辽宁省自然科学基金(20052107)
- 作品数：9 被引量：23H指数：4
- 相关作者：林蓓张淑兰郝莹莹朱连成严丽梅更多>>
- 相关机构：中国医科大学沈阳市第四人民医院沈阳市第五人民医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Lewis y抗原促进卵巢癌细胞RMG-I血管内皮生长因子受体的表达被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT)基因转染对卵巢癌细胞系RMG-I血管内皮生长因子受体(VEGFR)的影响。方法:利用已经建立的α1,2-岩藻糖转移酶及Lewisy稳定高表达的RMG-I-H细胞系、裸鼠移植瘤模型,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定基因转染前后细胞中VEGFRmRNA的变化,采用免疫组织化学法测定基因转染前后细胞及裸鼠移植瘤组织中VEGFR蛋白的变化。结果:基因转染后细胞中KDRmRNA表达明显增高(P<0.01),细胞、裸鼠移植瘤组织中KDR蛋白表达也明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Lewisy抗原可能通过VEGF的自分泌和旁分泌途径引起KDR受体数目增多,从而促进肿瘤血管生成,介导卵巢癌的生长、侵袭、转移和耐药等生物学行为。
- 王朋丽林蓓刘晴李妍李飞飞郝莹莹张淑兰
- 关键词：LEWIS血管内皮生长因子受体卵巢癌
- 卵巢浆液性癌中Lewis y抗原表达与耐药相关性研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨Lewis y抗原表达与卵巢浆液性癌耐药的关系。方法 2005-2009年于中国医科大学附属盛京医院应用免疫组化法检测卵巢浆液性乳头状腺癌54例(其中耐药组24例,敏感组30例)中Lewis y抗原的表达情况,并分析其与卵巢癌耐药的关系。结果卵巢浆液性乳头状腺癌耐药组Lewisy抗原的阳性表达率为(91.67%)明显高于敏感组(60.00%),P<0.01;耐药组Lewis y抗原表达强度(0.2426±0.0629)也明显高于敏感组(0.2113±0.0390),P=0.028。Lewis y为耐药相关的独立危险因素(P<0.05)。结论 Lewis y抗原与卵巢浆液性乳头状腺癌化疗耐药相关。
- 胡珍华刘川高嵩高健刘水策刘大我李贝贝白碧玲张淑兰林蓓
- 关键词：卵巢浆液性囊腺癌耐药LEWIS
- 卵巢癌细胞系RMG-Ⅰ Lewis(y)抗原含量变化对其卡铂耐药性的影响被引量：15
- 2008年
- 利用Lewis(y)抗原稳定高表达细胞株RMG-Ⅰ-H,研究细胞表面Lewis(y)抗原含量变化与细胞对卡铂耐药性的关系.利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度卡铂作用后细胞系RMG-Ⅰ-H及其对照组RMG-Ⅰ、RMG-Ⅰ-C的细胞生长抑制率(IR);利用流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡,同时检测药物作用后细胞的凋亡比率;利用荧光染色法和透射电镜进一步观察细胞凋亡状态.结果表明,RMG-Ⅰ-H的半数抑制浓度(IC50)为(58.07±2.42),明显高于对照组RMG-Ⅰ(28.83±3.57)和RMG-Ⅰ-C(25.71±8.24)的IC50(P<0.01),后两者间无统计学差异(P>0.05),流式细胞仪分析证实3组细胞均存在凋亡,经30mg/L、60mg/L卡铂处理后细胞再进行流式细胞仪检测,RMG-Ⅰ-H的相对凋亡率分别为(20.43±0.71)%和(38.11±0.33)%,为对照组的49%～63%,明显低于对照组(P<0.05),2个对照组间比较无统计学差异(P>0.05),荧光染色和透射电镜直接观察了细胞形态变化,每个浓度组RMG-Ⅰ-H的凋亡程度均低于RMG-Ⅰ和RMG-Ⅰ-C.说明细胞表面Lewis(y)抗原含量增加的同时,卵巢癌细胞对卡铂的耐药性增强.
