江苏省自然科学基金(BK20131332)
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 相关作者：方晓敏任守文赵芳赵为民涂枫更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院南京农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 稳定表达猪CYP3A29基因的PAM细胞系构建及鉴定
- 2014年
- 为获得稳定表达CYP3A29基因的猪肺泡巨噬细胞系,利用RT-PCR方法获取猪CYP3A29基因序列后与克隆载体PMD18-T相连,得到PMD18-T-CYP3A29重组质粒并测序验证,利用Xho I和Not I双酶切重组质粒及pcDNA3.1(+)/zeo,回收后连接,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)/zeo-CYP3A29,双酶切及测序验证其正确性,并以脂质体2000将其转染至猪肺泡巨噬细胞系3D4/21,经Zeocin抗性筛选,借助RT-PCR及Wesrern-blot鉴定该基因的表达情况。结果表明,成功获得表达CYP3A29的细胞株,且连续培养10代后,RT-PCR及Wesrern-blot仍能检测到该基因表达。说明,稳定表达CYP3A29基因的猪肺泡巨噬细胞系构建成功,该细胞系的成功构建为进一步研究分析猪CYP3A29基因的功能提供了可能。
- 郅西柱方晓敏赵芳周艳红涂枫李碧侠王学敏任守文
- 关键词：肺泡巨噬细胞
- 2种不同杂交组合生产的优质杂种猪性能比较被引量：3
- 2016年
- 为筛选优质黑猪生产杂交方式,以淮猪及苏钟猪为亲本,开展淮猪(♂)×苏钟猪(♀)、苏钟猪(♂)×淮猪(♀)正反、反正杂交试验,在相同营养水平及饲养管理条件下统计杂种猪繁殖、生长、肥育性能,比较2种杂交方式生产杂种猪的性能。结果表明:淮苏杂种猪头胎产仔数[(11.86±2.21)头]高于苏淮杂种猪[(10.89±2.20)头],但产活仔数略低于苏淮杂种猪;初生个体质量[(1.41±0.22)kg]极显著小于苏淮杂种猪[(1.52±0.35)kg](P<0.01),但28日龄断奶个体质量、120日龄平均个体质量均高于苏淮杂种猪,180日龄平均个体质量、40~60 kg阶段平均日增质量略低于苏淮杂种猪,提示淮苏杂种猪虽早期增质量快,但育肥期效果不如苏淮杂种猪;且淮苏杂种猪表现为高、短、壮体型,而苏淮猪相对细长。因而,生产75%优质黑猪应以后期育肥效果好的苏淮杂交组合为优势选择。
- 方晓敏涂枫王学敏李碧侠付言峰赵为民赵芳任守文
- 关键词：淮猪苏钟猪
- 恶性高温综合征患猪基因表达变化及生物信息学分析
- 2014年
- 为揭示猪发生恶性高温综合征后基因表达改变,分析基因表达变化在疾病发展过程中的生物学意义,取恶性高温综合征病猪和健康对照猪各3头,采用表达谱基因芯片检测患猪与健康猪的基因表达差异,借助NCBI、NETWORK数据库对差异基因的功能、信号传导途径及其表达改变在猪恶性高温综合征病程发展中的意义作生物信息学分析。结果表明,高温综合征患猪较健康对照出现表达上调基因30个,下调基因108个,GO分析生物学功能聚为免疫防御调节、生化调节、有机物应激调节等几大类,富集信号传导途径26条,其中猪组织相容性复合体SLA-DMA介导的免疫防御调控通路在猪恶性高温综合征中扮演重要角色。恶性高温综合征患猪stefinA1、APOD、SLA-DMA基因的表达改变导致免疫功能紊乱影响疫病进展。
- 方晓敏涂枫任守文王学敏李碧侠付言峰赵为民赵芳
- 关键词：基因表达生物信息学
- 猪支原体肺炎发生的品种敏感差异及分子基础被引量：16
- 2015年
- 【目的】检测并验证猪支原体肺炎发生的品种敏感差异,筛选相关差异表达基因,探究猪支原体肺炎发生的分子遗传基础,为猪该病发生的分子机制研究提供依据。【方法】以对肺炎支原体易感的梅山猪、耐受的长白猪及二者杂交选育的苏钟猪为材料,设立试验组(15头/品种)和对照组(5头/品种),试验组猪接种肺炎支原体Js强毒株,对照组猪注射等量生理盐水,所有猪隔离、无抗生素饲养,监测临床表现;处理后18、28 d测定日增重、抗体水平及肺部病变,28d试验结束时集中屠宰,评定肺部损伤,检测病原,确定肺炎支原体感染情况;选择肺炎支原体感染的梅山、长白、苏钟猪各2头,未感染猪各2头,构成芯片杂交试验猪群,应用Agilent猪表达谱基因芯片及品种内、品种间双重比较法,筛选差异表达基因,结合Gene Ontology(http://www.geneontology.org)及KEGG(http://www.genome.jp/kegg/)分析差异基因涉及的信号通路及调控网络。【结果】肺炎支原体处理后1—18d,试验组猪平均日增重显著低于对照猪(0.01
- 方晓敏赵为民付言峰涂枫李碧侠王学敏赵芳任守文
- 关键词：支原体肺炎分子基础
- CYP1A1与PPAR-γ在猪肺炎支原体感染炎性反应调控中的作用关系被引量：6
- 2016年
- 为研究猪CYP1A1基因表达变化对肺炎支原体感染的影响,探讨CYP1A1与过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)在肺炎支原体感染炎性反应过程中的作用关系,通过基因克隆及真核表达载体构建,获得猪CYP1A1基因全长编码序列真核载体,借助细胞转染和抗性筛选技术获取稳定表达CYP1A1基因的猪肺泡巨噬细胞系,构建猪肺炎支原体细胞感染实验模型,分析炎症反应前后CYP1A1与PPAR-γ间的表达变化关系。结果显示:在肺炎支原体感染PAM细胞的炎性反应过程中,PPAR-γ与CYP1A1表达呈明显的正相关,并参与炎症调控,揭示猪肺炎支原体感染过程中CYP1A1基因可通过调控PPAR-γ发挥抑炎作用。
- 徐杰赵为民任守文赵芳周艳红李惠侠方晓敏
- 关键词：CYP1A1PPAR-Γ支原体肺炎炎症反应
