河南省基础与前沿技术研究计划项目(092300410028)
- 作品数：4 被引量：37H指数：4
- 相关作者：王磊职爱民邓瑞广胡骁飞孙亚宁更多>>
- 相关机构：河南省农业科学院河南科技大学更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及免疫学鉴定被引量：9
- 2011年
- 通过碳化二亚胺法(EDC法)制备免疫原OTA-BSA,并免疫小鼠,经杂交瘤技术建立产抗赭曲霉毒素A(OTA)单克隆抗体的杂交瘤细胞株1株。通过体内诱生腹水法制备腹水,纯化后对其亚型、效价、灵敏性、亲和性、特异性等免疫学特性进行鉴定;单抗亚类为IgG1型,间接ELISA效价1:6.4×105,IC50为112.8pg/mL,亲和常数为9.74×1011L/mol,与赭曲霉毒素B交叉反应率为5.6%,与其他常见真菌产物交叉小于0.003%;本实验制备的抗OTA单克隆抗体具有高效、敏感、特异等特点,适合OTA的免疫学快速检测。
- 孙亚宁滕蔓胡骁飞侯玉泽柴书军刘庆堂职爱民王磊张改平邓瑞广
- 关键词：赭曲霉毒素A单克隆抗体灵敏度特异性
- 赭曲霉毒素A人工抗原的合成与鉴定被引量：12
- 2011年
- 采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxysuccinimide NHS)法将赭曲霉毒素A(OTA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备了免疫抗原OTA-BSA,采用1-乙基-3(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法将赭曲霉毒素A(OTA)与卵清白蛋白(OVA)偶联制备了包被抗原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳结果初步表明偶联成功。用OTA-BSA分10μg/只和50μg/只两个剂量分别免疫BALB/C小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗血清,效价可达1∶104,抑制效价达14.7ng,证明偶联成功,并显示低剂量免疫可以提高小鼠pAb的敏感性。本研究为OTA单抗的制备及其免疫学分析方法的建立奠定了基础。
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- 关键词：赭曲霉毒素AELISA
- 真菌毒素性质及免疫原制备方法的研究进展被引量：10
- 2010年
- 真菌毒素是一些真菌在生长过程中所产生的毒性很强的次级代谢产物,通过食品或饲料危害动物和人类的健康及安全。能充分认识真菌毒素性质,准确快速的检测真菌毒素是控制其危害的最有效手段,现阶段酶联免疫(ELISA)检测方法已经成为真菌毒素快速检测的主要趋势,本文对一些主要真菌毒素的性质、种类、危害以及真菌毒素的ELISA检测方法中重要环节——免疫原制备方法的研究做一综述。
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- 关键词：黄曲霉毒素赭曲霉毒素伏马菌素玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇
- 黄曲霉毒素B_1人工抗原及鼠源多克隆抗血清的制备被引量：8
- 2011年
- 目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清。方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原AFB1-BSA和包被抗原AFB1-OVA,采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫实验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果:结果表明半抗原AFB1分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;免疫的6只小鼠效价均达1×10-4以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50% inhibitive concentration,IC50)为8.199ng/mL。结论:实验成功合成了AFB1人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗体血清,为AFB1单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。
- 王磊胡骁飞职爱民刘庆堂孙亚宁邓瑞广
- 关键词：黄曲霉毒素B1ELISA
