河北省教育厅自然科学基金(2001240)
- 作品数：6 被引量：23H指数：4
- 相关作者：赵宝华石振华宋杰柏佳宁边艳青更多>>
- 相关机构：河北师范大学辽宁省益康生物制品厂邢台学院更多>>
- 发文基金：河北省教育厅自然科学基金河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 表达ST1-LTB-α-β融合蛋白基因工程菌株的构建及其免疫原性分析被引量：3
- 2008年
- 采用分子生物学技术构建了含有ST1-LTB-α-β融合基因的重组菌株BL21(DE3)(pETST3LTBαβ),SDS-PAGE和Western blotting分析表明ST1-LTB-α-β融合基因在大肠杆菌中得到了高效表达,融合蛋白分子量约为110kD;20L发酵罐培养得到的最佳诱导条件为:重组菌株以1%接种量、5L/min通气量培养3h后加终浓度为0.03mol/L的乳糖诱导,通气量升至12.5L/min继续培养6h,表达量占菌体总蛋白的38.53%;表达的ST1-LTB-α-β融合蛋白无毒性但具有免疫原性,可以抵抗大肠杆菌和产气荚膜梭菌的感染;构建的重组菌株BL21(DE3)(pETST3LTBαβ)有望作为预防仔猪腹泻基因工程疫苗的候选生产菌株。
- 宋杰钱明明柏佳宁赵宝华
- 关键词：仔猪腹泻保护性抗原基因工程菌株免疫原性
- 不同培养条件对基因工程疫苗菌抗原蛋白表达的影响被引量：4
- 2003年
- 基因工程菌的表达条件研究在现代生物高技术产业化的发展中具有重要的意义 .影响基因工程菌表达的因素主要有 pH值、温度、诱导剂IPTG的浓度、诱导时间等 .笔者分别就以上因素对基因工程菌抗原蛋白表达的影响进行了初步研究 .在摇床培养条件下 ,外源基因表达蛋白的最适表达条件为终浓度 0 .8mmol/L的IPTG ,32℃ ,诱导 6h .
- 石振华边艳青赵宝华
- 关键词：抗原蛋白DNA重组大肠杆菌
- 河北省仔猪黄白痢流行病学调查及致病菌的分离与鉴定被引量：4
- 2007年
- 仔猪黄白痢是危害养猪业的一种常见疾病.通过对河北省不同地区17家猪场的走访调查,探讨仔猪黄白痢大规模爆发的原因和防治对策,并从某猪场发病仔猪的排泄物中分离得到1株菌,经形态学、生物化学和分子生物学实验鉴定,该分离株为革兰氏阴性菌,克氏三糖铁培养产酸产气,LTB与M17873核苷酸序列同源性为100%,该菌株确定为产肠毒素型大肠杆菌.
- 宋杰柏佳宁赵宝华
- 关键词：仔猪黄白痢伤亡率LTB基因同源性
- 不同培养条件对基因工程疫苗菌生长的影响被引量：1
- 2003年
- 基因工程菌的生长条件研究在现代生物高技术产业化的发展中具有重要的意义.影响基因工程菌生长的因素主要有培养基组分、温度、pH值、溶氧量等.笔者分别就以上因素对基因工程疫苗菌株生长的影响进行了研究.结果表明该基因工程菌株的最适生长条件为37℃,进口LB液体培养基,pH8.0,200r/min,50mL锥形瓶装20mL培养基.
- 边艳青崔金钟赵宝华
- 关键词：生长量培养基DNA重组PH值溶氧量
- 致病性鸡大肠杆菌pilA基因和外膜蛋白C基因的克隆、表达及其免疫原性被引量：7
- 2008年
- 根据GenBank公布的致病性鸡大肠杆菌的Ⅰ型菌毛pilA基因和外膜蛋白C基因序列,分别设计了两对引物,并以分离的致病性鸡大肠杆菌基因组为模板,经PCR特异性扩增出pilA基因和ompC基因,基因产物大小为别为549bp和1104bp,与GenBank报道的参考菌株的两个基因序列的同源性为高达98.18%和97.28%。将扩增得到的两个基因分别定向克隆到原核表达载体pET-28a中,得到两个重组质粒pETpilA和pETompC,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,得到重组菌株BL21(pETpilA)和BL21(pETompC),经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析分别可见表达的20kD和40.9kD的特异条带;Westernblotting结果表明,两种蛋白可与抗体发生特异性结合,说明其具有良好的免疫原性。将表达的菌毛蛋白和外膜蛋白的菌株分别制成基因工程疫苗,免疫小鼠后,具有很好的保护能力,表明这两株基因工程菌株有望作为鸡致病性大肠杆菌基因工程疫苗的候选生产菌株。
- 于珊张倩水小溪于宙亮赵宝华
- 关键词：鸡致病性大肠杆菌I型菌毛外膜蛋白免疫原性
- 表达无毒性大肠杆菌ST1-LTB融合蛋白基因工程菌株的构建被引量：4
- 2003年
- 利用基因突变技术 ,将形成ST1分子内二硫键的半胱氨酸碱基进行突变 ,使ST1失去本身毒性 ,进而将其与含有LTB基因的pET_2 8b(+)连接 ,转化至受体菌BL2 1(DE3)中 ,重组菌株BL2 1(DE3) (pXST3LTB)经IPTG诱导后 ,其表达产物免疫的小鼠能够抵抗大肠杆菌强毒菌的攻击并且消除了ST1的毒性 ,表明构建的工程菌株BL2 1(DE3) (pXST3LTB)可作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选菌株。
- 石振华李尚波苏钢赵宝华王文成卫广森许崇波
- 关键词：大肠杆菌融合蛋白免疫原性
