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补肾活血含药血清对成骨细胞经典Wnt/β-catenin通路的影响研究被引量：31: 2015年; 目的：通过观察补肾活血含药血清对成骨细胞的经典Wnt/β-catenin信号通路的影响,探究补肾活血颗粒防治骨质疏松症（osteoporosis,OP）的作用机制。方法：将20只健康SD雌性大鼠随机分为补肾活血组和生理盐水组,每组10只,分别给予补肾活血溶液和生理盐水进行灌胃1周,按照药物含药血清制备方法得到补肾活血含药血清和生理盐水含药血清。采用体外分离乳鼠颅骨按照酶消法培养细胞,通过瑞氏-姬姆萨（R-J）染色观察细胞形态及碱性磷酸酶（ALP）染色进行成骨细胞的鉴定,鉴定成功后取第3代成骨细胞分为生理盐水含药血清组、正常培养基组及补肾活血含药血清组,加入含15%相应的含药血清的培养基培养后检测成骨细胞的ALP含量及增殖率,观察各组的矿化结节的情况,采用RT-PCR检测β-catenin、Runx2、Osx m RNA的表达。结果：培养的细胞经过瑞氏-姬姆萨染色显示胞浆有蓝色颗粒,细胞核呈紫褐色,有的可见1~3个核仁,呈现传代后的成骨细胞的形态,且ALP染色可见胞浆内含紫红色颗粒,表明培养的细胞是成骨细胞。补肾活血含药血清组细胞的ALP含量为（6.272±0.131）金氏单位/100 ml,增殖率为（0.81±0.172）%,与生理盐水含药血清组比较能够明显增强成骨细胞的增殖分化活性（P〈0.01）;补肾活血含药血清组细胞经过茜素红染色可见4个不同大小的橘红色结节,最大1.0 cm×1.0 cm,能够明显的促进成骨细胞的矿化功能;RT-PCR检测发现β-catenin、Runx2及Osx m RNA表达量分别为（1.782±0.944）、（1.935±0.994）、（1.610±0.811）,与生理盐水组比较有明显的提高（P〈0.01）,但与正常培养基组比较无明显差异（P〉0.05）。结论：补肾活血含药血清能够明显促进成骨细胞的分化增殖及矿化功能,并且推测激活经典Wnt/β-catenin信号通路可能是补肾活血颗粒防治骨质疏松症的作用机制。; 许兵金红婷王萧枫肖鲁伟童培建; 关键词：成骨细胞血清中草药

补肾活血方对去势大鼠骨质疏松的影响被引量：27: 2011年; 目的观察补肾活血方对去势大鼠的血生化、骨密度、生物力学及病理学的影响,评价补肾活血办防治去势大鼠骨质疏松的疗效。方法取36只雌性大鼠随机分为对照组、假手术组和补肾活血组。补肾活血组与对照组大鼠行卵巢切除术,假手术组行假手术处理,均饲养3个月后行病理检查确认造模成功。造模成功后各组大鼠分别给予0.9%氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液、补肾活血中药灌胃,3个月后处死取血分离得到血清,分别检测血清雌激素(E_2)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)。取大鼠腰椎、股骨测量腰椎的骨密度(BMD)和最大承载力、行股骨病理学观察。结果与对照组比较,补肾活血方组大鼠血清E_2升高,差异有统计学意义(P<0.01);骨形成指标ALP、BGP上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,补肾活血组大鼠腰椎BMD及最大承载力均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色病理组织形态观察发现补肾活血方组大鼠骨小梁稍细,无明显变薄,排列尚整齐并连接成网,密度、面积尚正常,部分区域骨小梁间隙略增大,较对照组有明显改善。结论补肾活血方能够提高去势大鼠雌激素水平,促进骨形成,增加骨量,提高骨组织的力学性能,改善骨组织状况,达到防治骨质疏松的疗效。; 许兵方剑利刘慧鲍航行肖鲁伟童培建; 关键词：骨质疏松血生化生物力学补肾活血

