重庆市自然科学基金(CSTC2005BB5309)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：赵培罗春丽冀慧莹吕纯芳吴绮思更多>>
- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:应用基因表达谱芯片研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响。方法:MTT法测定藏花素对T24细胞的生长抑制率,选出藏花素最佳作用时间和浓度,运用高通量的基因表达谱芯片检测藏花素作用T24细胞前后基因表达谱的变化,筛选差异表达基因。RT-PCR和免疫细胞化学验证上调基因p21^(WAF1)和下调基因cyclinD1。结果:MTT实验结果显示3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h的抑制率与对照组相比有显著意义(P<0.05)。基因芯片检测发现3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h引起该细胞系基因表达谱广泛地改变,其中表达差异2倍以上的基因共836个,这些差异表达基因的功能涉及多个方面,最为明显的是与细胞生长调节相关的细胞周期调节基因、细胞凋亡调控基因、DNA复制相关基因等类型。RT-PCR检测其中的细胞周期调节相关基因p21^(WAF1)和cyclinD1,结果与基因芯片相符。同时免疫细胞化学结果从蛋白表达水平上佐证p21^(WAF1)和cyclinD1变化与芯片结果一致。结论:藏花素可以诱导T24细胞基因表达谱广泛的改变,并可能通过调控细胞周期相关基因的表达来抑制T24细胞的增殖。
- 吕纯芳罗春丽冀慧莹赵培
- 关键词：膀胱移行细胞癌基因表达谱芯片
- RNAi沉默PLCε对Crocin抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用调控的研究
- 2008年
- 目的:观察RNAi沉默膀胱癌BIU-87细胞磷脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)表达后对藏花素(Crocin)抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响。方法:将携有siRNA基因的真核表达质粒PGenesil-PLCε转染BIU-87细胞后,分为5组:未转染组、pGenesil-NP阴性质粒组、pGenesil-PLCε质粒组、Crocin组、pGenesil-PLCε联合Crocin组。MTT法观察不同处理组对BIU-87细胞的生长抑制作用。RT-PCR法检测转染后对PLCεmRNA表达的影响及各处理组PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)、CyclinD1 mRNA表达。Western-blot检测PCNA、CyclinD1蛋白表达。结果:RNAi可抑制BIU-87细胞78.06%的PLCεmRNA表达。pGenesil-PLCε联合Crocin组可增强Crocin对BIU-87细胞的生长抑制作用,48h抑制率达45.30%,且与pGenesil-PLCε质粒组和Crocin组相比较有显著性差异(P<0.01)。RT-PCR和Western-blot结果显示与RNAi沉默PLCε组比较,RNAi PLCε联合Crocin组明显下调了PCNA、Cyclin D1基因和蛋白的表达(P<0.05);较单独Crocin组比较,RNAi PLCε联合Crocin组显著降低了PCNA基因和蛋白的表达(P<0.05),降低了Cyclin D1蛋白的表达(P<0.05),Cyclin D1 mRNA表达变化两组间无显著性差异(P>0.05)。结论:沉默PLCε基因可增强Crocin对BIU-87细胞的抑制作用,其机制与进一步下调PCNA、CyclinD1的表达有关。
- 冀慧莹吴绮思郭永灿吕纯芳赵培罗春丽
- 关键词：RNA干扰膀胱癌CROCIN增殖
- 藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞VEGF-C表达水平的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)表达水平的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度及不同时间藏花素对T24细胞抑制率,选出最佳药物浓度和最佳作用时间。用RT-PCR和基因芯片分别检测最佳作用时间和最佳药物浓度作用前后T24细胞VEGF-C的表达。结果:MTT显示藏花素抑制T24细胞生长具有时间和剂量依从性,3mmol/L藏花素作用48h对T24细胞的抑制率最高。RT-PCR显示藏花素组VEGF-C表达明显减少,基因芯片扫描结果中藏花素组VEGF-C表达也显著下调。结论:藏花素抑制T24细胞增殖,可能与下调VEGF-C的表达,从而减少肿瘤血管的生成有关。
- 吕纯芳罗春丽冀慧莹赵培
- 关键词：膀胱移行细胞癌
- 藏红花素对人膀胱移行细胞BIU-87细胞抗增殖作用研究被引量：8
- 2008年
- 目的研究藏红花素(crocin)对人膀胱移行细胞株BIU-87增殖的作用及机制。方法MTT法测定crocin抗增殖效应,FCM分析细胞周期分布,RT-PCR技术测定CyclinD1,p27kip1mRNA表达变化,Westernblot检测CyclinD1,p27kip1蛋白表达变化。结果crocin对细胞生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖关系。FCM检测显示,crocin可使细胞阻滞于G0/G1期;3.2mmol/Lcrocin作用于BIU-87细胞后RT-PCR结果显示,CyclinD1mRNA表达明显下调,p27mRNA无显著变化;Westernblot结果表明CyclinD1蛋白明显下调;p27kip1蛋白表达显著增加。结论crocin对细胞有抗增殖作用,可阻滞细胞于G0/G1期,其可影响CyclinD1mRNA转录,但并不影响p27mRNA表达水平,并调控CyclinD1、p27kip1蛋白表达。
- 冀慧莹吴绮思赵培吕纯芳吴小候罗春丽
- 关键词：抗增殖细胞周期BIU-87细胞
