国家自然科学基金(30860097)
- 作品数：12 被引量：20H指数：3
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- 相关机构：新疆医科大学第一附属医院新疆大学更多>>
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- 膜联蛋白A2在食管鳞状细胞癌中的表达及其与浸润转移的关系被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨膜联蛋白A2（Annexin A2）在人食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达变化与浸润转移的关系.方法 收集新疆医科大学第一附属医院2000年至2008年间,手术切除并经病理证实的ESCC组织作为实验组、对应癌旁5cm以上的组织作为对照组;随机选取了ESCC与癌旁配对的22对新鲜组织和175对石蜡包埋组织作为研究对象.应用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qRT-PCR）、蛋白免疫印迹和免疫组织化学的方法,从mRNA和蛋白两个方面检测Annexin A2的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 在22对新鲜ESCC与癌旁组织中,Annexin A2在癌旁组织中的mRNA表达量（0.06±0.06）显著高于癌组织（0.02±0.02,P〈0.05）;Annexin A2在癌旁组织中的蛋白表达量（0.95±0.42）高于癌组织（0.81±0.36,P〈0.05）.在175对ESCC与癌旁组织石蜡标本中,Annexin A2蛋白的阳性表达率为82.3%（144/175）,低于配对的癌旁组织中的阳性表达率[92.0%（161/175）,P〈0.05].此外,Annexin A2的表达与ESCC患者的淋巴结转移及分化程度相关（P〈0.05）,而与ESCC患者的大体类型关系不明显（P＞0.05）.结论 Annexin A2在ESCC中的低表达可能对ESCC的发生发展及浸润转移起着一定的作用.
- 冯军国郑树涛刘辉刘涛黄丛改刘清林仁勇伊力亚尔·夏合丁卢晓梅
- 关键词：食管肿瘤膜联蛋白A2肿瘤浸润肿瘤转移
- 靶向细胞外信号调节激酶2短发夹式RNA对人食管癌Eca109细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的 观察靶向细胞外信号调节激酶2（ERK2）短发夹式RNA（shRNA-ERK2）对人食管癌细胞株Eca109细胞增殖的影响.方法 构建重组质粒pGeneClipTM-shRNA-ERK2脂质体介导重组质粒转染人食管癌Eca109细胞,荧光倒置显微镜观察转染效率;噻唑蓝（MTT）比色法检测转染食管癌Eca109细胞后细胞的增殖能力;Western blot检测转染后食管癌Eca109细胞ERK2基因的表达和凋亡抑制基因Survivin的表达.结果 测序证实载体构建成功,荧光倒置显微镜观察转染后72 h转染效率50%～70%;转染重组质粒96 h后食管癌Eca109细胞生长抑制率最高为10.45%,与阴性对照组（非特异性序列对照）和空白对照组比较抑制效果明显（P＜0.05）;转染重组质粒72 h和96 h后食管癌Eca109细胞株中ERK2和Survivin的表达与U0126对照组和阴性对照组比较均下降（P＜0.05）.结论 重组质粒pGeneClipTM-shRNA-ERK2在食管癌Eca109细胞株中能发挥靶基因沉默作用,影响Survivin基因的表达,抑制食管癌细胞增殖.
