中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-EW-G-14)
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
- 相关作者:吴洽庆刘卫东马延和陈曦朱敦明更多>>
- 相关机构:天津科技大学中国科学院天津工业生物技术研究所中国科学院更多>>
- 发文基金:中国科学院知识创新工程重要方向项目国家重点基础研究发展计划天津市科技计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 不对称还原大位阻二芳香基甲酮的羰基还原酶的基因克隆及性质分析被引量:1
- 2013年
- 由于二芳香基甲酮的位阻大及羰基两侧的取代基差异性较小,对其进行不对称还原是生物催化中具有挑战性的难题之一。文中通过对毕赤酵母GS115基因组序列的分析,发现了一个潜在羰基还原酶基因pascr。将该基因克隆、表达在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中,通过Ni-NTA对重组蛋白进行了分离纯化,并对酶的性质进行了研究。PasCR专一性利用NADPH作为辅酶,其最适反应pH为6.5;最适反应温度为35℃;凝胶层析实验结合SDS-PAGE分析表明PasCR在溶液中以二聚体形式存在。PasCR能够不对称还原位阻较大的二芳香基甲酮类化合物,如4-甲基二苯甲酮、4-氯二苯甲酮、2-氯二苯甲酮等,对4-甲基二苯甲酮的还原产物的ee值达到了85%。
- 李哲刘卫东陈曦贾士儒吴洽庆朱敦明马延和
- 关键词:生物催化羰基还原酶毕赤酵母
- 乳链菌肽——从实验室走进百姓生活被引量:2
- 2014年
- 乳链菌肽(Nisin)是乳酸菌产生的一种含特殊氨基酸的羊毛硫细菌素,因其高抑菌活性及安全性,可用作天然食品防腐剂。20世纪80年代末,中国科学院微生物研究所率先在国内开展了对乳链菌肽的研究和开发工作。从菌种选育、发酵及后提取工艺优化、到技术转移转化,经过几代科学家的不断创新与自主研发,产学研成功结合,乳链菌肽最终从实验室走向了工业化生产,走向了市场,走进了寻常百姓家,为"微生物,高科技,大产业"做了很好的诠释。
- 钟瑾
- 关键词:乳链菌肽乳酸菌食品防腐剂
- 一种来源于毕赤酵母的高对映选择性羰基还原酶的性质及底物谱分析被引量:2
- 2013年
- 手性醇是一类非常重要的化合物,羰基还原酶催化酮的不对称还原生成对应的手性醇。从毕赤酵母Pichia pastoris GS115基因组数据中找到一个潜在的NADPH依赖的羰基还原酶,研究毕赤酵母P.pastorisGS115中的羰基还原酶。根据其核酸序列设计引物,从P.pastoris GS115基因组中扩增到目的基因ppcr,大肠杆菌BL21(DE3)中表达,Ni-NTA纯化,对酶的性质和底物谱进行了研究。PPCR的最适反应温度为35℃,最适反应pH为6.0,低于45℃时有很好的稳定性。对3-甲基-2-羰基丁酸乙酯的Km和kcat分别为9.48 mmol/L和0.12 s-1。PPCR表现出广泛的底物谱和很高的对映选择性,对醛、α-酮酯、芳香族β-酮酯及芳香族酮都表现出了很好的活性,在测定的底物中,除极少数底物外,ee值均达到97%以上。因此,PPCR具有较好的应用前景。
- 田来强刘卫东陈曦冯进辉杨洪江吴洽庆朱敦明马延和
- 关键词:羰基还原酶手性醇毕赤酵母