国家自然科学基金(30270688)
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
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- TNF-α增强膀胱上皮细胞清除细胞内肺炎克雷伯杆菌
- 2013年
- 目的:研究TNF-α对膀胱上皮细胞内肺炎克雷伯杆菌生存的影响。方法:以肺炎克雷伯杆菌侵入体外培养的人膀胱上皮细胞(T24细胞)为模型,观察在TNF-α等细胞因子处理条件下,不同时间点细胞内细菌数量变化。结果:单独使用TNF-α使T24细胞内的肺炎克雷伯杆菌K5株细菌数量明显减少,联合使用TNF-α与IFN-γ使胞内活菌数量更显著的减少。而IL-1β对细胞内活菌数量无明显影响。过氧化氢酶可以有效抑制TNF-α与IFN-γ刺激的T24细胞抗菌作用,而一氧化氮合酶抑制剂L-NAME无抑制作用。结论:TNF-α能够增强膀胱上皮细胞对抗细胞内肺炎克雷伯杆菌,抗菌机制与细胞产生活性氧(ROS)有关。
- 张虎山路会侠熊文碧刘伟吴琦
- 关键词：膀胱上皮细胞TNF-Α肺炎克雷伯杆菌
- 克雷伯杆菌分泌因子及菌体成分在细胞内、外刺激肺上皮细胞分泌IL-8的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:通过比较肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae,Kp)分泌因子及菌体成分对经过digitonin处理和未处理的肺上皮细胞株IL8分泌的影响,进一步了解克雷伯杆菌诱导肺上皮细胞炎症反应的信号转导机制。方法:实验分为两组,一组使用能使细胞膜通透性增加的温和去污剂digitonin处理,而另一组不处理。分别用Kp03183的细菌培养上清和超声处理的菌体成分刺激肺上皮细胞株A549,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞IL8表达水平。并用RT-PCR的方法检测肺上皮细胞胞内模式识别受体NOD1的表达。结果:Kp培养上清对未经digitonin处理的细胞IL8分泌无明显增强作用,与对照相比差异无显著意义(p>0.05),菌体成分能刺激IL8分泌增加(P<0.01),但增高不超过一倍。经digitonin处理使细胞膜通透性增加后,Kp培养上清及菌体成分刺激细胞IL8的作用都增强,菌体成分刺激IL8效果更为显著,为对照的3倍,而培养上清作用相对较弱。RT-PCR检测结果表明,肺上皮细胞表达胞内模式识别受体NOD1。结论:菌体成分是诱导炎症反应更有效的刺激物,肺炎克雷柏杆菌侵入肺上皮细胞可能是引发细胞炎症反应的始动环节。肺上皮细胞表达胞内模式识别受体NOD1,它是否参与肺上皮细胞识别肺炎克雷伯杆菌菌体成分,值得进一步的研究。
- 周敏燕王国兴冯云黄宁王伯瑶吴琦
- 关键词：分泌因子上皮细胞分泌细胞内IL-8分泌肺上皮细胞细胞株A549
- 肺炎克雷伯杆菌分泌因子及活菌诱导人肺上皮细胞表达分泌IL-8的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测细胞IL 8表达量。结果 :①两株Kp培养上清分别刺激A5 49或SPC A 1后 ,IL 8表达量均有显著增高 (P <0 .0 1 ) ,且随上清刺激浓度增加而上升。②两株Kp及DH5 (活菌分别与SPC A 1共孵育 2h ,用庆大霉素杀死胞外菌 ,继续孵育 2 4h后两株Kp诱导细胞IL 8表达量均显著高于DH5α(P <0 .0 1 ) ,且随细菌数 /细胞数比例增大而上升。结论 :Kp分泌因子及活菌都能够诱导肺上皮细胞IL 8表达 ,而活菌上调IL 8的效应较培育上清分泌因子更显著 ,提示肺上皮细胞在Kp感染刺激的肺部炎症反应中起重要作用。
- 陈襄文王芳周敏燕冯云黄宁王伯瑶吴琦
- 关键词：肺炎克雷伯杆菌IL-8分泌因子活菌细胞株A549DH5Α
- 结核分支杆菌培养上清诱导呼吸道上皮细胞IL-8表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :观察呼吸道上皮细胞对结核杆菌产物产生的炎症反应 ,探讨炎症反应信号传递的机制。方法 :制备结核分枝杆菌强毒力H37RV株培养上清 ,用培养上清刺激肺上皮细胞株SPC A 1和A5 49,酶联免疫吸附实验检测细胞IL 8表达量。用突变MyD88表达重组质粒转染SPC A 1细胞 ,观察MyD88与结核杆菌培养上清诱导上皮细胞炎症反应信号传递的关系。结果 :结核分枝杆菌强毒力H37RV株培养上清明显增加SPC A 1和A5 49细胞IL 8的表达。用突变MyD88表达重组质粒 pcDNA3 .1 mMyD88转染SPC A 1 ,结果显著抑制了结核杆菌培养上清对SPC A 1细胞的炎症刺激作用。结论 :结核杆菌培养上清能够诱导呼吸道上皮细胞IL 8表达 ,Toll/IL 1受体信号通路及MyD88分子与细胞炎症反应的信号传递相关 ,提示在肺结核病发病过程中 ,结核杆菌的代谢产物可能刺激肺上皮细胞产生炎症细胞因子 。
- 王芳冯艳陈襄文冯云黄宁王伯瑶吴琦
- 关键词：呼吸道上皮细胞培养上清结核分支杆菌SPC-A-1细胞H37RV上皮细胞株
- 绿脓菌素激活MAPKs、NF-κB信号通路诱导呼吸道上皮细胞IL-8表达被引量：1
- 2005年
- 采用绿脓杆菌培养上清及绿脓菌素刺激人呼吸道上皮细胞株A5 4 9和SPC A 1,用ELISA方法检测细胞IL 8分泌水平 ,并使用免疫印迹 (Westernblot)方法观察绿脓菌素对细胞内重要的炎症信号传导途径NF κB及丝裂原激活蛋白激酶 (MAPKs)的激活作用。实验发现 ,绿脓杆菌培养上清及绿脓菌素可诱导呼吸道上皮细胞株IL 8分泌增加 ,且具有剂量依赖效应。绿脓菌素刺激细胞可使细胞内IκB α发生降解 ,同时使MAPK家族蛋白分子 (ERK1 2、p38、JNK)发生磷酸化。MEK1 2 (ERK1 2激酶 )抑制剂U0 12 6 (10 μmol L)和p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80 (10 μmol L)可降低绿脓菌素诱导A5 4 9细胞IL 8的合成。以上结果显示绿脓菌素通过MAPK信号传导通路增强呼吸道上皮细胞IL 8的表达 ;NF κB通路也参与了绿脓菌素调控细胞IL
- 冯艳王芳李响王伯瑶吴琦
- 关键词：呼吸道上皮细胞绿脓菌素丝裂原激活蛋白激酶核转录因子NF-ΚB
