上海市教育委员会创新基金(08YZ39)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
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- 人卵巢癌相关抗原OVA66的B细胞表位预测被引量：6
- 2009年
- 目的:预测人卵巢癌相关抗原OVA66的B细胞表位。方法:B细胞表位预测,以单参数(亲水性、可及性、柔韧性、极性)预测为基础,结合ABCpred预测结果,并经二级结构预测筛选等综合分析。结果:OVA66的B细胞表位可能位于209-216,266-275,294-301,362-368和391-396氨基酸残基的区域内或附近。结论:该结果对应用合成肽抗原进行肿瘤患者的早期诊断研究具有重要指导意义。
- 刘争春王颖王树军张惠珍荣婷婷王庆飞谢国化葛海良
- 关键词：表位B淋巴细胞抗原肿瘤相关
- 肿瘤相关线粒体蛋白12对肝癌细胞凋亡的抑制作用
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤相关线粒体蛋白12(TAMP12)对肿瘤细胞凋亡的抑制作用。方法:(1)构建重组逆转录病毒表达载体并转染包装细胞PA317,将获得的病毒颗粒感染TAMP12低表达的肝癌细胞株HepG2。应用RT-PCR检测TAMP12 mRNA表达变化;激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察双色荧光标记蛋白的亚细胞定位和定量表达。(2)应用Hoechst 33258染色和FACS检测5-氟尿嘧啶(5-FU)处理后对诱导HepG2细胞凋亡的影响。结果:(1)CLSM检测显示TAMP12主要表达于HepG2细胞线粒体中。转染细胞中TAMP12基因和蛋白呈稳定高表达。(2)5-FU诱导细胞发生凋亡后,转染细胞的核形态较为完整,但对照细胞的染色质发生凝聚、边缘化、核固缩;且FACS检测显示转染细胞的凋亡率显著低于对照细胞(P<0.05或P<0.01)。结论:TAMP12具有抑制肝癌细胞凋亡的作用。
- 金姝王俐王颖谢国化陈惠娟王树军张惠珍张勇葛瑜葛海良
- 关键词：线粒体逆转录病毒载体HEPG2细胞氟尿嘧啶细胞凋亡
- 肿瘤相关抗原OVA66单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:制备和鉴定人卵巢癌cDNA文库筛选到的肿瘤相关抗原OVA66的单克隆抗体,为研究其生物学功能提供手段。方法:采用基因重组方法构建pET32b-OVA66重组表达质粒,经大肠杆菌诱导表达OVA66融合蛋白,利用Ni-TED亲和层析技术分离纯化His-OVA66融合蛋白;采用经典的杂交瘤技术制备OVA66单克隆抗体;ELISA和Western blotting鉴定单克隆抗体的生物学和免疫学特性,并对OVA66单克隆抗体在细胞免疫荧光法、流式细胞术和免疫组化等方法中进行了初步应用。结果:成功构建重组表达载体pET32b-OVA66,并诱导表达和纯化OVA66融合蛋白。制备获得两株小鼠OVA66单克隆抗体杂交廇细胞株5F4和4G9。两株细胞分泌的抗体亚类均为IgG1,轻链为κ型,亲和力常数Ka分别为2.96×1010和0.4×1010L/mol,初步表位分析结果显示两者针对不同的抗原表位;两株抗体均可以采用细胞免疫荧光和流式细胞术检测OVA66的表达,5F4还可通过免疫组织化学检测肿瘤组织中OVA66的表达。结论:成功制备两株特异性的小鼠OVA66单克隆抗体杂交瘤细胞株,为进一步研究OVA66的生物学特性和临床应用奠定了基础。
- 荣婷婷陈惠娟张惠珍刘争春张勇王树军王颖葛海良
- 关键词：肿瘤相关抗原OVA66单克隆抗体原核表达蛋白纯化ELISA
- 亲环素A在肿瘤研究中的进展
- 2009年
- 亲环素A（CypA）广泛存在于多种组织和细胞，具有肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIase）活性，最早发现其为免疫抑制剂环孢素A的细胞内受体。CypA在一系列生物学过程中发挥重要功能，如蛋白折叠、免疫抑制、与CD147相互作用以及细胞凋亡等。近年来的研究发现，CypA与一些肿瘤的发生发展存在密切的联系，特别是与肺癌、胰腺癌和肝癌等。进一步深入研究CypA在肿瘤生物学中的作用与分子机制具有重要意义，有可能成为肿瘤研究中一个新的关注点。
- 王庆飞王福庆葛海良
- 关键词：肿瘤亲环素A环孢素ACD147细胞凋亡
