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过表达bFGF促进大鼠急性缺血心肌的毛细血管生成被引量：2: 2011年; 研究过表达人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在大鼠急性心肌缺血模型中的表达及其对心肌血管再生的影响.将含人bFGF质粒pcDNA/b转染人脐带静脉内皮细胞(HUVEC),进行MTT检测.pcDNA/b转染人肾细胞293细胞系,进行G418稳定筛选,Western印迹检测.建立大鼠急性心肌梗死模型,分别将生理盐水、空质粒pcDNA3.1(+)和pcDNA/b分3点注射于梗死交界处心肌内4周后取材,做常规HE染色和Masson染色,测量各组微血管数量和梗死面积.经免疫组织化学染色鉴定和电镜观察,过表达外源bFGF可以促进HUVEC(细胞)生长;pcDNA/b能在293细胞中高效表达外源bFGF基因.pcDNA/b注射组梗死交界处可见大量新生血管,毛细血管总数明显大于对照组,梗死面积明显小于对照组.pcDNA/b组在梗死交界区有bFGF阳性表达.电镜观察显示,在梗死交界处心肌细胞间有毛细血管增生,分化成2个血管腔.本实验证明,过表达bFGF具有促进大鼠急性缺血心肌的毛细血管生成的作用,为bFGF基因治疗缺血性心肌病的研究提供实验基础.; 王雅梅刘冰孙丽翠祁雅慧司杨闫豫东郑少鹏; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体基因过表达

低氧诱导人VEGF基因表达载体的构建及其蛋白表达检测被引量：2: 2011年; 目的以人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因的低氧反应元件(HRE)作为增强子,构建含HRE的真核表达载体,探讨含HRE不同拷贝数的载体对低氧的反应状态。方法将人工合成的HRE串联后与CMV启动子连接,替换pcDNA3.1的启动子部分,构建成低氧诱导真核表达载体;将hVEGF基因重组到此载体中,转染BHK细胞。用免疫组化染色法检测VEGF的表达,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测低氧前后细胞hVEGF表达的变化。结果成功构建了含HRE的低氧诱导真核表达载体4HRE-pcDNA-VEGF和6HRE-pcDNA-VEGF。转染细胞后进行低氧培养,VEGF的表达均增高,含6HRE的低氧诱导作用高于4HRE。结论在含HRE的真核表达载体中,低氧时可诱导基因的表达,其拷贝数可影响诱导作用的强度。; 殷爱红武文琦何丽明郑少鹏; 关键词：缺氧诱导因子低氧反应元件血管内皮细胞生长因子

医学分子生物学教学实践与体会被引量：5: 2010年; 分子生物学是医学生的重要课程之一,根据医学院校分子生物学教学的特点和要求,制定相应的教学大纲,安排相应的教学内容,选择合适的教材,注重教学过程中的各个环节,是提高分子生物学教学效果的重要措施。; 王雅梅韩玉英油紅捷文朝阳郑少鹏; 关键词：医学专业本科生分子生物学教学方法

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北京市教委资助项目(KM200310025094)