国家自然科学基金(30760067)
- 作品数：23 被引量：37H指数：4
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- 相关机构：宁夏医科大学附属医院宁夏医科大学重庆医科大学附属第一医院更多>>
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- 病毒性脑炎的磁共振成像和扩散加权成像表现被引量：3
- 2011年
- 目的探讨病毒性脑炎的核磁共振成像(MRI)和扩散加权成像(DWI)表现。方法71例病毒性脑炎患者,28例颅内有病灶者为A组,43例颅内无病灶者为B组;100例正常成人作为对照组。3组均进行常规MRI及DWI检查,比较病毒性脑炎与正常成人的额叶白质、颞叶白质、侧脑室旁及基底节-丘脑区的平均表观扩散系数(ADC)值的差异。结果 A组病毒性脑炎患者额叶白质、颞叶白质、侧脑室旁及基底节-丘脑区的平均ADC值分别为(1.070±0.21)×10-3mm2/s、(1.110±0.21)×10-3mm2/s、(1.080±0.19)×10-3mm2/s、(1.030±0.18)×10-3mm2/s;B组病毒性脑炎患者额叶白质、颞叶白质、侧脑室旁及基底节-丘脑区的平均ADC值分别为(0.789±0.05)×10-3mm2/s、(0.813±0.04)×10-3mm2/s、(0.789±0.04)×10-3mm2/s、(0.779±0.03)×10-3mm2/s;正常成人的额叶白质、颞叶白质、侧脑室旁及基底节-丘脑区的平均ADC值分别为(0.7961±0.04)×10-3mm2/s、(0.805±0.05)×10-3mm2/s、(0.785±0.03)×10-3mm2/s、(0.770±0.02)×10-3mm2/s。A组的平均ADC值较B组及对照组均升高,差异具有统计学意义(P均<0.05),而B组与对照组差异无统计学意义(P均>0.05)。结论DWI及ADC可反映病毒性脑炎病变组织的微观结构变化信息,是常规MRI非常有价值的补充,与临床诊断相结合,有助于病毒性脑炎的诊断。但在病毒性脑炎早期尚未形成可见的颅内病灶者,MRI包括DWI及ADC对病毒性脑炎的诊断受到限制,尚需进一步探讨。
- 李芳王振海
- 关键词：病毒性脑炎磁共振成像扩散加权成像表观扩散系数
- TLR4介导HCV引起小胶质细胞IL-12和IFN-α分泌的实验研究
- 2011年
- 目的检测HCV刺激小鼠小胶质细胞(BV2细胞)后IL-12、IFN-α分泌变化及其与TLR4的关系。方法用含20%HCV阳性血清的培养液刺激BV2细胞,为HCV血清组,并设置正常血清组和空白对照组。于24 h后用RT-qPCR方法观察各组TLR4相对表达,应用ELISA方法检测各组细胞培养上清液中IL-12、IFN-α的含量,同时观察TLR4阻断后各组IL-12、IFN-α的分泌变化。结果 HCV血清组TLR4相对表达和IL-12、IFN-α分泌均高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);阻断TLR4的HCV血清组IL-12、IFN-α分泌明显低于非阻断组(P<0.01),高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);正常血清组和空白对照组阻断前后无明显变化(P>0.05)。结论 TLR4可能会通过介导HCV刺激小胶质细胞分泌IL-12、IFN-α等来发挥宿主CNS抗HCV的固有免疫应答。
- 刘强谢柳青王振海
- 关键词：小胶质细胞固有免疫
- HCV刺激小胶质细胞后TLR9蛋白的表达及其与MCP-1、TNF-α的关系被引量：5
- 2011年
- 目的:了解在体外培养条件下丙型肝炎病毒(HCV)刺激小鼠小胶质细胞(BV2)后Toll样受体9(TLR9)蛋白的表达变化及其对MCP-1(人单核细胞趋化蛋白-1)和TNF-α分泌的影响,探讨HCV感染中枢神经系统(CNS)后小胶质细胞TLR9蛋白的表达及其相应细胞因子的变化。方法:体外培养BV2细胞,分为HCV阳性血清组、正常人血清组、空白对照组。每组各20例细胞样本。在12h收集细胞和上清液,用流式细胞术检测TLR9蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中MCP-1和TNF-α的含量,并应用SPSS11.0统计软件包进行统计学分析。结果:(1)各组BV2细胞均有TLR9蛋白的表达,HCV阳性血清组中TLR9蛋白的表达高于正常人血清组、空白对照组(P<0.01);正常人血清组和空白对照组无统计学差异(P>0.05);(2)HCV阳性血清组MCP-1和TNF-α含量高于正常人血清组、空白对照组(P<0.01);且HCV阳性血清组TLR9蛋白的表达量与MCP-1和TNF-α的分泌可能呈正相关。结论:HCV阳性血清刺激可使体外培养的BV2细胞表达TLR9蛋白增高,且可能诱导了MCP-1和TNF-α的分泌。TLR9蛋白可能参与了HCV在中枢神经系统感染中的早期固有免疫应答。