- 赵越林蓓郝莹莹严丽梅刘娟娟朱连成张淑兰
- 关键词：卵巢癌卡铂耐药性
- 转染α1,2-岩藻糖转移酶基因对人卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响被引量：10
- 2008年
- 背景与目的:前期研究证明转染外来α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyl transferase,α1,2-FT)基因后人卵巢癌细胞系RMG-1的恶性生物学行为加强。本研究的目的是探讨转染α1,2-FT基因对卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因表达的影响。方法:将基因表达载体pcDNA3.1-HFT-H和空载体pcDNA3.1转染至RMG-1细胞中分别生成RMG-1-H细胞和RMG-1-C细胞,利用基因芯片对这两种细胞的基因表达序列进行分析,使用GoMiner在线数据库进行信息查询。结果:与RMG-1细胞比较,RMG-1-H细胞中有88种差异性表达基因,其中60种基因表达增强,28种基因表达降低。检索其基因功能,发现在分子功能、生物学行为和细胞成分定位三个分支上,差异表达的基因参与到了诸如蛋白质结合、核苷酸结合,细胞增殖、DNA依赖性转录的调节、信号转导、蛋白氨基酸磷酸化、转录、细胞粘附等多方面。结论:转染α1,2-FT基因使卵巢癌RMG-1细胞的基因表达发生了改变。
- 朱连成林蓓郝莹莹李飞飞刁斌张淑兰
- 关键词：基因表达谱寡核苷酸芯片
- 核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义
- 2010年
- 目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤以及正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72.73%(24/33)、54.55%(6/11)、15.38(2/13)%和8.3%(1/11),E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中的阳性表达率明显高于在浆液性囊腺瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率(P均<0.05),卵巢浆液性囊腺癌组的阳性表达率值虽然高于交界性浆液性囊腺瘤组,但是两组之间差异无统计学意义(P>0.05),浆液性囊腺瘤的阳性表达率接近正常卵巢组的2倍,但是两组之间的阳性表达率差异也无统计学意义(P>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的阳性表达率随手术病理分期的增加而增加(P<0.05),但与病理分级以及有无淋巴结转移无关(P均>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的表达水平随手术病理分期的增加、病理分级降低而增加(P均<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中核转录因子E2F2呈现明显的高表达,且其表达水平与手术分期、病理分级相关,提示E2F2在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。
- 伊喜苓林蓓朱连成王欢从建萍郝莹莹梁秀云张淑兰
- 关键词：卵巢浆液性肿瘤细胞周期
- Lewisy抗原对人卵巢癌细胞RMG-I-H部分耐药相关蛋白基因表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的探讨细胞表面Lewisy抗原对人卵巢癌细胞系RMG-I-H细胞的部分耐药相关蛋白基因表达的影响。方法RT-PCR法检测转染α1,2-岩藻糖转移酶基因和未转染α1,2-岩藻糖转移酶基因的人卵巢癌细胞系RMG-I-H和RMG-I细胞中,以及10μg/ml抗Lewisy单克隆抗体处理及未处理的RMG-I-H细胞中部分耐药相关蛋白mRNA的表达量。免疫细胞化学方法检测RMG-I和RMG-I-H细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达;分别建立RMG-I和RMG-I-H细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,采取免疫组织化学方法检测移植瘤组织P-gp的表达。结果与RMG-I细胞比较,RMG-I-H细胞中蛋白激酶C-α(PKC-α)、拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)、多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)及MRP-2基因mRNA的相对表达量均显著增高(0.46±0.02vs.0.27±0.05、0.82±0.08vs.0.52±0.04、0.66±0.07vs.0.34±0.12和0.44±0.08vs.0.23±0.05,均P<0.05),而多药耐药基因-1(MDR-1)mRNA的相对表达量显著降低(0.26±0.05vs.0.45±0.08,P<0.05)。免疫化学染色分析显示,不论体内还是体外,P-gp在RMG-I-H细胞中的表达量均显著高于RMG-I细胞中的表达量(均P<0.05)。经Lewisy单克隆抗体处理后,RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及TopoⅠ的mRNA相对表达量均呈时间依赖性下降(均P<0.05),而对照组以上基因mRNA的表达量不随时间的变化而变化(均P>0.05)。经Lewis y抗体处理6h的RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及TopoⅠ的mRNA相对表达量均显著低于对照组(均P<0.05),Lewis y单克隆抗体对上述基因表达的抑制率分别为48.55%、77.50%、70.18%、45.86%和46.13%。结论人卵巢癌细胞表面Lewisy抗原与部分耐药相关蛋白基因表达的调节密切相关。
