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国家高技术研究发展计划(2013AA102703): 作品数：32 被引量：154H指数：8; 相关作者：孙宇涵李云苏晓华杨敏生丁昌俊更多>>; 相关机构：北京林业大学河北农业大学南京林业大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家林业局科技发展中心项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

窄冠型杨树杂交子代SRAP鉴定及其遗传变异研究被引量：6: 2018年; 为鉴定杨树杂交子代真实性及阐明子代群体的遗传关系,本研究以窄冠型杨树的7个杂交子代群体和亲本为试验材料,并采用SRAP分子标记技术对其进行子代真实性鉴定及遗传变异研究。从110对引物中筛选出了8对多态性高,主条带清晰且稳定的引物,对7个杂交子代群体扩增,共产生126条谱带,其中多态性带为118条,多态带比例(PPB)达93.65%;基于Pop Gen 32软件对7个杂交组合的遗传多样性分析表明,派内杂交时,黑杨派内杂交子代的遗传多样性水平低于白杨派内的遗传多样性水平;派间杂交时,白杨做母本的子代遗传多样性比黑杨做母本的遗传多样性丰富。对其中4个杂交组合的当年杂种苗的生长量、形质指标与其亲本间遗传距离进行相关性分析,结果表明,亲本间遗传距离与苗木的地径、苗高成正相关,与其分枝角度成负相关。70个杂交子代均具有父本特征带,且经鉴定全部为真杂种,本试验结果为杨树杂交亲本的筛选及杂交子代早期鉴定提供了一定的理论依据和技术参考。; 田彦挺李际红王锦楠许东王艺玮邢世岩; 关键词：SRAP分子标记

毛果杨PtrAP1-2基因启动子的克隆及其瞬时表达分析被引量：5: 2013年; 为了研究杨树AP1同源基因的表达规律,利用PCR技术从毛果杨基因组DNA中克隆出PtrAP1-2基因上游一段2103bp序列。联合使用PLACE和PlantCARE在线软件分析序列,结果表明该序列含有TATA-box和CAAT-box启动子基本元件,另外含有MRE、GT1-motif、AE-box、TCT-motif和Box4多种光响应元件,因此,PtrAP1-2可能与植物开花过程紧密相关。在序列分析的基础上,构建了PtrAP1-2基因启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,命名为PtrAP1-2pro::GUS。利用农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草,结果表明PtrAP1-2启动子可以驱动GUS基因在烟草萼片和花瓣中特异表达,在根、茎、叶、雄蕊和心皮等其他组织部位里没有GUS表达活性,这表明PtrAP1-2pro为花器官特异表达启动子。; 陈仲王佳安新民; 关键词：启动子 GUS

江苏省熏衣草根结线虫种类鉴定: 2018年; 根结线虫在中国广泛分布,能够寄生数千种作物,然而薰衣草上根结线虫的病害的发生及系统鉴定目前鲜有报道。本研究对薰衣草根结线虫病的症状进行观察,并进行了病原线虫的分离和形态学及分子鉴定。结果表明该病害由南方根结线虫侵染引起,侵染严重时根组织发黑溃烂,地上茎部呈黄褐色,叶片萎蔫发黄。利用分离的根结线虫卵块接种生长6周的健康薰衣草植株,接种10周后植株根组织出现严重根结症状,与自然发病相似。从根结中再次分离得到根结线虫经鉴定为南方根结线虫。本研究首次表明薰衣草根结线虫病害由南方根结线虫引起。; 陈曦冯辉张金凤卢小雪魏利辉; 关键词：南方根结线虫薰衣草形态学

利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究: 2016年; [目的]利用不同于抗生素的PMI为选择标记基因的遗传转化体系,对杨树进行双抗虫基因(Bt和Cp TI)的转基因研究。建立杨树以PMI为安全标记基因的转基因体系,为安全、高效的林木转基因育种研究提供实验依据。[方法]选择已有的转Cp TI抗虫基因(利用Kmr选择标记获得)的美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨(Populus×euramericana‘Nanlin895’)为受体材料,对杨树叶片、叶片分化芽、茎段生根的甘露糖敏感性等筛选优化,采用农杆菌介导的方法进行双抗虫基因的研究。[结果]较为适合的杨树叶片筛选培养基为:甘露糖8 g·L^(-1)和蔗糖22 g·L^(-1);叶片分化芽筛选培养基为:甘露糖10 g·L^(-1)和蔗糖20 g·L^(-1);茎段生根筛选培养基:甘露糖8 g·L^(-1)和蔗糖22 g·L^(-1)。在此基础上,获得了转Bt和Cp TI双抗虫基因的植株8株。[结论]初步建立了以PMI为安全标记基因的杨树转基因体系:确定了PMI筛选的最适选择压,成功构建了含PMI选择标记基因的植物抗虫表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化最终获得了转双抗虫基因植株。; 查琳王伟东续晨诸葛强; 关键词：PMI 南林895杨转基因体系抗虫

杨树MAGPIE和JACKDAW基因克隆、表达及蛋白互作研究被引量：3: 2014年; 利用RACE技术从杨树不定根中克隆获得PeMGP和PeJDK基因全长cDNA序列,分别包含1 434 bp和1 518 bp长度的开放阅读框。两者都含2个内含子,其氨基酸序列均有4个保守结构域:2个C2H2型锌指结构域ZF1(CX2-4CX3FX4LX2HX3-5H)和ZF2(CX4CXnHXnX4H),2个C2HC型锌指结构域ZF3(CX2CXnHX3C)和ZF4(CXCXnHX3C)。在根茎叶中均检测到PeMGP和PeJKD基因的表达,但它们在杨树不定根发育过程中具有动态的表达模式。杨树原生质体瞬时表达揭示,PeMGP和PeJDK蛋白都定位于细胞核,两者在细胞核发生相互作用。; 宣磊胥猛徐立安黄敏仁; 关键词：基因表达模式

