pCI-neo连接构建真核表达质粒pCI-IL-6,并研究pCI-IL-6在CEF细胞中的表达及其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用。研究发现,pCI-IL-6在CEF细胞中得到表达,pCI-IL-6和LaSota疫苗联合免疫组HI抗体、CD4+、CD8+和CD3+T淋巴细胞百分含量从免疫后第14天起均高于LaSota疫苗单独免疫组。其中,HI抗体效价在第14、21和35天时差异显著(P<0.05),在第28天时差异极显著(P<0.01);CD4+、CD8+和CD3+T淋巴细胞百分含量在第14天后表现为差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。在免疫后第35天进行攻毒,pCI-IL-6和LaSota疫苗联合免疫组的保护率为89.5%,而LaSota疫苗单独免疫组的保护率为76.5%。结果表明,pCI-IL-6真核表达质粒在鸡体内成功表达,并能明显提高新城疫LaSota疫苗的免疫效果,具有免疫增强作用。
- 刘蕊娜邹年莉王红宁柳萍黄勇
- 关键词：鸡白细胞介素-6真核表达载体免疫效果
