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辽宁省自然科学基金(20052187)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：王静云安利佳崔文举窦佳包永明更多>>
相关机构：大连理工大学更多>>
发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇点突变
  • 1篇定点突变
  • 1篇脂酶
  • 1篇磷脂酶
  • 1篇磷脂酶A
  • 1篇磷脂酶A2
  • 1篇酶活性
  • 1篇酶活性分析
  • 1篇基因
  • 1篇基因工程
  • 1篇复性
  • 1篇包涵体复性

机构

  • 1篇大连理工大学

作者

  • 1篇姬芳玲
  • 1篇包永明
  • 1篇窦佳
  • 1篇崔文举
  • 1篇安利佳
  • 1篇王静云

传媒

  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2007
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
Gln49-磷脂酶A_2基因工程定点突变及酶活性分析被引量：1
2007年
为了确认49位谷氨酰胺磷脂酶A2(glutamine 49 phospholipase A2,Gln49-PLA2)酶活性缺失与氨基酸序列的相关性,对Gln49-PLA2编码基因第49位氨基酸进行PCR定点突变,利用pET32a+质粒载体在大肠杆菌中表达Gln49-磷脂酶A2的突变体---天冬氨酸磷脂酶A2(aspartic acid 49 phospholipase A2,Asp49-PLA2-Q49D-PLA2)。将表达的包涵体蛋白变性,采用固定化金属离子亲和层析进行柱上复性、纯化获得突变体融合蛋白(fusion Q49D-PLA2-fQ49D-PLA2);突变体融合蛋白经蛋白水解酶Factor Xa酶切后,采用Hitrap SP阳离子交换层析和Superdex75凝胶层析进一步纯化,得到突变体蛋白Q49D-PLA2,得率为1.3%,比酶活为72U/mg。从而证实Gln49-PLA2酶活性缺失的关键原因是49位氨基酸为谷氨酰胺。
窦佳蔡河姬芳玲崔文举王静云包永明安利佳
关键词：磷脂酶A2包涵体复性
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