国家自然科学基金(J1210069J0106)
- 作品数：13 被引量：38H指数：4
- 相关作者：任桂萍李德山叶贤龙王文飞于丹更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江八一农垦大学新乡学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 反刍动物胚胎附植阶段干扰素-τ对子宫内膜基因表达的影响被引量：1
- 2016年
- 胚胎附植是哺乳动物生殖过程中的关键步骤。干扰素-τ是反刍动物特有的妊娠识别信号,在妊娠早期特异表达并发挥重要作用。本文综述了干扰素-τ在反刍动物胚胎附植及胎盘形成早期发挥的作用,总结该阶段受干扰素-τ调控的相关基因,以及干扰素-τ与孕酮、前列腺素、皮质醇在影响子宫内环境中的相互作用,为深入研究反刍动物胚胎附植相关基因和进一步了解其胚胎附植机制提供理论基础。
- 靳方圆李炳南岳巍倪华
- 关键词：反刍动物
- BMP-6对猪卵母细胞体外成熟的影响被引量：1
- 2017年
- 为研究BMP-6在猪卵泡发育过程中的作用,采用免疫荧光和Western blot技术检测BMP-6在猪排卵前卵泡卵母细胞、颗粒细胞以及卵泡液中的表达;在猪卵母细胞体外成熟培养过程中分别添加5、25及50 ng/mL BMP-6蛋白,观察其对猪卵母细胞在体外成熟过程中的影响。结果表明,猪排卵前卵泡的卵母细胞和颗粒细胞以及卵泡液中均存在BMP-6蛋白,体外添加不同浓度的BMP-6蛋白均能明显促进猪卵母细胞体外成熟,说明BMP-6在猪卵泡发育及猪卵母细胞的成熟过程中发挥作用。
- 杨洪娟李玉春李炳南岳巍倪华
- 关键词：卵母细胞
- 重组新城疫病毒rNDV-IL15在黑色素瘤治疗中的效果被引量：2
- 2014年
- 为了提高重组新城疫病毒抑制肿瘤的效果,本实验拯救获得了重组新城疫病毒rNDV-IL15。构建prNDV-IL15重组质粒,转染BHK21细胞后,拯救重组病毒rNDV-IL15,并测定病毒生长曲线;rNDV-IL15以0.1 MOI感染B16F10细胞,ELISA法检测细胞上清液中IL15的表达量;MTT法比较rNDV-IL15和rNDV在体外抑制B16F10细胞的效果,并比较了两者在黑色素瘤肿瘤模型中对荷瘤小鼠的治疗效果。结果表明,rNDV-IL15构建并成功拯救;病毒生长曲线表明,插入IL15后对病毒的生长无影响;IL15在细胞上清液中有较高的表达,达到(1 044.3±27.7)ng·mL-1;rNDV-IL15和rNDV对B16F10细胞的抑制率呈时间依赖性,但两者的抑制率无显著差异;与rNDV相比,rNDV-IL15在体内能较明显地抑制肿瘤生长。结果提示,rNDV-IL15是一种更有效的抗肿瘤制剂。
- 牛泽杉白福良孙田田辉尹杰超曹宏伟于丹田贵游吴云舟李德山任桂萍
- 关键词：重组新城疫病毒黑色素瘤B16F10抗肿瘤制剂
- 三种双特异性抗体对小鼠类风湿关节炎模型的治疗效果
- 2014年
- 为获得治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的先导药物,本研究比较了3种双特异性抗体(BsAB-1、BsAB-2和BsAB-3)对Ⅱ型胶原(CII)诱导的RA(CIA)模型小鼠的治疗效果。首先用ELISA法比较了3种二价抗体同时与两种抗原的结合能力,结果显示,3种抗体均能同时结合两种抗原,BsAB-1结合抗原的能力优于其他两种抗体(P<0.01)。用鸡CII建立CIA模型,用纯化的抗体对CIA模型小鼠进行治疗,每2天给药1次,治疗29天。治疗结束后与CIA模型对照组相比,各治疗组小鼠踝关节肿胀、皮肤紧绷、后足皮肤表面充血等临床症状明显减轻,其中BsAB-1治疗后足趾肿胀不明显,基本恢复正常。采用ELISA法检测了各组小鼠血清中CII抗体,real-time PCR法检测了脾脏中细胞因子IL-2、IL-1β、IL-17A和TNF-α的表达水平。与CIA模型对照组相比,所有抗体治疗组都能明显降低血清中CII抗体水平、脾脏中IL-2、IL-1β、IL-17A和TNF-α的表达量,且BsAB-1治疗效果最佳,与另外两种抗体比较有显著差异(P<0.01)。因此,3种二价抗体对CIA模型小鼠都有治疗效果,BsAB-1的治疗效果要优于另外两种抗体,是优选的先导药物。
- 李清萃韩晓辉周兵王文飞任桂萍孙翠羽吴强于引航徐黎明王秋颖齐剑英魏雨泉曹宏伟韩俊岩李德山