- 霍奇郑树涛阿尔孜古丽·吐尔逊刘清冯军国黄丛改刘涛王星林仁勇伊力亚尔·夏合丁卢晓梅
- 关键词：食管癌小分子干扰细胞外信号调节激酶
- 食管鳞癌中微小核糖核酸let-7的表达及病理生物学意义被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨微小RNA（miRNA）1et-7对食管鳞癌细胞增殖的影响及食管鳞癌组织中let-7表达水平与临床病理特征间的关系.方法 利用RNA干扰（RNAi）和细胞转染技术将食管鳞癌细胞Eca109分别转染入let-7、let-7抑制剂及随机序列.以正常培养的Eca109细胞为阴性对照组.噻唑蓝（MTT）比色法检测各组Eca109细胞的增殖情况.实时荧光定量聚合酶链反应（qRTPCR）检测各组细胞、45例食管鳞癌组织及其癌旁组织中let-7的表达水平,并分析其与食管鳞癌临床病理特征间的关系.结果 转染后72 h,转染let-7组吸光度（A）值较阴性对照组明显降低（P=0.005）,转染let-7抑制剂组A值较阴性对照组明显升高（P=0.029）.与阴性对照组let-7表达量比较,转染let-7组表达增加33%（1.33比1.00,P=0.039）,转染let-7抑制剂组表达降低50%（0.50比1.00,P=0.014）.食管鳞癌组织和癌旁组织中let-7相对表达量的比值为0.66±0.47,差异有统计学意义（P=0.001）.汉族患者食管鳞癌组织中let-7相对表达量（0.48±0.43）低于哈萨克族（0.88±0.51,P=0.019）.低分化食管鳞癌组织中let-7相对表达量（0.42±0.30）低于高分化食管鳞癌组织（0.84±0.38,P=0.015）.有淋巴结转移者食管鳞癌组织中let-7相对表达量（0.50±0.35）低于无淋巴结转移者（0.80±0.52,P=0.032）.结论 let-7对食管鳞癌的发生、发展起抑制作用,其表达水平与组织分化程度、淋巴结转移及民族相关.
- 刘清吕国栋郑树涛刘涛伊力亚尔·夏合丁林仁勇卢晓梅
- 关键词：核糖核酸干扰
- 细胞分裂周期蛋白42mRNA和蛋白在食管鳞癌中的表达及其病理生物学意义被引量：1
- 2011年
- 目的探讨细胞分裂周期蛋白42（Cde42）在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及其与临床病理参数间的关系。方法应用实时荧光定量．聚合酶链反应（qRT—PCR）、蛋白免疫印迹和免疫组织化学方法，从mRNA和蛋白两个水平检测ESCC中Cde42的表达，并分析其与临床病理参、数的关系。结果22对新鲜ESCC与癌旁正常组织中，Cde42mRNA在ESCC中的表达量（0．21±0．14）显著高于其在癌旁正常组织中（0．16±0．12）的表达（P〈0．05）；Cde42蛋白在ESCC中的表达、量（0．83±0．35）高于其在癌旁正常组织中（0．75±0．24）的表达；在175对ESCC中，Cdc42蛋白的阳性表达率为73．7％（129／175），高于其在配对的癌旁正常组织中的表达62．9％（110／175，P〈0．05）。此外，Cde42的表达与ESCC患者的年龄、淋巴结转移及分化程度明显相关（P〈0．05）。结论Cdc42可能参与ESCC发生及转移的过程。
- 冯军国郑树涛刘辉刘涛林仁勇卢晓梅
- 关键词：食管鳞状细胞癌细胞周期
- 食管鳞癌中微小核糖核酸-21的作用及对靶蛋白的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨微小RNA（miRNA）-21对食管鳞癌细胞Ecal09和哈萨克族食管癌的促增殖作用及对程序性细胞死亡基因4（PDCD4）表达的影响。方法将食管鳞癌细胞系Ecal09分为miRNA-21Mimics组（转染序列5＇-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’）、miRNA-21抑制剂组（转染序列5＇-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3＇）、阴性对照组（转染随机序列）和正常对照组（不予转染等任何处理）。细胞按4．5×10^5个／孔接种于6孔板，基于RNA干扰（RNAi）技术、使用脂质体2000试剂进行细胞转染。采用细胞计数法检测转染后各组细胞的增殖情况。使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT—PCR）检测各组细胞的miRNA-21转录水平。采用Western印迹技术检测转染后各组PDCD4蛋白表达情况。检测18对哈萨克族食管癌及其对应的癌旁正常食管组织中miRNA-21转录和PDCD4蛋白表达情况。