国家自然科学基金(30572078)
- 作品数：13 被引量：14H指数：3
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- 成骨细胞表达2-氨基乙磺酸转运体
- 2008年
- 通过RT—PCR、蛋白免疫印迹和免疫细胞化学方法检测2-氨基乙磺酸转运体（taurine transporter，TAUT）在成骨细胞的表达。采用[3H]-2-氨基乙磺酸摄取评价成骨细胞TAUT的功能。结果发现TAuTmRNA和蛋白均在成骨细胞表达，在成骨细胞分化过程中，TAUT的功能逐渐增强。
- 袁凌青唐玲丽卢瑛蒋谊罗湘杭廖二元
- 关键词：TAURINE成骨细胞
- Preptin对成骨细胞结缔组织生长因子表达的影响及其机制研究
- 2010年
- 目的 探讨Preptin对成骨细胞结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响及其机制.方法采用人重组preptin干预人原代成骨细胞,CTGF蛋白水平用Western印迹法检测.丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）、c-Jun氨基端激酶（JNK）及其磷酸化水平用Western印迹法检测.在preptin干预前用细胞信号阻断剂（PD98059、SP600125或SB203580）预处理阻断人成骨细胞MAPK信号转导,以分析preptin诱导人成骨细胞CTGF表达的作用机制.结果 Preptin可呈时间和剂量依赖性地促进人成骨细胞CTGF的分泌,并且preptin可诱导人成骨细胞ERK的活化,对p38MAPK或JNK无激活作用;人成骨细胞用ERK抑制剂PD98059预处理可使preptin诱导的CTGF分泌降低.结论Preptin增加CTGF的表达,并通过ERK/MAPK信号途径来介导.
- 汪化文刘幼硕詹俊鲲谢辉伍贤平袁凌青廖二元
- 关键词：PREPTIN成骨细胞结缔组织生长因子胞外信号调节激酶
- 重组人结缔组织生长因子对人成骨细胞增殖、分化及凋亡的影响被引量：4
- 2008年
- 目的研究重组人结缔组织生长因子（rCTGF）对人成骨细胞增殖、分化及凋亡的影响。方法用rCTGF干预体外培养的人成骨细胞，采用[^3H]-TdR掺入法检测人成骨细胞增殖率，α-磷酸萘酚法测定细胞内碱性磷酸酶活性变化，放射免疫法测定骨钙素含量的变化，Western印迹法检测Ⅰ型胶原表达的变化，应用流式细胞仪检测rCTGF对成骨细胞凋亡的影响。结果 rCTGF呈剂量依赖性促进人成骨细胞增殖，200ng／ml rCTGF达最大效应；rCTGF干预显著促进人成骨细胞分化，rCTGF呈剂量依赖性增加Ⅰ型胶原、骨钙素表达及碱性磷酸酶活性；rCTGF干预可显著减少成骨细胞凋亡。结论rCTGF可显著促进人成骨细胞增殖、分化，并抑制人成骨细胞凋亡。
- 隋国良彭依群何玉玲翟木绪廖二元
- 关键词：结缔组织生长因子成骨细胞骨质疏松增殖
- 脂联素调控人成骨细胞OPG／RANKL表达的信号转导机制
- 2008年
- 目的研究脂联素调控人成骨细胞护骨素（OPG）和NF-κB受体活化因子配体（RANKL）表达的作用机制。方法人成骨细胞OPG和RANKLmRNA的表达以实时PCR检测，p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、细胞外信号调节激酶（ERK1／2）、c-Jun氨基端激酶（JNK）的磷酸化水平用Western印迹法检测。应用小分子RNA干扰技术（siRNA）阻断脂联素受体（AdR）表达，并以p38MAPK抑制剂（SB203580）和JNK抑制剂（SP600125）干预，以观察脂联素对人成骨细胞OPG／RANKL作用的调节机制。结果用siRNA沉默AdR1的表达可消除脂联素促进人成骨细胞RANKL表达和抑制OPG表达的作用；脂联素干预前予SB203580阻断p38MAPK后，也可消除脂联素对成骨细胞RANKL和OPG的作用，而SP600125并无作用。结论在人成骨细胞中，脂联素通过AdR1／p38MARK途径促进RANKL表达和抑制OPG的表达。
- 刘幼硕罗湘杭袁凌青谢辉詹俊鲲廖二元
- 关键词：脂联素成骨细胞护骨素丝裂原活化蛋白激酶
- 重组人结缔组织生长因子对人成骨细胞膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2表达的影响被引量：3
- 2011年
- 使用重组人结缔组织生长因子（recombinant human connective tissue growth factor,rCTGF）干预体外培养的人成骨细胞,发现rCTGF可呈时间-剂量依赖性地促进人成骨细胞膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2的表达,200 ng/ml CTGF作用24～48 h达最大效果.rCTGF可明显增强p38丝裂原活化的蛋白激酶（p38-MAPK）磷酸化,p38-MAPK阻断剂SB 23058可阻断rCTGF上调膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2的效应.