补肾活血颗粒对去势大鼠肾虚证的影响及机制研究被引量：9: 2015年; 目的:探讨补肾活血颗粒对去势大鼠的肾虚症状的改善作用及作用机制,为临床防治骨质疏松症采用补肾治本的原则提供理论依据。方法:24只雌性大鼠单纯随机分为补肾活血组、模型组、假手术组,每组8只。补肾活血组与模型组麻醉后行双侧卵巢切除术,假手术组麻醉后行假手术处理,饲养3个月确认造模成功后各组分别给予补肾活血颗粒、生理盐水、生理盐水灌胃,90 d后进行3 d大鼠的一般情况观察及生理状态的量化检测,然后麻醉下处死大鼠,用电子天平称取垂体、肾、肾上腺、子宫的湿重,采用Elisa法进行ACTH、E2、T3、T4的血清学检测。结果:补肾活血组大鼠的体毛光滑略显稀疏、行动活泼、反应尚可、精神尚佳、食欲可、身体肥胖、略有嗜睡、眼睛明亮、眼角干燥、二便基本正常等表现;活动度、肛温及进食量均高于模型组,存在显著性差异(P<0.01),与假手术组无明显差异(P>0.05);血压与模型组及假手术组比较无明显差异(P>0.05);血清ACTH、E2、T3、T4的水平明显高于模型组,具有显著性差异(P<0.01),与假手术组无明显差异(P>0.05);垂体、肾上腺、肾的湿重均明显高于模型组,存在显著性差异(P<0.01),与假手术组比较无统计学意义(P>0.05),但子宫的湿重高于模型组,低于假手术组,均存在显著性差异(P<0.05)。结论:补肾活血颗粒能够明显的改善去势大鼠的肾虚症状,并且推测调节下丘脑-垂体-靶腺轴是补肾活血颗粒改善去势大鼠肾虚症状的作用机制。; 许兵王萧枫王冠华林忠壮肖鲁伟童培建; 关键词：骨质疏松肾虚补肾活血

成骨细胞中经典Wnt/β-catenin通路研究进展被引量：27: 2011年; Wnt/β-catenin经典通路在成骨细胞的分化增殖中起着重要作用。目前研究表明,调节任何一个经典Wnt/β-catenin信号转导通路中的因子都能影响成骨细胞的分化增殖。总结经典Wnt/β-catenin通路中各个因子与成骨细胞分化增殖的关系,以便进一步具体深入研究经典Wnt/β-catenin通路对成骨细胞的影响。; 许兵刘慧许应星吴岩肖鲁伟童培建; 关键词：成骨细胞 WNT/Β-CATENIN

补肾活血颗粒对去势大鼠血生化的影响被引量：13: 2012年; 目的:观察补肾活血颗粒对去势大鼠血生化一般指标钙(Ca)、磷(P)、雌激素(E2),骨形成指标碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP),骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP5b)、I型胶原C端肽(CTX)、羟赖氨酸糖苷(GHYL)的影响。方法:取24只雌性大鼠切除卵巢造成骨质疏松模型,随机分成补佳乐组、模型对照组、假手术组、补肾活血组4组,各组对应给予补佳乐、0.9%氯化钠溶液、0.9%氯化钠溶液、补肾活血方灌胃3个月,采用全自动生化检测Ca、P、ALP,用ELISA方法检测E2、TRAP5b、BGP、CTX、GHYL。结果:应用补肾活血颗粒后大鼠血生化一般指标Ca、P下降,E2升高,成骨细胞分泌的骨形成指标ALP、BGP升高,胶原蛋白的分解产物CTX、GHYL有所升高,而破骨细胞分泌的TRAP5b并没有明显改变。结论:从血生化可以推测补肾活血颗粒对增强成骨细胞分化增值及活性功能作用明显,而对破骨细胞作用并不显著。; 刘慧许兵方剑利许应星吴岩肖鲁伟童培建; 关键词：骨质疏松血生化补肾活血

