吉林省重大科技攻关项目(20040203-2-2)
- 作品数：4 被引量：76H指数：3
- 相关作者：柴晓杰王丕武徐亚维关淑艳吕品更多>>
- 相关机构：吉林农业大学大连水产学院更多>>
- 发文基金：吉林省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 玉米淀粉分支酶基因片段的克隆和植物表达载体的构建被引量：6
- 2005年
- 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了玉米淀粉分支酶的cDNA基因片段,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行了PCR检测和限制性内切酶分析,测定了DNA全序列。结果表明:克隆片段全长为935bp。将反义+正义基因片段插入到pBI12135S启动子下,构建成表达质粒pCJSBE2b。通过花粉管通道法将其导入玉米自交系,获得了转基因植株。
- 柴晓杰王丕武关淑艳徐亚维
- 关键词：PCR克隆CDNA玉米
- 应用RNA干扰技术降低玉米支链淀粉含量被引量：63
- 2005年
- 为了调控玉米淀粉的生物合成过程,克隆了玉米淀粉分支酶(starchbranchingenzymes,SBE)基因,构建高效的siRNA表达体系,通过花粉管通道法将其导入玉米自交系。PCR扩增和Southern杂交结果证明,目的基因已被整合到基因组中,且能够遗传。Northern杂交分析表明,该目的基因在转基因植株中能正常转录并导致内源SBEmRNA含量下降。对转基因植株淀粉分支酶活性和淀粉含量测定结果表明,分支酶活性明显地低于对照,相差最多的低85%;总淀粉含量与对照之间基本没有差异,但直链淀粉的含量提高了约50%。
- 柴晓杰王丕武关淑艳徐亚维
- 关键词：小干扰RNA克隆
- 大豆胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因的克隆及其植物表达载体的构建被引量：11
- 2007年
- 以大豆基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂基因KSTI3的全长DNA片段,并将其构建到pMD18-T vector上。核苷酸序列测定结果表明:该基因片段全长654 bp,与已发表的KSTI3基因序列同源性达99%。将反义+正义基因片段插入到pBI121 35S启动子下,构建重组质粒pBIKSTI3。通过冻融法将该重组质粒转入根癌农杆菌EHA105中,获得了植物表达载体。
- 吕品柴晓杰王丕武张宇
- 关键词：胰蛋白酶抑制剂PCR克隆植物表达载体
- 玉米淀粉分支酶基因启动子的克隆与功能分析
- 2006年
- 以玉米品种“吉糯1号”的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到玉米淀粉分支酶基因的启动子序列,克隆到pMD18-TVector上,经测序,该启动子大小为934bp。与已报道的序列比较仅有14个核苷酸发生改变,同源性为98.5%。用该启动子取代植物表达载体pBI121的35S启动子,与GUS基因编码区连接,构建成融合质粒pSBE-GUS。经农杆菌介导法转化烟草,获得了转基因植株。GUS活性检测结果表明,由该启动子序列引导的GUS基因能在种子中表达,而在其他组织中表达微弱或未表达,证实该启动子具有种子特异性表达的功能。
- 柴晓杰徐亚维王丕武张宇吕品
- 关键词：启动子转基因植株玉米