- 隋国良彭依群何玉玲翟木绪廖二元
- 关键词：重组人结缔组织生长因子成骨细胞膜型基质金属蛋白酶-1基质金属蛋白酶-2
- 重组人结缔组织生长因子对人成骨细胞骨保护素/RANKL表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的 研究重组人结缔组织生长因子（CTGF）对体外培养的人成骨细胞骨保护素/RANKL（receptor activator of NF-κB ligand）表达的影响,并探讨重组人CTGF调节骨保护素/RANKL表达的信号转导机制.方法 用重组人CTGF干预体外培养的人成骨细胞,采用Western印迹法检测骨保护素/RANKL蛋白表达水平的变化,同时观察重组人CTGF对人成骨细胞FAK、MAPK磷酸化的影响.结果 重组人CTGF可呈时间-剂量依赖性抑制人成骨细胞RANKL的表达,200 ng/ml重组人CTGF作用24～48 h达最大抑制效果,而对人成骨细胞骨保护素的表达无明显影响.重组人CTGF可明显增强p38MAPK磷酸化,并减少FAK磷酸化,重组人CTGF干预对ERK、JNK磷酸化无明显影响;p38MAPK阻断剂SB23058可阻断重组人CTGF对RANKL表达的抑制效应.结论 重组人CTGF通过增强p38MAPK磷酸化,减少FAK磷酸化下调人成骨细胞RANKL的表达.
- 隋国良彭依群何玉玲翟木绪廖二元
- 关键词：结缔组织生长因子成骨细胞骨保护素RANKL
- 脂联素对人成骨细胞护骨素和核因子KB受体活化素配体表达的调节
- 2008年
- 目的探讨脂联素对人成骨细胞护骨素（OPG）和核因子xB受体活化素配体（RANKL）表达的作用。方法RT-PCR及Western印迹检测体外培养的人成骨细胞的脂联素受体（AdipoR）mRNA及AdipoR蛋白表达。分别用0、3、10μg／ml和30μg／ml脂联素干预人成骨细胞48h以观察剂量效应和分别用0、30μg／ml脂联素干预人成骨细胞0、12、24h和48h以观察时间效应，干预前后OPG、RANKL的mRNA及蛋白表达分别用实时聚合酶链反应（real—timePcR）和ELISA检测。结果（1）人成骨细胞可表达AdiopR1mRNA、AdiopR1蛋白和AdiopR2mRNA。（2）30μg／ml脂联素干预人成骨细胞12、24h或48h后，OPG的mRNA表达分别为0h的（69±6）％、（51士7）％和（26±8）％（Pd0．05），OPG蛋白表达分别为0h的（66±5）％、（32士8）％和（14士6）％（P％0．05）；RANKL的mRNA表达分别为0h的（180±12）％、（220士19）％和（316士14）％（P％0．05），可溶性RANKL（sRANKL）蛋白的表达分别为0h的（236±12）％、（272±9）％和（308±14）％（P〈O．05）。（3）3、10ug／ml或30ug／ml脂联素干预人成骨细胞48h时，OPG的tuRNA表达分别为对照组的（66±9）％、（44±10）％和（29±7）％（P〈O．05），OPG蛋白的表达分别为对照组的（52±9）％、（38±4）％和（17±4）％（P〈O．05）；RANKL的mRNA表达分另4为对照组的（168±6）％、（214±7）％和（314±11）％（P〈0．05），sRANKL蛋白的表达分别为对照组的（156±6）％、（196±8）％和（212±7）％（P〈0．05）。结论脂联素呈时间和剂量依赖性调节人成骨细胞OPG和RANKL的表达，可能是新的骨代谢调节因子。
- 刘幼硕罗湘杭袁凌青谢辉詹俊鲲廖二元
- 关键词：脂联素成骨细胞护骨素
- 牛磺酸通过ERK1／2途径促进成骨细胞结缔组织生长因子表达被引量：2
- 2009年
- 探讨牛磺酸对小鼠成骨细胞MC3T3-E1中结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响及作用途径。结果发现牛磺酸可通过细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）信号途径促进成骨细胞的CTGF表达。
- 蒋谊魏启幼袁凌青廖二元
- 关键词：牛磺酸成骨细胞结缔组织生长因子细胞外信号调节激酶
- 17β-雌二醇下调人成骨样MG63细胞结缔组织生长因子表达机制的研究
- 2007年
- 10μmol／L雌二醇可明显下调人成骨样MG63细胞结缔组织生长因子（CTGF）。RNA及蛋白的表达；蛋白激酶A（PKA）阻断剂H-89可完全阻断雌二醇对CTGF的降调节作用。PKA活化剂forskolin可模拟雌二醇作用，明显下调人成骨样MG63细胞CTGF mRNA、蛋白的表达。17β-雌二醇下调人成骨样MG63细胞CTGF表达由PKA介导。
- 隋国良彭依群翟木绪何玉玲廖二元
- 关键词：雌二醇结缔组织生长因子
- 17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制。方法人成骨细胞分别用10-8mol/L E2及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA阻断剂H-89、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC、PKA活化剂forskolin干预24h,采用Northern blotting、Western blotting分析CTGF mRNA、蛋白表达水平的变化。结果10-8mol/L雌二醇可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA及蛋白的表达;PKA阻断剂H-89可完全阻断雌二醇对CTGF的降调节作用,而雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC对雌二醇介导的CTGF降调节无明显作用。PKA活化剂forskolin可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA、蛋白的表达,雌二醇组与forskolin组相比,CTGF mRNA、蛋白的水平无明显差异。结论17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达由PKA介导,雌激素核受体、PKC、NF-κΒ信号转导通路均不参与雌激素介导的CTGF降调节。
- 隋国良彭依群翟木绪何玉玲廖二元
- 关键词：17Β-雌二醇结缔组织生长因子成骨细胞
