上海市自然科学基金(04ZR14089)
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- 牛分枝杆菌Mb1761c蛋白的表达及其免疫原性初步研究
- 2008年
- 根据GenBank提供的M.bovis Mb1761c基因序列设计引物。以牛分枝杆菌DNA为模板,通过PCR方法扩增出牛分枝杆菌MB1761c基因片段,以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切PCR产物和pET28a(+)后将纯化的Mb1761c基因克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒,再转化到E.coli BL21(DE3)表达菌株中,IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE,分析可见约29ku特异性蛋白条带,Western blot分析发现,该融合蛋白具有较强的免疫原性,从而为进一步研究其亚单位疫苗及DNA疫苗奠定了基础。
- 刘芳严懿嘉朱建国华修国高谦
- 关键词：牛分枝杆菌分泌蛋白
- 牛分枝杆菌Mb2277蛋白的表达及其反应原性初步研究
- 牛结核病主要是由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis,MTB)引起的一种人兽共患传染病,严重危害人类的健康和畜牧业的发展。为了发掘用于牛分枝杆菌检测的特异性蛋白分子,本研究利用生物信息学手段从数据库中筛选到...
- 刘芳朱建国华修国高谦严懿嘉杨志彪
- 关键词：牛分枝杆菌分泌蛋白
- 文献传递
- 牛分枝杆菌Mb2277蛋白的表达及其反应原性初步研究
- 2010年
- 目的构建牛分枝杆菌Mb2277基因的原核表达载体,获得高纯度的融合表达蛋白,并对其表达产物的免疫原性进行初步研究。方法根据GenBank提供的M.bovisMb2277基因序列设计引物。以牛分枝杆菌(93006)DNA为模板,通过PCR方法扩增出Mb2277基因片段,以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切PCR产物和pET28a(+),后将纯化的Mb2277基因克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒,再转化到E.coliBL21(DE3)表达菌株中,IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE,进一步利用Western Blot对表达产物的反应原性进行研究。结果获得了牛结核分枝杆菌Mb2277原核表达质粒,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约25ku蛋白表达条带,Western Blot结果显示,表达产物与兔抗分枝杆菌抗体具有反应性。结论该蛋白具有较强的反应原性。
- 刘芳朱建国华修国高谦严懿嘉
- 关键词：牛分枝杆菌分泌蛋白