- 刘晴林蓓王朋丽严丽梅郝莹莹李飞飞朱连成张淑兰
- 关键词：LEWIS卵巢癌耐药相关蛋白
- α1，2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RHG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法利用已经建立的Lewis(y)抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-I-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学法测定基因转染前后裸鼠移植瘤组织Lewis(y)抗原及VEGF的表达。结果基因转染后的裸鼠移置瘤组织细胞表面Lewis(y)抗原及VEGF的表达明显增加。转染组与非转染组之间有统计学意义(P均<0.05)。结论α1,2-岩藻糖转移酶基因转染使卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子VEGF的表达明显增加。
- 李妍林蓓郝莹莹刘娟娟严丽梅张帆朱连成张淑兰
- 关键词：卵巢癌
- α1,2-岩藻糖转移酶基因转导对人卵巢癌细胞RMG-I p38MAPK信号通路介导的凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 以α1,2-岩藻糖转移酶基因转染前后卵巢癌细胞RMG-I、RMG-I-H为细胞模型,用细胞免疫荧光方法检测转染前后细胞p38MAPK和p-p38MAPK的细胞内定位,RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质两个水平检测转染前后细胞p38MAPK表达的变化;以兔抗人IgG抗体处理组为对照,分别利用RT-PCR和Western blot方法检测Lewisy单克隆抗体处理前后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA和蛋白质表达水平的变化;以0.1%DMSO为对照,用流式细胞仪(FCM)检测p38MAPK特异性抑制剂SB203580处理后RMG-I-H凋亡比率的变化,并利用RT-PCR和Western blot方法检测caspase-3的mRNA和蛋白质水平的变化;用RT-PCR方法检测卡铂和SB203580处理后p38MAPK及caspase-3表达的变化.结果表明,RMG-I与RMG-I-H的p38MAPK蛋白主要定位在细胞质,p-p38MAPK蛋白定位在细胞核,转染后p38MAPK的mRNA水平明显高于转染前(P<0.05);Lewisy单克隆抗体处理后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA水平降低(P<0.05),不同浓度SB203580(0.1mmol/L,1mmol/L,10mmol/L)作用下RMG-I-H细胞的凋亡率分别为(15.927±0.861)%、(18.187±0.481)%及(33.565±0.912)%,明显高于空白组和对照组(P<0.05),SB203580处理后caspase-3的mRNA和蛋白质水平均明显高于空白组和对照组(P<0.05),卡铂处理后p38MAPK及caspase-3 mRNA水平均增加,SB203580处理后,caspase-3mRNA水平增加.说明Lewisy抗原介导的卵巢癌细胞凋亡与p38MAPK信号通路有关,可能通过p38MAPK信号通路抑制卵巢癌细胞凋亡,引起耐药性.
- 丛建萍林蓓刘娟娟刘晴李飞飞刘水策高嵩张淑兰
- 关键词：P38MAPK凋亡
- Lewis y抗原及整合素α_5、β_1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义
- 2010年
- 目的:研究Lewis y抗原及整合素α5、β1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测30例卵巢浆液性囊腺癌、11例交界性卵巢浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤、11例正常卵巢组织中Lewis y抗原及整合素α5、β1的表达情况。结果:Lewis y抗原在卵巢浆液性囊腺癌中的阳性表达率为90.0%,明显高于交界性(63.6%)、良性卵巢浆液性囊腺瘤(38.5%)及正常卵巢组织(0)中的表达(P均<0.05)。整合素α5、β1在卵巢浆液性囊腺癌中的阳性表达率分别为86.7%和83.3%,高于两者在交界性(72.7%,72.7%)、良性卵巢浆液性囊腺瘤(69.2%,53.8%)及正常卵巢组织(36.4%,36.4%)中的表达(P均<0.05)。Lewis y抗原及整合素α5、β1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达呈显著正相关(P均<0.01)。结论:Lewis y抗原及整合素α5、β1在卵巢浆液性囊腺癌中的阳性表达率普遍增高,且两者的表达呈显著性正相关。提示Lewis y抗原及整合素α5、β1在卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展中起着重要作用。
- 刘水策李全荣林蓓严丽梅刘晴朱连成王逸飞王长智张淑兰
- 关键词：LEWIS整合素Α5整合素Β1卵巢浆液性肿瘤