- 关键词：双特异抗体II型胶原
- 成纤维细胞生长因子21对胰岛素抵抗所致高血压的治疗作用被引量：9
- 2013年
- 本文研究考察成纤维细胞生长因子21(FGF21)对果糖诱导的胰岛素抵抗高血压模型的治疗作用及其机制。10%果糖诱导SD大鼠4周建立胰岛素抵抗高血压模型,成模后随机分为4组:模型对照组及FGF210.25、0.1和0.05μmol·kg-1·d-1剂量组,5只相同周龄的正常SD大鼠作为正常对照组。每天注射1次,治疗4周,给药期间每周监测大鼠体重,采用尾套法检测收缩压变化;口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素稳态评价模型检测胰岛素抵抗情况;给药结束时留取血清样本分别测定血清胰岛素、血脂、血糖水平。结果显示,治疗4周后,不同剂量FGF21治疗组大鼠收缩压均下降至正常水平[(122.2±3.5)mmHg,P<0.01],而注射生理盐水的模型对照组大鼠的收缩压在治疗期间一直维持在较高水平[(142.5±4.5)mmHg]。24 h观察各组大鼠血压发现,FGF21治疗组大鼠24 h血压基本维持在(130±4.5)mmHg,各时间段血压均显著低于模型对照组[(130±4.5)vs(143±5.5)mmHg,P<0.01]。FGF21治疗组大鼠血脂改善明显,总胆固醇与甘油三酯含量均显著下降至正常水平。FGF21各治疗组大鼠血清NO含量均显著高于模型对照组[(7.32±0.11),(7.24±0.13),(6.94±0.08)vs(6.56±0.19)μmol·L-1,P<0.01],且其改善程度呈现明显的剂量依赖性,表明FGF21可明显升高果糖诱导高血压模型大鼠血清NO含量,改善内皮释放NO功能。OGTT及HOMA-IR结果显示,经FGF21治疗4周后胰岛素抵抗亦明显得到改善,且呈现剂量依赖性。因此本研究揭示了FGF21通过改善胰岛素抵抗,显著降低SD大鼠由于胰岛素抵抗所引起的高血压。这一发现为临床应用FGF21治疗原发性高血压奠定了理论基础。
- 朱升龙任桂萍张振宇王文飞叶贤龙韩苗苗赵景壮徐彤宇刘铭瑶李德山
- 关键词：成纤维细胞生长因子21胰岛素抵抗高血压果糖
- 表达鸡IL2和IL15重组新城疫病毒的免疫增强作用研究被引量：1
- 2014年
- 为提高新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗的免疫保护效果,本研究选取鸡IL2(chIL2)和chIL15两个细胞因子作为分子佐剂,通过反向遗传操作技术分别将这两个基因克隆于NDV Clone30株中,构建表达chIL2和chIL15的重组病毒rClone30-chIL2和rClone30-ch IL15。ELISA法检测结果表明两种细胞因子在重组病毒中均能够稳定表达。将重组病毒免疫雏鸡,以NDV强毒BJ株进行攻毒试验,测定其抗体产生情况和保护效果。结果表明,两种重组病毒均可以诱导雏鸡产生较高水平抗体;而且两种重组病毒保护率可达100%,具有较好的保护效果。本研究为进一步提高NDV重组基因工程疫苗的效果提供了新思路。
- 张天援吕政王卉朱升龙刘云野孙田尹杰超吴云舟吴金任桂萍李德山
- 关键词：反向遗传操作技术新城疫病毒
- 矮秆大豆SGF14h蛋白结构和功能的生物信息学预测和分析被引量：4
- 2017年
- 为了研究本实验室前期质谱分析筛选出的SGF14h蛋白的生物学功能,并为研究SGF14h基因的表达调控提供理论依据,使用一系列生物信息学软件、数据库和在线程序,对大豆SGF14h蛋白序列及核酸序列进行分析和预测。SGF14h基因结构分析显示:该基因位于第4号染色体上,全长1 788bp,其中开放阅读框长780bp,编码259个氨基酸。SGF14h蛋白属性分析显示:序列中富含磷酸化位点(丝氨酸磷酸化位点10个和苏氨酸磷酸化位点3个);此蛋白为非分泌型蛋白、无跨膜结构域;预测其定位于线粒体。SGF14h蛋白结构分析显示:二级结构有153个α螺旋,无β折叠和β转角;为亲水性蛋白质;属于14-3-3蛋白家族成员。SGF14h蛋白进化树分析表明:该蛋白与玉米GF14蛋白亲缘性最近。矮秆大豆中,SGF14h可能在GA信号转导中起重要作用,进而影响株高。因此对SGF14h的研究具有生物学意义,此结果可为进一步验证大豆SGF14h蛋白的生物学功能提供借鉴和理论依据。
- 孟德义郭人铭赵虎徐庆华杜洋郝再彬张达
