国家自然科学基金(30572033)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 转录因子Sp3与釉蛋白基因转录调控关系的研究
- 2011年
- 目的 探讨转录因子Sp3对釉蛋白基因（enamelin）的转录调控作用,以明确Sp3是否直接参与了釉蛋白基因的转录调控.方法 采用生物信息学软件预测釉蛋白基因上游调控区含有Sp3的结合位点;运用凝胶阻滞实验检测牙胚中的Sp3蛋白与釉蛋白调控区Sp3识别序列间的结合能力及其特异性;采用体外基因重组技术和双荧光素酶报告分析,将釉蛋白基因5＇调控区构建至pGL3-basic载体中,并将其与Sp3表达质粒体外共转染至永生化成釉细胞株（LS8）中,检测Sp3对釉蛋白基因的激活.结果 凝胶阻滞实验与双荧光素酶报告分析结果显示,Sp3不能直接结合在釉蛋白上游调控区并激活其转录.结论 Sp3没有以直接作用的方式参与釉蛋白基因的转录调控.
- 吕平田华高学军
- 关键词：牙釉质蛋白质类基因转录调控
- 钟状期成釉细胞的体外生长研究被引量：2
- 2009年
- 目的:通过对乳牙牙胚成釉细胞的体外培养生长情况的研究,了解成釉细胞的生长和分化过程。方法:解剖分离因疾病原因引产遗弃的19周胎儿下颌骨,半侧固定后拍摄数字X线影像,连续切片HE染色;另半侧未固定的组织分离乳牙牙胚成釉器,胶原酶消化法制成细胞悬液,采用差速贴壁和无血清培养基选择性培养成釉细胞。培养的乳牙胚成釉细胞通过细胞角蛋白14免疫细胞染色鉴定,并以RT-PCR方法检测釉质基质蛋白的表达。结果:X线影像显示牙胚冠部有硬组织形成,组织学乳牙牙胚处于钟状期,可见分化的成釉细胞分泌大量细胞外基质,釉牙本质界处釉质已矿化。无血清培养基中牙源性上皮的生长分化良好,细胞角蛋白14染色阳性,RT-PCR显示有釉蛋白、釉原蛋白和成釉蛋白的表达。结论:采用无血清培养基可以选择性的培养乳牙胚钟状期成釉细胞,能够较好反映成釉细胞的生长分化状态。钟状期分化的成釉细胞进入细胞外基质分泌活跃期,并在釉牙本质界处最早出现釉质的矿化。
- 田华吕平高岩陈苹周春燕高学军
- 关键词：成釉细胞体外培养基质蛋白
- 釉蛋白在大鼠牙胚釉质发育中的表达特征被引量：5
- 2007年
- 目的：观察釉蛋白（enamelin，En）在大鼠牙胚发育过程中的表达，探讨其可能的生物学功能。方法：采用免疫组织化学方法，检测出生后第1，3，7，10，14天SD大鼠第一磨牙牙胚中釉蛋白的表达特征。结果：大鼠出生后第1～14天釉蛋白在成釉细胞中的表达随细胞的分化、基质分泌而变化。釉蛋白在出生后第1天的成釉器前成釉细胞中表达为阴性，但在沿牙尖斜面的进入分泌期成釉细胞中表达阳性；在出生后3天的分泌期成釉细胞胞浆中表达阳性，在刚分泌形成的釉牙本质界呈强阳性表达；在出生后第7天的分泌期成釉细胞胞浆中表达阳性，在未矿化完全的釉质基质中为强阳性表达，且釉蛋白随矿化的程度不同而表达强弱不同；在出生后第10天的大鼠牙胚中釉蛋白仅在成熟期成釉细胞中有较弱的阳性表达，在矿化变薄的剩余釉质基质中仍有阳性表达；在出生后第14天的大鼠牙胚中，釉蛋白表达阴性。结论：釉蛋白由成釉细胞分泌，最初分布于釉牙本质界，位于发育中的釉质全层，随釉质成熟而逐渐减少，至釉质完全形成后而表达停止，提示釉蛋白在釉质形成中可能有重要作用。
- 吕平高学军高岩贾弘禔
- 关键词：牙釉质蛋白质类牙胚免疫组织化学
