艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008zx10004-014)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:赵敏陆柔剑王惠娟张庭瑛赵国霞更多>>
- 相关机构:中国疾病预防控制中心温州医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析被引量:1
- 2011年
- HCoV-NL63是新近发现的人冠状病毒,对其外膜糖蛋白-棘突蛋白的表达及功能的研究仍有待深入。本研究利用天坛株痘苗病毒载体,克隆构建可表达HCoV-NL63棘突蛋白四个片段(N端棘突蛋白:S1;C端棘突蛋白:S2;受体结合区大片段:RL;受体结合区小片段:RS)的重组痘苗病毒(vJSC1175-S1;vJSC1175-S2;vJSC1175-RL;vJSC1175-RS),酶切测序证实表达载体构建正确,免疫荧光分析(IFA)各重组痘苗病毒中棘突蛋白不同片段的表达与定位,Western-Blot分析表明各种重组蛋白表达正确。分析结果显示:4种重组蛋白均能有效表达,S1、RL及RS蛋白的荧光主要分布在细胞膜上,而S2蛋白的荧光则主要分布于细胞浆,各个片段的分子量大小与文献报道相同,并可进行正确的翻译修饰(糖基化)。本研究首次采用痘苗病毒天坛株载体构建制备了表达HCoV-NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒,为进一步分析人冠状病毒HCoV-NL63棘突蛋白的结构功能及探索其抗原性和免疫原性奠定了基础。
- 赵国霞周为民陆柔剑王惠娟赵敏张庭瑛邓瑶高基民谭文杰