- 关键词：矮秆大豆生物信息学
- 母源基因在猪卵母细胞成熟及胚胎发育中的作用被引量：1
- 2015年
- 卵母细胞成熟和胚胎的早期发育是由多因素调控的复杂的生物过程,母源基因及合子基因的表达变化控制着个体的发生,决定着所有生命的进程。母源基因是指受精前卵子发育时母体细胞转录生成的RNA以及其蛋白产物,定位于成熟的卵母细胞胞质中,母源基因在卵母细胞成熟和胚胎的早期发育过程中起着相当重要的作用。对母源基因的研究将为我们解释胚胎发育过程中的生命现象及解决生殖发育方面的问题提供有力的理论依据。目前关于母源基因的研究多集中于传统的模式生物中,而对畜牧业生产中重要的经济动物却涉及很少。本文以母源基因在猪卵母细胞成熟和胚胎发育中的研究现状作一综述,希望为经济动物的繁殖及发育研究提供一定的参考依据。
- 杨洋林叶邢伟楠段晓宇倪华侯晓明
- 关键词：卵母细胞胚胎
- 提高成纤维细胞生长因子-21产率和纯度被引量：2
- 2014年
- 成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)作为近期发现的新型代谢调节因子,因其具有独立于胰岛素调节糖脂代谢、增加胰岛素敏感性等作用,有望成为治疗糖尿病的新型药物。包涵体形式表达外源蛋白表达量及纯度高,但是以pET载体表达时,FGF-21以包涵体形式表达,且复性率及产率低,蛋白活性降低[1]。针对这一瓶颈问题,用SUMO载体首次以包涵体形式表达带有SUMO标签的hFGF-21,通过优化培养条件,并应用中空纤维柱膜过滤技术对菌体进行富集,对包涵体进行洗涤、变性及复性,经过亲和层析、凝胶过滤层析的纯化方法,得到了成熟的hFGF-21,在保证蛋白活性的同时增加了蛋白的产量及纯度。通过检测HepG2细胞葡萄糖吸收及2型糖尿病db/db小鼠短期及长期血糖变化鉴定其降糖生物学活性。结果表明,以包涵体形式表达hFGF-21(ihFGF-21)的表达量是可溶形式表达的hFGF-21(shFGF-21)的3倍,最终ihFGF-21的收率为20 mg/L,而shFGF-21的收率仅为6 mg/L。ihFGF-21的纯度可达到95%以上,而shFGF-21仅能达到90%左右;在细胞水平和动物水平上两者的降糖生物学活性一致。在保证hFGF-21生物学活性的前提下,与传统包涵体途径提取目的蛋白的方法相比,应用中空纤维柱膜过滤技术使hFGF-21的生产周期缩短了约1/3左右。综上所述,此法为FGF-21中试及工业化生产提供了高效、经济的策略。
- 于丹叶贤龙任桂萍徐鹏飞厉书杰牛泽杉李德山
- 关键词：蛋白表达糖尿病
- FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用及其机制被引量：6
- 2014年
- 本研究旨在阐明FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用机制。通过检测FGF-21或(和)胰岛素作用后,HepG2胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖的吸收率以及2型糖尿病db/db小鼠血糖变化,证明FGF-21和胰岛素具有协同作用;采用real-time PCR方法检测肝脏中GLUT1和GLUT4转录水平,揭示两者在调节糖代谢过程中协同作用的机制。实验结果表明,两者在调节糖代谢过程中具有协同作用。Real-time PCR结果表明,FGF-21单独作用可上调GLUT1转录水平,且呈剂量依赖性,而对GLUT4转录水平没有作用;胰岛素(4 u)单独作用组仅上调GLUT4转录水平,而对GLUT1转录水平无影响;FGF-21 0.1 mg·kg-1(无效剂量组)单独作用,GLUT1和GLUT4转录水平均没有改变。但是,当FGF-21 0.1 mg·kg-1(无效剂量)与胰岛素(4 u)共同作用时,GLUT1和GLUT4的转录水平均显著增加,且GLUT1转录水平与5倍浓度的FGF-21单独作用相似,GLUT4转录水平显著高于胰岛素单独作用的效果,说明在FGF-21存在的情况下,胰岛素具有增加FGF-21敏感性的作用;在胰岛素存在的情况下,FGF-21同样具有增加胰岛素敏感性的作用。综上所述,FGF-21与胰岛素在糖代谢过程中的协同作用机制是通过彼此增敏来实现的。
- 于丹孙翠羽孙国鹏任桂萍叶贤龙朱升龙王文飞徐鹏飞厉书杰吴强牛泽杉孙田刘铭瑶李德山
- 关键词：糖尿病FGF-21胰岛素