结果转染48h后，与正常对照组比较，miRNA-21Mimics组Ecal09细胞数增加36％（P=0．002），miRNA-21抑制剂组细胞数减少28％（P=0．002），阴性对照组细胞数变化不明显（P=0．515）。转染48h后，miRNA-21抑制剂组、miRNA-21Mimics组、阴性对照组、正常对照组miRNA-21的相对表达量分别为0．37±0．10、9．17±1．08、0．74±0．23和1．04±0．34，PDCD4蛋白相对表达量分别为1．47±0．11、0．61±0．09、0．89±0．12、0．79±0．02。与正常对照组比较，miRNA-21抑制剂组miRNA-21相对表达量下降（P=0．031）、PDCD4蛋白相对表达量上调（P=0．001），miRNA-21Mimics组miRNA-21相对表达量上升（P=0．001）、PDCD4相对表达量下调（P=0．030），阴性对照组则差异无统计学意义（P值分别=0．272和0．541）。18对哈萨克族食管癌组织中16对的miRNA-21相对表达量（0．11±0．09）高于其对应的癌旁正常食管组织（0．03±0．03，P=0．001），PDCD4蛋白相对表达量（0．92±0．39）低于其对应的癌旁正常食管组织（1．57±0．8
- 刘涛刘清马文静阿孜古丽·吐尔逊郑树涛伊力亚尔·夏合丁马正海卢晓梅
- 关键词：微小核糖核酸
- 儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性在新疆伊犁地区人群中的分布及与食管鳞癌的关系
- 2011年
- 目的探讨儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）基因Vall58Met多态性在新疆伊犁地区人群中的分布及与食管鳞癌（ESCC）的关系。方法研究对象共487例，包括169例ESCC，318例正常对照。采用病例一对照研究方法，以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR—RFLP）分析COMT基因G／A（Val／Met）多态性。结果487例新疆伊犁地区受试者COMT基因型频率分布依次为GG型50．7％，GA型41．1％，AA型8．2％；等位基因G为71．3％，A为28．7％；分层分析显示，新疆伊犁地区年龄≤60岁的ESCC组与对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）；将年龄及性别校正后，ESCC组与对照组COMTVall58Met多态性于哈族、汉族差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论COMT基因Vall58Met多态性可能不是新疆伊犁地区哈萨克族、汉族ESCC危险性的遗传标志。
- 黄丛改刘涛吕国栋郑树涛伊力亚尔·夏合丁卢晓梅
- 关键词：食管鳞癌儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性
- 新疆伊犁地区食管鳞癌与儿茶酚-O-甲基转移酶基因Val158Met多态性的关联分析被引量：2
- 2011年
- 目的探讨儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）基因缬氨酸（Val）158甲硫氨酸（Met）（G—A转换）多态性在新疆伊犁地区人群中的分布及与食管鳞癌（ESCC）的关系。方法采用以医院为基础的病例对照研究方法，研究对象共622名，包括214例ESCC患者，408名年龄、性别、民族相匹配的正常对照。以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析COMT基因G／A多态性。结果622名受试者COMT基因型频率分布依次为GG型占47．3％，GA型占42．3％，AA型占10．4%；等位基因G为68．4％，A为31．6％。食管癌组与正常对照组COMT基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义（P〉0．05）。分层分析显示．年龄≤60岁的食管癌组与正常对照组之间COMT基因型（x^2=6．101）和等位基因频率（x^2=4．493）差异有统计学意义（P值均〈0．05）；哈萨克族、维吾尔族、汉族ESCC组间等位基因频率比较差异有统计学意义（x^2=6．671，P〈0．05）；三个民族正常对照组间COMT基因型（x^2=13．567）及等位基因频率（x^2=11．321）分布比较差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。将年龄及性别校正后，新疆伊犁地区食管癌组与正常对照组COMTVai158Met多态性在哈萨克族、维吾尔族、汉族之间差异均无统计学意义。结论COMT基因Vai158Met单核苷酸多态可能不是新疆伊犁地区食管鳞癌危险性的遗传标志。