经典骨质疏松症模型大鼠的肾虚证研究被引量：22: 2012年; 目的:观察采用双侧卵巢切除术制备的骨质疏松症模型大鼠的一般情况、生理状态,脏器湿重及血清学指标,以验证绝经后骨质疏松模型大鼠的肾虚证表现,为中医药临床防治骨质疏松症采用补肾治本的原则提供一定的理论基础。方法:24只雌性SD大鼠分为3组:模型组、假手术组和正常组。模型组麻醉后行双侧卵巢切除术,假手术组麻醉后行假手术处理,正常组进行麻醉处理。饲养3个月进行股骨的病理组织观察及骨密度检测,确认造模成功后进行大鼠的一般情况观察及生理状态的量化检测。麻醉下处死大鼠,用电子天平称垂体、肾、肾上腺和子宫的湿重,采用ELISA法进行ACTH、E2、T3、T4的血清学检测。结果:骨质疏松模型组大鼠出现体毛稀疏无光泽、畏寒倦卧、群聚角落、精神萎靡、眼睛黯淡、眼球运动慢、反应迟钝、活动迟缓、食欲下降、身体肥胖、嗜睡、大便略稀、小便清长等一系列肾虚证的表现;活动度、肛温及进食量均低于假手术组与正常组;血清ACTH、E2、T3、T4水平均低于假手术组与正常组;肾上腺、肾、子宫的湿重均低于假手术组与正常组。结论:采用经典的骨质疏松症造模方法即双侧卵巢切除术制备的骨质疏松症模型大鼠具有肾虚的器质性及功能性变化表现,骨质疏松症模型大鼠存在肾虚病机,具有肾虚的临床表现。; 许兵刘慧金红婷方剑利肖鲁伟童培建; 关键词：骨质疏松肾虚生理学

补肾活血颗粒对去势大鼠骨组织Wnt/β-Catenin通路的影响研究被引量：21: 2013年; 目的:探究补肾活血颗粒通过经典Wnt/β-Catenin信号通路防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:将36只SD大鼠分成模型组、假手术组及补肾活血组,每组12只,模型组及补肾活血组行双侧卵巢切除术、假手术组行假手术处理进行造模,造模成功后各组分别给予0.9%氯化钠溶液、0.9%氯化钠溶液及补肾活血中药灌胃3个月后处死,检测血清雌二醇(E2)、碱性磷酸酶(ALP)、血钙素(BGP),右侧股骨骨盐密度(BMD)和HE染色及腰椎最大承载力,左侧股骨采用RT-PCR检测β-catenin、Runx2、Osx mRNA的表达。结果:补肾活血组与模型组大鼠相比较,血清E2明显上升(P<0.01);骨形成指标ALP、BGP水平明显升高(P<0.05);股骨BMD与腰椎最大承载力均有提高(P<0.05);HE染色观察发现骨小梁稍细,略有变薄,排列较整齐并能够连接成网,密度、面积尚正常,部分区域骨小梁间隙略有增大;β-catenin、Runx2及Osx的mRNA表达均有明显的提高(P<0.01)。结论:激活经典Wnt/β-catenin信号通路是补肾活血颗粒防治骨质疏松症的可能作用机制。; 许兵金红婷刘慧王萧枫童培建肖鲁伟; 关键词：去势大鼠补肾活血 WNT

补肾活血中药对成骨细胞的影响被引量：10: 2011年; 骨质疏松是以单位体积内骨组织量减少为特点的代谢性骨病变,成骨细胞与破骨细胞的动态平衡是维持正常骨量的关键,其中成骨细胞起到主要作用。中医认为骨质疏松的发病以肾虚为本,血瘀为标,治疗上予以标本兼治,补肾活血为法,多用补肾活血中药治疗取得良好的疗效。现对补肾活血中药对成骨细胞增殖分化及活性的影响研究进行总结,为今后的进一步深入研究提供科研思路。; 许兵陈如平刘慧肖鲁伟童培建; 关键词：骨质疏松成骨细胞补肾活血

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卫生部科学研究基金(WKJ2008-2-032)

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