- 胡坤王国玮王振海
- 关键词：丙型肝炎病毒TOLL样受体9TNF-ΑMCP-1
- 宁夏地区人畜BDVp24基因系统发生树构建和序列分析被引量：3
- 2010年
- 目的了解宁夏及其周边地区博尔纳病病毒（BDV）的感染状况和基因特征及其种系发生来源。方法采用巢式反转录实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—nRT-PCR），检测119例病毒性脑炎（VE）患者和其密切接触的患病或健康牛205头、绵羊978只及脑血管病患者46例、多发硬化患者13例的外周血单核细胞BDVp24片段，检出的阳性序列连同前期检出的宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者阳性BDVp24基因序列与GenBank中5个国家7个动物种属29例BDVp24基因序列进行比对，分析其核苷酸和氨基酸序列的同源性，重新构建基因系统发生树。结果23例阳性检测标本连同3例前期检测序列基因聚合分析显示核苷酸之间的同源相似度为96．5％-100．0％，氨基酸的同源相似度为95_3％～100．O％。与德国马源性标准株HE80同源相似度较高。构建基因的系统发生树发现宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者同德国马和绵羊、奥地利马都各自形成了独立的支系，其余样本形成混合支系，其中宁夏的vE患者、牛、绵羊同德国马、日本绵羊形成德国-中国宁夏-日本混合支系。结论宁夏及其周边地区人和动物BDV的感染，存在区域源性BDV独立株和国外传人基因保守株的多源状态。
- 刘建柳英王振海谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒病毒性脑炎绵羊
- BDV核蛋白在少突胶质细胞内表达定位的基础研究
- 2010年
- 目的 研究博尔纳病病毒核蛋白在转染的少突胶质细胞（oligodendroglial cell,OL）内的表达定位及其对细胞活性的影响.方法 应用RT-PCR检测转染细胞内BDVp40的基因片段,应用激光共聚焦显微镜和Western blot的方法观察核蛋白在细胞内的表达定位.应用MTT方法观察核蛋白对OL活性的影响.结果 在转染BDVp40基因片段的荧光表达质粒的OL内检测到BDVp40的基因片段;激光共聚焦显微镜提示核蛋白存在于细胞质和细胞膜中;Western blot的结果显示在细胞膜蛋白中存在核蛋白,而在细胞质中未检测到该蛋白;MTT法检测BDV核蛋白对OL活性具有明显的抑制作用.结论 通过研究转染的OL内稳定表达了BDV核蛋白,并将其定位在细胞的结构蛋白中,尤其在细胞膜中含量更为丰富,说明其可能在细胞的信号转导或介导病毒感染人胞过程中发挥关键作用.BDV核蛋白对OL的活性有抑制作用,这可能是BDV导致中枢神经系统损伤的机制之一.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒核蛋白少突胶质细胞
- TLR4介导的BV-2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究被引量：1
- 2011年
- 目的:观察BV-2细胞感染HCV后IFN-β、IL-6分泌和TLR4表达相关性,初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统抗HCV固有免疫应答及其可能机制。方法:将BV-2细胞接种于24孔培养板,贴壁后换用含20%HCV阳性血清的培养液感染细胞,为HCV实验组,同时设正常血清组和空白对照组。应用流式细胞术检测各组BV-2细胞TLR4蛋白水平的表达;用RT-PCR观察阻断TLR4后各组BV-2细胞TLR4mRNA表达变化;用ELISA检测阻断TLR4后各组BV-2细胞IFN-β、IL-6分泌变化。结果:HCV实验组TLR4表达和IFN-β、IL-6分泌均高于正常血清组及空白对照组(P<0.01);阻断TLR4的HCV实验组TLR4mRNA表达及IFN-β、IL-6分泌明显低于非阻断组(P<0.01)。结论:HCV感染中枢神经系统后,TLR4可通过启动下游细胞因子IL-6、IFN-β等的转录和翻译,介导参与宿主抗HCV固有免疫应答过程。
- 刘强赵春梅王振海
- 关键词：TOLL样受体4丙型肝炎病毒IFN-Β固有免疫
- 宁夏地区病毒性脑炎中新发博尔纳病病毒感染的研究
- 2010年