- 黄丛改刘涛吕国栋刘清冯军国郑树涛伊力亚尔·夏合丁卢晓梅
- 关键词：食管肿瘤儿茶酚-O-甲基转移酶基因型
- 新疆哈萨克族食管鳞癌中微小RNA let-7的表达及病理生物学意义
- 2011年
- 目的探讨微小RNA(miRNA)let-7在食管鳞癌细胞及组织中的表达,及let-7与食管鳞癌临床病理的关系。方法在细胞水平,运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测let-7在正常食管鳞状上皮细胞Heepic及食管鳞癌细胞CaES-17、Eca109和KYSE-150中的表达差异;在组织水平,采用qRT-PCR技术检测let-7在15对哈萨克族食管鳞癌组织和癌旁正常组织中的表达,并分析其与食管鳞癌浸润、转移等临床病理的关系。结果 qRT-PCR结果显示,let-7在3个食管鳞癌细胞系中的表达明显低于在正常食管鳞状上皮细胞Heepic中的表达,let-7在食管鳞癌组织中的表达明显低于其在癌旁正常组织中的表达,其相对表达量比值为0.79±0.56,差异有统计学意义(P<0.05);let-7在不同性别、分化程度、大体分型、浸润深度及淋巴结转移之间的相对表达量比值均无统计学差异(P>0.05)。结论 Let-7在正常食管鳞状上皮细胞和食管鳞癌细胞中均有表达,但在食管鳞癌细胞中呈低表达;let-7在食管鳞癌组织和正常食管鳞状上皮组织中均有表达,但在癌组织中呈显著低表达;哈萨克族食管鳞癌患者let-7低表达与其临床病理参数之间无显著相关性;let-7对哈萨克族食管鳞癌的发生起抑制作用,是食管鳞癌的潜在分子标记物。
- 刘清吕国栋郑树涛刘涛林仁勇卢晓梅
- 关键词：食管鳞癌哈萨克族LET-7微小RNA
- JNK MAPK信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用机制被引量：1
- 2011年
- 目的探讨c-jun氨基末端激酶1/2(c-jun N-teuninal kinase,JNK 1/2)信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用。方法体外培养Eca-109细胞,以特异性JNK信号转导通路抑制剂SP600125处理Eca-109细胞;RT-PCR的方法检测JNK1和JNK2基因的表达,Western blot法检测JNK和p-JNK蛋白的表达,MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-di-phenyltetrazolium bromide)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Eca-109细胞经SP600125分别处理24h和48 h后,分别与对照组比较,JNK1 mRNA的表达无统计学差异(均P>0.05),JNK2 mRNA的表达也无统计学差异(均P>0.05),但活化的JNK即P-JNK1/2蛋白的表达显著减少,细胞的增殖显著被抑制,细胞的凋亡率有统计学差异(均P<0.05)。结论 JNK信号通路可能在Eca-109细胞的发生发展中发挥重要作用。
- 秦旭耿月华刘清刘涛卢晓梅郑树涛
- 关键词：SP600125食管癌增殖
- 5-Aza-CdR对食管鳞癌甲基化基因的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨5-aza-CdR对食管鳞癌甲基化基因的影响。方法应用人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片,荧光双交换法检测5-aza-CdR干预的食管鳞癌细胞Eca-109与正常培养的Eca-109细胞中的差异表达基因,并进行生物信息学分析。结果经统计学分析,共筛选获得384个差异表达基因,其中303个基因表达上调,81个基因表达下调;差异基因的功能涉及信号转导、物质合成代谢、细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、DNA转录、DNA复制、DNA修复、氧化还原、物质运输、免疫反应等;上调表达基因中有138个基因分别含有1～5个CpG岛序列,占总上调基因的45.54%。结论5-aza-CdR可以影响食管鳞癌细胞中基因异常的甲基化修饰,调控肿瘤细胞的异常凋亡和分化,为进一步研究食管鳞癌致病分子机制,提供表观遗传学的依据。
- 耿月华秦旭刘清郑树涛刘涛林仁勇卢晓梅吕国栋
- 关键词：食管鳞癌基因芯片
