北京市自然科学基金(7072033)
- 作品数：10 被引量：126H指数：6
- 相关作者：李林张兰叶翠飞李雅莉刘莹更多>>
- 相关机构：首都医科大学宣武医院首都医科大学首都医科大学附属北京儿童医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 阿尔茨海默病转线粒体DNA细胞模型胞质钙稳态的改变被引量：3
- 2011年
- 目的观察阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转线粒体DNA细胞模型胞质游离钙水平,探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)缺陷在AD发病中的作用。方法 将正常青年人、正常老年人和AD患者的血小板分别与无mtDNA细胞融合,建立转mtDNA细胞模型。采用微测量法测定细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)的活性;用荧光探针Fluo-3标记胞质内游离钙离子,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察细胞胞质钙离子荧光强度。结果 AD转mtDNA细胞COX活性与正常老年对照相比差异有统计学意义(P<0.05);静息状态胞质钙离子浓度升高,氧化磷酸化解耦联剂CCCP刺激后胞质钙离子的调节能力明显降低。结论 AD患者线粒体存在COX缺陷,使线粒体钙库功能下降,导致细胞内胞质钙稳态失衡。
- 张兰刘芳万岁桂贾建平李林
- 关键词：阿尔茨海默病线粒体细胞色素C氧化酶胞质钙
- 淫羊藿苷对基因转染PC12细胞α-突触核蛋白过表达和泛素-蛋白酶体系统的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察淫羊藿苷在体外试验中对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)及相关蛋白表达的影响及其作用机制。方法 不同浓度的淫羊藿苷与转染α-Syn基因PC12细胞共孵育24h,应用RT-PCR法检测各组细胞α-Syn mRNA含量,Western免疫印迹法检测细胞中α-Syn、泛素化蛋白羧基端水解酶(Ubiquitin C-terminal hydrolase protein,UCH-L1)和Parkin蛋白的表达,观察淫羊藿苷对它们的影响。结果 淫羊藿苷浓度40～80μmol/L与转染α-Syn基因细胞孵育24h,能够明显减少模型细胞中α-SynmRNA含量,抑制Syn蛋白表达和聚集,增强UCH-L1和Parkin蛋白表达。结论 淫羊藿苷在体外对基因转染细胞的α-Syn过表达和聚集有明显抑制作用,其作用机制与抑制α-Syn合成和增强α-Syn降解有关。
- 刘莹张兰李雅莉李林
- 关键词：淫羊藿苷淫羊藿Α-突触核蛋白泛素-蛋白酶体系统PC12细胞体外试验
- APP转基因拟痴呆小鼠模型脑内α-synuclein的增龄改变被引量：8
- 2007年
- 目的:观察不同时程APP转基因拟痴呆小鼠脑内α-synuclein的改变,以探讨α-synuclein在AD发病中的作用。方法:拟AD动物模型为4月龄、10月龄和16月龄APP695V717I转基因小鼠;同背景同月龄C57BL/6J小鼠设为正常对照组。表达谱基因芯片、RT-PCR方法检测皮层、海马mRNA表达改变;Western blotting、免疫组化法检测蛋白表达的改变。结果:α-synuclein mRNA表达在不同时程APP转基因小鼠脑内均明显增多。α-sy-nuclein蛋白表达在早期4月龄APP转基因小鼠即显著上调,10月龄继续增多,16月龄继续上调并形成蛋白的异常聚集。结论:APP转基因小鼠脑内AD老年斑非Aβ主要成分α-synuclein表达明显增多,并随增龄不断加重,可能是模型小鼠学习记忆障碍及AD发病的重要因素。
- 张兰于顺邢颖叶翠飞陈彪李林
- 关键词：APP转基因小鼠突触核蛋白
- 二苯乙烯苷对基因转染PC12细胞α-突触核蛋白过表达和泛素-蛋白酶体系统的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)在体外实验中对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)过表达的影响及其作用机制。方法不同浓度的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞共孵育24 h,应用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶漏出法确定该药对培养细胞的无毒范围,RT-PCR法检测细胞中α-Syn mRNA含量的变化,蛋白质印迹(Western blotting)法检测α-Syn、泛素化蛋白羧基端水解酶(UCH-L1)和parkin蛋白的表达,观察TSG对它们的影响。结果 TSG对培养细胞的无毒范围为6.25～100μmol.L-1。在此剂量范围内的TSG与α-Syn基因转染PC12细胞孵育24 h,能够明显减少模型细胞α-Syn mRNA含量,抑制α-Syn蛋白表达和聚集,增强UCH-L1和parkin蛋白表达。结论 TSG在体外对基因转染细胞的α-Syn过表达和聚集有明显抑制作用,其作用机制与抑制α-Syn合成和增强α-Syn降解有关。
- 刘莹李林张兰
- 关键词：二苯乙烯苷Α-突触核蛋白PC12细胞体外实验
- 二苯乙烯苷对缺糖缺氧致海马神经元凋亡的影响被引量：11
- 2007年
- 目的:观察中药何首乌有效成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahydrox- ystilbene-2-O-β-D-glucoside,简称二苯乙烯苷,TSG)对缺糖、缺氧诱导的大鼠海马神经元细胞凋亡的影响。方法:采用新生Wistar大鼠进行海马神经元细胞的厚代培养,用连二亚硫酸钠合并无糖培养基处理细胞建立体外缺糖、缺氧模型,用酶标仪测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,TUNEL法检测细胞凋亡,并观察TSG对缺糖、缺氧诱导的细胞凋亡的拮抗作用。结果:模型组与对照组相比,LDH漏出率明显升高、出现了凋亡细胞,胞核致密并有凋亡小体产生。与模型组相比,TSG 10,50和100μmol·L^(-1)能够明显抑制LDH的漏出,降低神经细胞的凋亡率,凋亡细胞数量、面积及灰度均下降。结论:TSG可以抑制缺糖、缺氧诱导的神经元细胞凋亡,对缺血性脑病的治疗具有一定的应用前景。
- 李雅莉赵玲张兰李林
- 关键词：二苯乙烯苷海马神经元缺血细胞凋亡
- Traditional Chinese medicine improves neurological function after focal cerebral ischemia in rats
- OBJECTIVE To investigate the effects of CIG,an ingredient extracted from a traditional Chinese herb Cornus off...