- 目的 研究宁夏地区新发博尔纳病病毒（BDV）在病毒性脑炎患者中的感染状况,分析病毒株的核酸序列、编码的氨基酸序列和病毒株的系统发生.方法 套式反转录实时荧光定量PCR检测60例病毒性脑炎患者血液标本;并对前期课题组检测的59例病毒性脑炎患者中BDV p24阳性样本和本实验PCR检测阳性标本使用ELISA法检测其对应脑脊液中p40抗体,对阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果与国外标准株He/80、H1766、strain V等的核酸和氨基酸序列对比分析,构建病毒基因的系统发生树.结果 PCR检测119份血标本,发现有12份标本BDV p24阳性,阳性检出率为10.08%,7份BDV p40检测阳性,阳性率为5.88%;ELISA检测脑脊液核蛋白抗体,有2份阳性,阳性检出率为1.68%.基因聚合分析显示,7份BDV阳性的核酸序列中有6份与德国马源性的He/80株同源性达100%,1份仅有1个碱基发生同义突变;转录后的氨基酸对比分析显示,7份与He/80株完全一致;重构的基因系统发生树中可见宁夏病毒性脑炎患者BDV核苷酸序列与国外标准株形成一个中国（宁夏）-德国-日本的混合支系.结论 宁夏地区病毒性脑炎患者中可能存在BDV感染,其发生可能与动物的密切接触相关,病毒在种系发生中与德国马源性He/80株有极高的同源性,推断病毒有可能从国外传入本土,不排除病毒株变异的可能.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：BORNA病病毒反转录聚合酶链反应酶联免疫吸附测定
- 病毒性脑炎患者血液和脑脊液NSE含量测定及其与临床的相关性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:为了观察病毒性脑炎急性期和恢复期患者血液和脑脊液的NSE含量变化,探讨其与异常脑电图和影像学低密度灶体积等方面的相关性。方法:将42例病毒性脑炎住院患者作为观察组,25例与观察组相匹配的阑尾或胆囊摘除手术病人以及健康体检者作为对照组;采用ELISA法,检测其血液及脑脊液NSE浓度;并应用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析。结果:病毒性脑炎急性期患者血液和脑脊液NSE浓度显著高于恢复期患者和对照组(P<0.01);血液和脑脊液NSE浓度与低密度灶体积均呈显著正相关(rcsf=0.736,P<0.01;r血液=0.685,P<0.01);轻度、中度及重度异常脑电图患者脑脊液NSE浓度均高于血液(P<0.01);重度、中度异常脑电图患者血液及脑脊液NSE浓度均高于轻度(P<0.01)。结论:脑脊液或血清中的NSE浓度,反映了神经细胞和神经胶质细胞的损害程度,也是脑组织破坏后较合适的生化标记物。
- 王振海陈建红马斌武谢鹏孔繁元
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶病毒性脑炎酶联免疫吸附法
- 宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒的感染状况
- 2010年
- 目的分析宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的感染状况,探讨阳性基因扩增片段与德国马源性标准病毒株He/80同源性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、荧光定量巢式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)分别检测宁夏地区145例健康牛脑组织中BDVp40、BDVp24基因片段,对BDVp24阳性扩增产物进行基因序列测定,并应用BLAST和DNAsist 5.0软件对测序结果进行分析。结果 145例牛脑组织中4例BDVp40、BDVp24均阳性,阳性率为2.759%,且阳性BDVp24片段的核苷酸序列与He/80同源性最高,所编码氨基酸序列相同。结论宁夏地区牛脑组织中可能存在动物源性BDV的自然感染,阳性BDV p24核苷酸序列与He/80具有高度同源性,所编码的氨基酸序列相同。
- 杨娟刘建王振海
- 关键词：博尔纳病病毒
- HCV感染小鼠小胶质细胞后TLR7mRNA和IL-6表达被引量：2
- 2011年
- 目的通过观察丙型肝炎病毒(HCV)感染小鼠小胶质细胞BV2后Toll样受体(TLR)7 mRNA及白细胞介素(IL)-6水平的动态变化,探讨HCV对中枢神经系统(CNS)的免疫发病机制。方法用20%(体积分数)的HCV阳性血清感染BV2细胞,在感染后6、12、244、8 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA法检测TLR7 mRNA和IL-6表达,同时设空白对照组和正常血清组。结果 3组BV2细胞中均有TLR7 mRNA表达;HCV阳性血清感染BV2细胞后TLR7 mRNA表达随时间延长而逐渐增高,其中在12、24、48 h时表达水平均较其他两组增高(P<0.05)。IL-6表达在HCV阳性血清组也逐渐增高,48 h时与空白对照组、正常血清组48 h时比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BV2细胞可以表达TLR7 mRNA,HCV感染能上调BV2细胞TLR7 mRNA和IL-6表达。TLR7可能参与了HCV对CNS的病理生理过程。
- 赵莉王国玮王振海
- 关键词：TOLL样受体7白细胞介素6肝炎病毒属小胶质细胞
