国家自然科学基金(30860030)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 相关作者：李国婧王瑞刚邹博李瑞丽万东莉更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学兰州大学中国农业科学院草原研究所更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 拟南芥钙调素结合蛋白基因启动子的克隆及表达被引量：2
- 2012年
- 采用PCR技术从拟南芥中克隆了SCBP60g基因的启动子,并与GUS报告基因融合构建重组表达载体,转化野生型拟南芥,对获得的转基因株系进行GUS组织染色,从基因调控水平上探讨其在功能方面的差异。结果显示:SCBP60g基因的启动子能指导GUS报告基因在拟南芥的根、茎、叶和花中表达,并且在这些部位的维管束表达较强。这种表达方式与LCBP60g基因的启动子指导的GUS基因组织化学染色有差异,表明这个启动子的表达调控具有一定的特异性。
- 万东莉李瑞丽邹博高阳万永青王瑞刚李国婧
- 关键词：拟南芥启动子钙调素结合蛋白GUS报告基因
- 拟南芥钙调素结合蛋白参与胁迫响应的研究(英文)
- 2012年
- 采用实时荧光定量RT-PCR和Northern blotting技术检测了野生型拟南芥中CBP60g基因对丁香假单胞菌和非生物胁迫的响应,并对丁香假单胞菌接种后,野生型拟南芥、cbp60g-1突变体和CBP60g过表达转基因植物中抗逆相关基因的表达变化进行检测。结果显示:(1)在野生型拟南芥中CBP60g基因的表达能被丁香假单胞菌、高盐、冷和机械损伤所诱导。(2)经丁香假单胞菌诱导后病程相关基因PR5和AIG1的表达在过表达转基因植物中明显高于野生型。(3)受干旱和ABA诱导的AtMYB2基因的表达在过表达转基因植物中也高于野生型。研究表明,CBP60g同时参与了拟南芥对生物和非生物胁迫响应。
- 万东莉丛靖宇李瑞丽邹博王瑞刚李国婧
- 关键词：拟南芥钙调素结合蛋白胁迫
- 拟南芥类受体蛋白激酶基因CRK45对外源钙离子的响应
- 2012年
- 以拟南芥野生型和类受体蛋白激酶基因CRK45的T-DNA插入突变体crk45为材料,采用差异基因表达筛选技术检测ABA处理后野生型和crk45中基因表达的差异。结果显示:(1)crk45突变体中有1个基因的表达比野生型高约4倍。(2)NCBI数据库检索表明,该基因编码的蛋白具有EF手型结构,蛋白序列全长为130个氨基酸,是典型的Ca2+结合蛋白,故命名为CRK45抑制的钙离子结合蛋白(CICBP)。(3)Northern blotting分析结果显示,ABA处理后crk45突变体中CICBP的表达明显升高,证明CICBP基因的确受ABA诱导,且其表达受CRK45的抑制。(4)外源75mmol/L的Ca2+处理后,crk45突变体的萌发率(30.8%)显著高于野生型(17.16%),说明在Ca2+介导下CRK45的功能是抑制种子萌发。(5)qRT-PCR检测显示,野生型中CRK45的表达受Ca2+诱导明显升高,而crk45突变体中的表达一直保持很低,说明crk45突变体是一个基因敲除突变体;Ca2+处理后crk45突变体中CICBP基因表达上调,而野生型中CICBP的表达反而降低,说明Ca2+处理下CRK45抑制CICBP基因的表达。研究表明,ABA或Ca2+处理后,CRK45通过负调控CICBP基因的表达,从而抑制拟南芥种子萌发。
- 张秀娟杨冠宇石蕊韩晓敏王瑞刚李国婧
- 关键词：拟南芥钙离子
- 拟南芥SCBP60g蛋白的亚细胞定位及其功能研究
- 2013年
- 为了研究SCBP60g的功能,研究利用Gateway克隆技术构建了GFP报告基因与拟南芥SCBP60g基因融合表达载体和基因功能互补表达载体并获得了转基因植物,通过激光共聚焦显微镜观察了SCBP60g蛋白的亚细胞定位情况,利用活体细菌生长量检测实验研究了SCBP60g蛋白在抗病中的功能;同时构建了SCBP60g过表达载体并检测了转基因植物对ABA的响应情况。结果显示,SCBP60g定位于细胞核;SCBP60g基因不能恢复CBP60g基因突变体对丁香假单胞菌的敏感性;过量表达SCBP60g基因不影响拟南芥对ABA的敏感性。表明SCBP60g没有参与拟南芥的抗病防御反应以及对ABA的响应。
- 万永青李瑞丽邹博万东莉王瑞刚李国婧
- 关键词：拟南芥钙调素结合蛋白亚细胞定位抗病性