- 杨翠翠
- 文献传递
- 淫羊藿黄酮对APP转基因小鼠学习记忆及β-amyloid生成的影响被引量：15
- 2008年
- 观察不同月龄APP(amyloid precursor protein)转基因模型小鼠学习记忆功能的改变,以及中药有效部位淫羊藿黄酮对10月龄转基因小鼠学习记忆功能和脑内APP、BACE的表达及β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)生成及含量的影响.用药组小鼠自4月龄开始灌胃给予淫羊藿黄酮小(0.03hg·kg-1/d)、大剂量(0.1g·kg-1/d)6个月至10月龄,正常对照组、转基因阴性对照组及模型组以同样方式灌胃给予蒸馏水.应用Morris水迷宫和物体识别方法测试小鼠学习记忆能力,应用免疫组化学及WesternBlot方法分别检测海马CA1区及皮层中APP、BACE的表达,采用双抗体夹心ELISA试剂盒测定海马中不溶性Aβ1-42含量.研究结果表明,APP转基因小鼠在4月龄即出现学习记忆能力障碍,在水迷宫实验中,比转基因阴性对照组小鼠潜伏期延长28%(p<0.05).增龄至10月龄,APP转基因小鼠学习记忆能力明显下降,水迷宫潜伏期及游泳距离与转基因阴性对照组的差异分别加大为40%(p<0.01)和35%(p<0.05),物体识别实验中分辨指数的差异为61%(p<0.05).与正常对照组及转基因阴性对照组相比,10月龄转基因模型小鼠海马CA1区及皮层中APP和BACE的表达明显增加,海马中Aβ1-42的含量明显升高.淫羊藿黄酮大剂量可明显改善10月龄APP转基因小鼠Morris水迷宫作业成绩,提高模型鼠物体识别能力,明显减少APP转基因模型小鼠海马和皮层APP及BACE的表达,降低海马Aβ1-42的含量.提示淫羊藿黄酮能改善APP转基因模型小鼠学习记忆能力和减少Aβ经由淀粉源途径生成及含量,对防治AD等神经退行性疾病具有良好的应用前景.
- 楚晋李林叶翠飞刘莹亚白柳阎晓媛张兰
- 关键词：APP转基因小鼠Β-淀粉样肽Β-分泌酶淫羊藿黄酮
- 中药治疗阿尔茨海默病的作用特点被引量：59
- 2012年
- 阿尔茨海默病(AD)是一种多因素相关的复杂性疾病,目前临床治疗效果不佳.仅针对单靶点或单致病途径的药物不易取得好的疗效.另一个重要原因是干预时机太晚,当诊断出痴呆时患者脑内已有大量神经元死亡.因此,应当针对多靶点、多途径治疗,同时将治疗时机提前到痴呆发生前,才有可能在AD的药物干预领域实现新的突破.本文综述了作者近十多年来在中药治疗AD方面的研究工作,包括中药新复方参乌胶囊、中药提取物何首乌二苯乙烯苷、山茱萸环烯醚萜苷、淫羊藿黄酮和淫羊藿苷对多种拟AD动物模型和细胞模型的影响及其作用机制.这些中药的特点是作用在AD复杂发病机制的多靶点和多途径,尤其是具有神经保护和神经营养/再生作用,且对线粒体和突触具有明显的保护作用,可望用于AD的早期干预或轻度认知障碍期(MCI)的治疗,从而阻止或延缓痴呆的发生与进程.
- 李林张兰
- 关键词：阿尔茨海默病参乌胶囊山茱萸环烯醚萜苷淫羊藿黄酮淫羊藿苷细胞模型
- 二苯乙烯苷对过度表达α-synuclein蛋白的转基因COS-7细胞株的影响被引量：1
- 2008年
- 目的观察二苯乙烯苷（TSG）在体外试验中对COS-7细胞株过度表达α-synuclein蛋白的影响。方法将不同浓度的TSG与转染α-synuclein基因的COS-7细胞共孵育24h,应用二甲基噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率,免疫细胞化学和Western免疫印迹法检测α-synuclein蛋白的表达,观察TSG对其的影响。结果TSG在12.5～200.0μmol/L浓度范围内与COS-7细胞孵育24h不影响细胞存活率,而在免疫细胞化学和Western免疫印迹分析中均显示TSG剂量依赖性地抑制α-synuclein蛋白表达和聚集。结论TSG在体外对COS-7细胞过度表达α-synuclein有明显抑制作用。
- 刘莹李林杨慧李雅莉张兰
- 关键词：二苯乙烯苷何首乌Α-SYNUCLEINCOS-7细胞体外试验
- 何首乌提取物对APP转基因拟痴呆小鼠ERK蛋白表达及磷酸化的影响
- 目的:为探讨细胞信号转导异常在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用,以及中药何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)防治AD的药理机制,观察不同时程APP转基因拟痴呆小鼠脑内ERK蛋白的表达和磷酸...
- 张兰邢颖叶翠飞李林董奇
- 关键词：APP转基因小鼠二苯乙烯苷
- 文献传递
