上海市科委重大科技攻关项目(05DZ19326)
- 作品数：6 被引量：47H指数：2
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- pH控制下绿色木霉(Trichoderma viride)流加发酵生产纤维素酶被引量：2
- 2009年
- 绿色木霉(Trichoderma viride)在pH控制发酵条件下,采用流加葡萄糖发酵策略,可显著提高综合滤纸酶活力(FPA)和内切酶(endo-β-1,4-glucanase,EG)、外切酶(exo-β-1,4-glucanase,CBH)、纤维二糖酶(cellobiase,CB)酶活。在5 L发酵罐中采用pH控制和流加葡萄糖工艺,可提高CB酶含量,改变酶组分之间的比例,使得FPA、EG、CB和CBH酶活分别达到50.0 U/mL,210.0U/mL,4.0 U/mL和2.5 U/mL,比摇瓶发酵分别提高了6.7、4.2、19、2.5倍。
- 耿冰郭美锦张嗣良王永红储炬庄英萍
- 关键词：纤维素酶PH控制绿色木霉
- 控制发酵过程氧化还原电位优化酿酒酵母乙醇生产被引量：25
- 2007年
- 利用氧化还原电极,研究了在厌氧条件下将氧化还原电位值(ORP)控制在不同水平(-50mV、-100mV、-150mV、-230mV)对乙醇发酵过程的影响。试验结果表明,不同的ORP值水平对乙醇得率,甘油形成、有机酸分泌、生物量和菌体死亡率的影响有明显的差异。当ORP为-50mV时的生物量是ORP为-100mV时的1.26倍、ORP为-150mV时的1.86倍、ORP为-230mV时的2.59倍,甘油浓度分别是后三者的1.2倍、1.1倍、1.7倍,而乙醇浓度却分别只有后三者的0.87倍、0.49倍、0.51倍。综合考虑生物量、乙醇浓度、甘油产量、残糖的测定结果,表明将ORP控制在-150mV时对乙醇发酵极为有利。说明可以用ORP电极来精确控制厌氧发酵条件,从而为酵母细胞合理分配代谢流以实现乙醇生产最优化的宏观控制提供了一种有效的手段。
- 喻扬王永红储炬庄英萍张嗣良
- 关键词：乙醇有机酸
- pH值对绿色木霉(Trichoderma viride)产纤维素酶的影响被引量：18
- 2008年
- 采用微晶纤维素为唯一诱导性碳源,对绿色木霉(Trichoderma viride)在摇瓶发酵过程中控制与不控制pH产纤维素酶进行比较。控制pH时胞外蛋白浓度为0.72 mg/mL比不控制pH时提高43%;FPA、EG、CB和CBH酶活为15.0U/mL,120.0U/mL,1.75U/mL,0.85U/mL分别是不控制pH时的2.1、2.3、11.7和1.7倍。在不同pH下测定纤维素酶液各酶活,表明pH值显著影响纤维素酶各单酶酶活。在pH2.7时,β-葡萄糖苷酶酶活仅为pH4.8时酶活的4%;pH回调试验结果表明β-葡萄糖苷酶对pH敏感,并在催化功能上发生不可逆变化。对纤维素酶液添加分离得到的各单酶,当添加β-葡萄糖苷酶时最多可以提高FPA酶活20%。因此β-葡萄糖苷酶是影响综合酶活的关键酶。通过拉曼光谱检测出β-葡萄糖苷酶在pH5.0有活性状态下,酶蛋白主链结构主要为α-螺旋和无规则卷曲;在pH2.0没有活性状态下,酶蛋白主链结构的无规则卷曲发生较大变化,α-螺旋也受到一定影响。这说明pH对β-葡萄糖苷酶构象的改变是造成其活性变化的主要原因。
- 耿冰郭美锦张嗣良王永红储炬庄英萍
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶拉曼光谱PH控制纤维素酶
- 金属离子对枯草芽孢杆菌合成肌苷的影响被引量：2
- 2007年
- 通过向摇瓶中添加Mn^(2+),Zn^(2+),Co^(2+),Mo^(2+),Cu^(2+)5种金属离子,考察各种金属离子对肌苷生产菌的生长、葡萄糖的利用以及肌苷积累的影响。初始培养基中添加Mn^(2+)对产苷有促进作用,而Co^(2+)、Zn^(2+)、Mo^(2+)随着浓度的增加有明显的抑制作用。Cu^(2+)能明显抑制菌体的生长,从而抑制肌苷的生成。针对Mn^(2+)对葡萄糖脱氢酶的活力进行了初步的研究,发现添加Mn^(2+)能促进葡萄糖脱氢酶的活力,葡萄糖在葡萄糖脱氢酶的作用下生成葡萄糖酸,增大了HMP途径的通量,放瓶肌苷含量为14.92 g/L,对照组肌苷含量为11.94 g/L,提高25%。
- 郭元昕郝玉有庄英萍储炬
- 关键词：肌苷金属离子枯草芽孢杆菌MN^2+
- 纤维二糖酶在不同pH下的拉曼光谱分析
- 2008年
- 分析了绿色木霉产的纤维二糖酶在pH 5.0和pH 2.0下的拉曼光谱图。实验结果表明:纤维二糖酶在pH 5.0时具有酶活功能,蛋白主链结构主要为α-螺旋和无规则卷曲,侧链中酪氨酸和色氨酸均为"埋藏式";纤维二糖酶在pH 2.0时无酶活,酶蛋白主链结构主要为α-螺旋,而无规则卷曲发生较大变化,铡链中的酪氨酸和色氨酸均为"暴露式"。根据光谱特征分析,该纤维二糖酶中可能不含二硫键。
- 耿冰郭美锦张嗣良王永红储炬
- 关键词：纤维二糖酶激光拉曼光谱分子构象绿色木霉
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质
- 2008年
- 采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析，从重组大肠杆菌DH5α菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶（AfPGA）。经纯化，AfPGA纯度较粗酶提高50．6倍、比活达到212．7U／mg，经HPLC测定纯度为92．8％，收率为78％。理化性质分析表明：AfPGA含有2个亚基（α亚基和β亚基，其Mw分别为2．90×10^4和5．92×10^4；AfPGA等电点约为7．9～8．0，最适pH约为10．0，并在pH〉7．0时表现出了稳定的催化活力。
- 李震储炬庄英萍张嗣良袁中一
- 关键词：粪产碱杆菌青霉素G酰化酶疏水层析分离纯化