南林895杨树GmNHX1基因的转入及其耐盐性分析被引量：8: 2014年; 将大豆中编码Na+/H+离子逆向转运蛋白的GmNHX1基因构建到植物表达载体pGWB402Ω,通过农杆菌侵染叶盘法转化南林895杨树(Populus deltoides×P.euramericana cv.‘Nanlin895’),PCR检测和Southern杂交结果表明,GmNHX1基因已经整合入南林895杨树基因组.对转GmNHX1基因的南林895杨树耐盐性的生理生化指标进行检测,结果表明GmNHX1基因的表达能够提高转基因杨树的耐盐性.; 孙伟博邓大霞杨立恒诸葛强; 关键词：GM 转基因盐胁迫

浅谈国内外杂草控制方法被引量：22: 2018年; 笔者通过对近年来国内外杂草控制方法的研究进行归纳总结,指出各种杂草控制方法的优缺点,并对未来国内杂草治理的发展方向进行讨论和展望,旨在进一步提高并扩大非化学除草方法的应用范围,改善国内杂草治理高度依赖化学除草剂的现状,以期为未来杂草的综合治理提供理论依据。; 吕威董黎孙宇涵李云; 关键词：杂草控制化学除草

烟草BtCry1Ac基因叶绿体转化载体的构建与验证被引量：1: 2018年; 叶绿体是外源基因表达的理想场所。为了探究植物叶绿体转化技术,本研究成功构建了BtCry1Ac基因的烟草叶绿体转化载体,其中以aad A基因作为筛选标记,叶绿体基因组同源片段选用rbcL基因与acc D基因。采用基因枪轰击法进行叶绿体转化,以壮观霉素300 mg/L作为初筛浓度,并逐步提高筛选压力,经过3轮筛选后,通过PCR检测,有6个株系检测到了外源Bt基因;同时进行的毒蛋白测定中,有5个株系可检测到Bt毒蛋白,但表达量普遍偏低,T-4的毒蛋白含量最高,为19.32 ng/mL,说明烟草叶绿体基因组中还有大量拷贝没有完全同质化。通过对烟草叶绿体载体构建及转化技术的摸索,将为未来开展其它植物的叶绿体转化研究提供参考。; 杨润蕾董研于晓月杨敏生; 关键词：烟草叶绿体转化同质化

实验田4年生转基因毛白杨嫁接苗和自根苗安全性研究: 2022年; [目的]对种植于天津滨海的自根苗转AhDREB1基因毛白杨((Populus tomentosa×P.bolleana)×P.tomentosa)以及种植于沧州盐山的嫁接苗转基因株系进行安全性研究,评估转基因毛白杨对环境可能造成的影响。[方法]利用PCR扩增以及电泳技术,对种植在天津滨海和沧州盐山实验田的4年生转基因毛白杨基因组DNA、土壤DNA、沧州嫁接苗砧木DNA以及抗性微生物基因组DNA进行PCR特异性检测。对天津实验田土壤中根际微生物数量进行连续动态监测(3月、4月、5月)。分别在天津滨海和沧州盐山实验田模拟自然条件下转基因毛白杨植株枯落物掉落,检测不同生长阶段的不同器官(新生嫩芽、多年生枝条、新生根尖、多年生侧根、新生嫩叶、当年生老叶)的降解时间。通过化感实验,检测天津滨海和沧州盐山实验田转基因毛白杨植株叶片对白菜(Brassica pekinensis)种子的生长是否造成影响。[结果]电泳结果显示:外源基因稳定存在于转基因毛白杨基因组中,实验田土壤DNA、抗性微生物DNA样品以及沧州嫁接苗砧木DNA中均未出现目的基因片段;天津非转基因植株和转基因植株的根际土壤中可培养微生物数量没有显著差异;转基因毛白杨的枯落物,无论是飘落在杂草表面、土壤表面还是埋入土壤,2个月后外源基因均被降解。化感实验结果显示:非转基因植株以及转基因植株对白菜种子的胚轴和胚根生长的影响没有显著差异。[结论]未发现实验田种植4 a的转基因毛白杨对周围的环境造成影响。; 侯荣轩赵烨田彦挺佀化玙张华新李娟纪清巨杨庆山孙宇涵李云; 关键词：基因水平转移土壤微生物数量

8年生转基因库安托杨外源基因转移及对土壤微生物数量影响的检测被引量：9: 2017年; [目的]评价转基因库安托杨可能引起的生态风险。[方法]利用PCR扩增研究外源基因水平转移情况,利用稀释平板法研究土壤中细菌、真菌和放线菌数量。[结果]电泳结果显示:林下杂草混合样品和土壤微生物DNA样品中均未出现目的基因片段。转基因株系和非转基因株系的非根际土壤中可培养的细菌、真菌和放线菌数量在杨树的不同生长期出现一定的变化,但是这种变化没有明显的规律。[结论]8年生转基因库安托杨未出现外源基因水平转移,也未对土壤微生物的数量产生显著影响。; 朱文旭丁昌俊张伟溪张冰玉黄秦军褚延广苏晓华; 关键词：基因水平转移土壤微生物生态安全性

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