国家教育部博士点基金(20060558046)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：古洁若赵丽珂余得恩更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院加州大学北京医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子对HLA-B27启动子的调节作用及其在强直性脊柱炎发病机制中的意义被引量：5
- 2007年
- 目的:构建含HLA-B27启动子的HeLa稳定转染细胞株,观察7种细胞因子对HLA-B27启动子及其上游NF-κB及ISRE顺式作用元件活性的调节作用,探讨强直性脊柱炎(AS)等B27相关疾病的发生机制。方法:转染HeLa细胞,抗生素筛选单克隆构建含HLA-B27启动子的稳定转染细胞株。构建HeLa-B27稳定细胞株和HeLa-NF-κB稳定细胞株,在瞬时转染pISRE-luc的HeLa细胞中加入白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β),观察7种细胞因子对B27启动子及其上游NF-κB和ISRE作用元件的调节作用。另外在HeLa-B27稳定细胞株培养液中同时加入3种细胞因子单克隆抗体和相应细胞因子,观察其对启动子活性的调节作用。结果:TNF-α、IFN-α、IFN-β和IFN-γ均能明显增强HeLa细胞B27启动子活性。细胞培养96h后,IFN-β为最强的启动子诱导剂(5.4倍,P<0.05);细胞培养8h内,TNF-α、IL1-α和IL1-β,可诱导NF-κB的活性增加30倍左右(P<0.05),IFN-α和IFN-β可诱导ISRE的活性增加12倍左右(P<0.05),抗TNF-α抗体对于I类IFN增加的B27启动子活性没有明显的抑制作用。结论:TNF-α和IFN可通过结合于B27启动子中各种转录因子结合元件调控HLA-B27启动子的转录活性,IFN-β可能在强直性脊柱炎等B27相关的脊柱关节病的发病机制中起着重要作用。
- 赵丽珂古洁若余得恩
- 关键词：HLA-B27启动子细胞因子类
- 南蛇藤素和扁蒴藤素显著下调HLA—B^＊2705启动子的活性被引量：3
- 2009年
- 目的:利用高通量药物筛选方式,为寻找潜在的脊柱关节炎(SpA)新的治疗药物提供理论依据。方法:选取12264小分子化合物分别使用293T-HLA-B27和HeLa-HLA-B27稳定细胞株,观察对HLA-B*2705启动子有调节作用的化合物,筛选能够下调HLA-B*2705启动子活性的阳性化合物:启动子活性>150%为激动剂,启动子活性<60%为抑制剂。并且对进一步筛选出的抑制剂进行细胞毒性试验及半数抑制浓度/半数效应浓度(IC50/EC50)检测,筛选出具有较好剂量-效应的阳性化合物。结果:(1)使用293T-HLA-B27细胞第1次筛选出624种阳性化合物,阳性率为5·1%;(2)使用HeLa-HLA-B27细胞株对上述624种化合物进行再次筛选,有70种化合物再次显示出对B*2705启动子活性的增强或者抑制作用;(3)进行EC50/IC50检测的40种化合物中,6种化合物为抑制剂,表现出较好的剂量-效应曲线,其中南蛇藤素和扁蒴藤素均为雷公藤类衍生物。结论:南蛇藤素和扁蒴藤素可下调HLA-B27表达,提示在今后针对HLA-B*2705相关的SpA患者治疗中,它们可能是值得研究的潜在有效化合物。
- 赵丽珂古洁若余得恩
- 关键词：雷公藤属
