中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB01)
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 相关作者:马继红王斌童光志于海闫丽萍更多>>
- 相关机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 快速检测A型流感病毒的Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法的建立被引量:6
- 2010年
- 根据A型流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)基因保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan BHQ探针,建立快速检测A型流感病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆A型流感病毒M基因靶序列并将其连入pMD-18T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.998。检测结果显示,该方法的灵敏度可达10 copies/μL或1 EID50病毒且特异性良好,除A型流感病毒外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪输血传播病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好,批内和批间变异系数均小于3%。对40份实验感染样品的检测结果表明,该方法与病毒分离结果一致,比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高,特异性更强。
- 马继红于海周艳君李国新闫丽萍张善瑞王斌童光志
- 关键词:A型流感病毒TAQMAN探针实时荧光定量RT-PCR